摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-33页 |
1.1 假单胞菌的生防机制 | 第10-16页 |
1.1.1 植物根际促生细菌 | 第10-11页 |
1.1.2 假单胞菌的生防作用机制 | 第11-15页 |
1.1.3 假单胞菌M18 在生物防治方面的研究及应用 | 第15-16页 |
1.2 吩嗪-1-羧酸的生物合成与调控 | 第16-27页 |
1.2.1 吩嗪的生物合成途径 | 第17-19页 |
1.2.2 吩嗪生物合成调控的影响因素 | 第19-26页 |
1.2.3 假单胞菌M18 基因工程菌的研究 | 第26-27页 |
1.3 商业化农用抗生素的发展 | 第27-31页 |
1.3.1 菌株的筛选与改良 | 第27-28页 |
1.3.2 发酵培养基的优化 | 第28-30页 |
1.3.3 发酵过程中的重要影响因素 | 第30-31页 |
1.4 本课题研究目的、内容及意义 | 第31-33页 |
第二章 吩嗪基因簇表达质粒PME6032PHZ 的构建及其对M18 野生型和突变株PCA 产量的影响 24? | 第33-44页 |
2.1 引言 | 第33-34页 |
2.2 材料与方法 | 第34-38页 |
2.2.1 菌株、质粒及引物 | 第34页 |
2.2.2 PCR 的引物及反应条件 | 第34-35页 |
2.2.3 DNA 提取,胶回收,质粒抽提,酶切和酶连 | 第35-36页 |
2.2.4 培养基 | 第36页 |
2.2.5 培养条件 | 第36页 |
2.2.6 生长曲线测定 | 第36-37页 |
2.2.7 PCA 定量分析 | 第37页 |
2.2.8 试剂(盒)、仪器与设备 | 第37-38页 |
2.3 结果与分析 | 第38-42页 |
2.3.1 phz 合成基因簇的PCR 扩增 | 第38页 |
2.3.2 重组质粒pME6032Phz 的构建和验证 | 第38-40页 |
2.3.3 pME6032Phz 对M18 野生型及其突变株M18G、M18Q 和M18GQ PCA 产量的影响 | 第40-41页 |
2.3.4 重组质粒pME6032Phz 对M18GQ 生长的影响 | 第41-42页 |
2.4 本章小结 | 第42-44页 |
第三章 PCA 高产工程菌株M18GQ/PME6032PHZ 培养条件的初筛和诱导条件的优化 | 第44-54页 |
3.1 引言 | 第44-45页 |
3.2 材料与方法 | 第45-47页 |
3.2.1 菌株 | 第45页 |
3.2.2 培养基 | 第45页 |
3.2.3 培养方法 | 第45-46页 |
3.2.4 M18GQ/pME6032Phz 菌株培养条件和培养基成分的单因子筛选 | 第46页 |
3.2.5 M18GQ/pME6032Phz 菌株诱导条件的优化 | 第46页 |
3.2.6 PCA 定量分析 | 第46页 |
3.2.7 仪器与设备 | 第46-47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-52页 |
3.3.1 装液量和培养基浓度对PCA 产量的影响 | 第47-49页 |
3.3.2 培养基起始pH 值对PCA 产量的影响 | 第49页 |
3.3.3 无机盐对PCA 产量的影响 | 第49-51页 |
3.3.4 I PTG 诱导的最优浓度 | 第51-52页 |
3.3.5 IPTG 开始诱导的最优时间 | 第52页 |
3.4 本章小结 | 第52-54页 |
第四章 响应面方法优化M18GQ/PME6032PHZ 菌株发酵培养基 | 第54-65页 |
4.1 引言 | 第54-55页 |
4.2 材料与方法 | 第55-57页 |
4.2.1 菌株 | 第55页 |
4.2.2 培养基 | 第55页 |
4.2.3 培养方法 | 第55页 |
4.2.4 M18GQ/pME6032Phz 菌株发酵培养基响应面优化方法 | 第55-56页 |
4.2.5 PCA 定量分析 | 第56-57页 |
4.2.6 仪器与设备 | 第57页 |
4.3 结果与分析 | 第57-63页 |
4.3.1 部分因子设计筛选影响产PCA 的重要因素 | 第57-58页 |
4.3.2 最陡爬坡实验 | 第58-59页 |
4.3.3 中心组合设计和响应面分析 | 第59-63页 |
4.3.4 模型验证 | 第63页 |
4.4 本章小结 | 第63-65页 |
第五章 结论和展望 | 第65-68页 |
5.1 主要结论 | 第65-66页 |
5.2 研究展望 | 第66-67页 |
5.3 创新点 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第81-83页 |