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构建假单胞菌突变株M18GQ携带重组质粒pME6032Phz的工程菌株及响应面法优化吩嗪-1-羧酸发酵条件的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 绪论第10-33页
    1.1 假单胞菌的生防机制第10-16页
        1.1.1 植物根际促生细菌第10-11页
        1.1.2 假单胞菌的生防作用机制第11-15页
        1.1.3 假单胞菌M18 在生物防治方面的研究及应用第15-16页
    1.2 吩嗪-1-羧酸的生物合成与调控第16-27页
        1.2.1 吩嗪的生物合成途径第17-19页
        1.2.2 吩嗪生物合成调控的影响因素第19-26页
        1.2.3 假单胞菌M18 基因工程菌的研究第26-27页
    1.3 商业化农用抗生素的发展第27-31页
        1.3.1 菌株的筛选与改良第27-28页
        1.3.2 发酵培养基的优化第28-30页
        1.3.3 发酵过程中的重要影响因素第30-31页
    1.4 本课题研究目的、内容及意义第31-33页
第二章 吩嗪基因簇表达质粒PME6032PHZ 的构建及其对M18 野生型和突变株PCA 产量的影响 24?第33-44页
    2.1 引言第33-34页
    2.2 材料与方法第34-38页
        2.2.1 菌株、质粒及引物第34页
        2.2.2 PCR 的引物及反应条件第34-35页
        2.2.3 DNA 提取,胶回收,质粒抽提,酶切和酶连第35-36页
        2.2.4 培养基第36页
        2.2.5 培养条件第36页
        2.2.6 生长曲线测定第36-37页
        2.2.7 PCA 定量分析第37页
        2.2.8 试剂(盒)、仪器与设备第37-38页
    2.3 结果与分析第38-42页
        2.3.1 phz 合成基因簇的PCR 扩增第38页
        2.3.2 重组质粒pME6032Phz 的构建和验证第38-40页
        2.3.3 pME6032Phz 对M18 野生型及其突变株M18G、M18Q 和M18GQ PCA 产量的影响第40-41页
        2.3.4 重组质粒pME6032Phz 对M18GQ 生长的影响第41-42页
    2.4 本章小结第42-44页
第三章 PCA 高产工程菌株M18GQ/PME6032PHZ 培养条件的初筛和诱导条件的优化第44-54页
    3.1 引言第44-45页
    3.2 材料与方法第45-47页
        3.2.1 菌株第45页
        3.2.2 培养基第45页
        3.2.3 培养方法第45-46页
        3.2.4 M18GQ/pME6032Phz 菌株培养条件和培养基成分的单因子筛选第46页
        3.2.5 M18GQ/pME6032Phz 菌株诱导条件的优化第46页
        3.2.6 PCA 定量分析第46页
        3.2.7 仪器与设备第46-47页
    3.3 结果与分析第47-52页
        3.3.1 装液量和培养基浓度对PCA 产量的影响第47-49页
        3.3.2 培养基起始pH 值对PCA 产量的影响第49页
        3.3.3 无机盐对PCA 产量的影响第49-51页
        3.3.4 I PTG 诱导的最优浓度第51-52页
        3.3.5 IPTG 开始诱导的最优时间第52页
    3.4 本章小结第52-54页
第四章 响应面方法优化M18GQ/PME6032PHZ 菌株发酵培养基第54-65页
    4.1 引言第54-55页
    4.2 材料与方法第55-57页
        4.2.1 菌株第55页
        4.2.2 培养基第55页
        4.2.3 培养方法第55页
        4.2.4 M18GQ/pME6032Phz 菌株发酵培养基响应面优化方法第55-56页
        4.2.5 PCA 定量分析第56-57页
        4.2.6 仪器与设备第57页
    4.3 结果与分析第57-63页
        4.3.1 部分因子设计筛选影响产PCA 的重要因素第57-58页
        4.3.2 最陡爬坡实验第58-59页
        4.3.3 中心组合设计和响应面分析第59-63页
        4.3.4 模型验证第63页
    4.4 本章小结第63-65页
第五章 结论和展望第65-68页
    5.1 主要结论第65-66页
    5.2 研究展望第66-67页
    5.3 创新点第67-68页
参考文献第68-80页
致谢第80-81页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文第81-83页

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