| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-22页 |
| 第一章 SOCS家族的简介 | 第12-17页 |
| ·SOCS家族的发现 | 第12页 |
| ·SOCS家族的结构特点 | 第12-13页 |
| ·SOCS家族的表达调节 | 第13-14页 |
| ·SOCS家族的生理功能 | 第14-17页 |
| 第二章 SOCS3在胰岛素信号通路中的研究 | 第17-22页 |
| ·SOCS3的生物学特性 | 第17页 |
| ·SOCS3的作用机理 | 第17-18页 |
| ·SOCS3与胰岛素抵抗 | 第18-21页 |
| ·展望 | 第21-22页 |
| 实验研究 | 第22-55页 |
| 前言 | 第22-23页 |
| 第三章 胰岛素对猪脂肪细胞分化及SOCS3表达的影响 | 第23-31页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·猪脂肪细胞的原代培养 | 第23页 |
| ·细胞的试验处理 | 第23-24页 |
| ·细胞的油红O染色 | 第24页 |
| ·细胞的总RNA提取 | 第24页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增 | 第25页 |
| ·凝胶电泳及凝胶成像和定量分析 | 第25页 |
| ·细胞的总蛋白提取 | 第25页 |
| ·Western blotting | 第25-26页 |
| ·数据分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·胰岛素最佳处理浓度的筛选 | 第26-27页 |
| ·胰岛素处理的猪脂肪细胞的分化情况 | 第27-28页 |
| ·胰岛素处理的猪脂肪细胞SOCS3基因的表达 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 SOCS3基因重组腺病毒的构建 | 第31-44页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-39页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·质粒转化DH5α感受态细胞 | 第32页 |
| ·质粒的小量提取 | 第32-33页 |
| ·SOCS3基因的扩增及片段的回收 | 第33-34页 |
| ·重组病毒穿梭质粒的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒pAd-SOCS3的构建与鉴定 | 第35-37页 |
| ·pAd-SOCS3的扩繁、大量提取、线性化及乙醇沉淀 | 第37页 |
| ·重组病毒的包装、扩增 | 第37-38页 |
| ·重组病毒Ad-SOCS3的滴度测定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·pcDNA3-SOCS3质粒的提取及SOCS3基因的扩增 | 第39页 |
| ·SOCS3片段的双酶切及回收 | 第39-40页 |
| ·pAdTrack-CMV质粒的提取、双酶切及回收 | 第40页 |
| ·重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-SOCS3的筛选 | 第40页 |
| ·pAdTrack-CMV-SOCS3的鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pAd-SOCS3的筛选 | 第41页 |
| ·pAd-SOCS3的鉴定 | 第41-42页 |
| ·pAd-SOCS3的包装 | 第42-43页 |
| ·Ad-SOCS3的扩增及病毒滴度测定 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 第五章 重组腺病毒感染猪脂肪细胞 | 第44-49页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·猪脂肪细胞的原代培养 | 第44页 |
| ·Ad-SOCS3不同感染复数(MOI)的测定 | 第44页 |
| ·Ad-SOCS3感染猪脂肪细胞 | 第44-45页 |
| ·感染Ad-SOCS3的猪脂肪细胞SOCS3表达的检测 | 第45页 |
| ·数据分析 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·猪脂肪细胞的形态学观察 | 第45-46页 |
| ·感染Ad-SOCS3的猪脂肪细胞的形态及GFP表达的观察 | 第46-47页 |
| ·感染Ad-SOCS3的猪脂肪细胞SOCS3的表达 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第六章 超表达SOCS3对猪脂肪细胞胰岛素信号通路的影响 | 第49-55页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-50页 |
| ·猪脂肪细胞的原代培养 | 第49页 |
| ·猪脂肪细胞的感染及处理 | 第49-50页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第50页 |
| ·Western blotting | 第50页 |
| ·数据分析 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·Ad-SOCS3对猪脂肪细胞的感染 | 第50-51页 |
| ·超表达SOCS3抑制了猪脂肪细胞的胰岛素信号通路 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 创新点 | 第56-57页 |
| 有待进一步研究的问题 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 缩略词表 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
