摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
符号与缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-32页 |
1.1 L-氨基酸氧化酶概述 | 第12页 |
1.2 酶活检测方法 | 第12-13页 |
1.3 酶的分离纯化 | 第13-14页 |
1.4 酶学特性 | 第14-15页 |
1.5 结构特性 | 第15-18页 |
1.6 基因克隆与表达 | 第18-19页 |
1.7 生物功能特性 | 第19-21页 |
1.8 应用 | 第21-22页 |
1.9 结论 | 第22页 |
1.10 选题意义、技术路线、研究内容及目标 | 第22-24页 |
1.10.1 选题意义 | 第22-23页 |
1.10.2 技术路线 | 第23页 |
1.10.3 研究内容 | 第23-24页 |
1.10.4 研究目标 | 第24页 |
参考文献 | 第24-32页 |
第二章 海洋源细菌B3产LAAO的验证及其发酵条件的优化 | 第32-46页 |
2.1 前言 | 第32-33页 |
2.2 材料与方法 | 第33-36页 |
2.2.1 菌种来源 | 第33页 |
2.2.2 主要仪器 | 第33页 |
2.2.3 主要药品与试剂 | 第33-34页 |
2.2.4 培养基 | 第34页 |
2.2.5 培养方法 | 第34页 |
2.2.6 海洋源细菌B3产LAAO的验证 | 第34-35页 |
2.2.7 胞内酶与胞外酶的检测 | 第35页 |
2.2.8 菌株B3发酵条件的优化 | 第35-36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-44页 |
2.3.1 酶活的检测 | 第36-39页 |
2.3.2 培养条件的优化 | 第39-44页 |
2.4 本章小结 | 第44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第三章 海洋源细菌B3的分类鉴定 | 第46-57页 |
3.1 前言 | 第46页 |
3.2 材料与方法 | 第46-50页 |
3.2.1 菌株 | 第46页 |
3.2.2 主要仪器 | 第46-47页 |
3.2.3 主要药品与试剂 | 第47页 |
3.2.4 培养基 | 第47-48页 |
3.2.5 培养方法 | 第48页 |
3.2.6 菌株B3生物学特性研究 | 第48-50页 |
3.3 结果与讨论 | 第50-55页 |
3.3.1 形态观察 | 第50页 |
3.3.2 菌株B3生长特性的研究 | 第50-53页 |
3.3.3 生理生化特性研究 | 第53-54页 |
3.3.4 16S rDNA的分子生物学鉴定 | 第54-55页 |
3.4 本章小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
第四章 LAAO的分离纯化及其酶活性质的研究 | 第57-75页 |
4.1 前言 | 第57页 |
4.2 材料与方法 | 第57-63页 |
4.2.1 菌株 | 第57页 |
4.2.2 主要仪器 | 第57-58页 |
4.2.3 主要药品及试剂 | 第58-59页 |
4.2.4 培养基 | 第59页 |
4.2.5 培养方法 | 第59页 |
4.2.6 LAAO分离纯化方案 | 第59-60页 |
4.2.7 硫酸铵盐析 | 第60页 |
4.2.8 脱盐 | 第60-61页 |
4.2.9 等电点测定 | 第61页 |
4.2.10 DEAE阴离子交换层析 | 第61页 |
4.2.11 苯基疏水层析 | 第61-62页 |
4.2.12 凝胶层析 | 第62页 |
4.2.13 酶学性质研究 | 第62-63页 |
4.3 结果与讨论 | 第63-74页 |
4.3.1 盐析饱和度的确定 | 第63-64页 |
4.3.2 等电点的确定 | 第64-65页 |
4.3.3 脱盐 | 第65页 |
4.3.4 LAAO柱层析分离 | 第65-69页 |
4.3.5 LAAO分离纯化结果 | 第69页 |
4.3.6 LAAO电泳鉴定结果 | 第69-70页 |
4.3.7 LAAO酶学性质的研究 | 第70-74页 |
4.4 本章小结 | 第74页 |
参考文献 | 第74-75页 |
第五章 LAAO的分子克隆及序列分析 | 第75-107页 |
5.1 前言 | 第75页 |
5.2 材料与方法 | 第75-83页 |
5.2.1 菌种 | 第75页 |
5.2.2 主要仪器 | 第75-76页 |
5.2.3 主要试剂 | 第76页 |
5.2.4 方法 | 第76-83页 |
5.3 结果与讨论 | 第83-106页 |
5.3.1 菌株B3基因组DNA的获得 | 第83页 |
5.3.2 LAAO基因的扩增 | 第83-94页 |
5.3.3 序列分析及结构预测 | 第94-106页 |
5.4 本章小结 | 第106页 |
参考文献 | 第106-107页 |
第六章 总结与展望 | 第107-109页 |
6.1 结论 | 第107-108页 |
6.2 展望 | 第108-109页 |
附录1:双氧水含量测定 | 第109-111页 |
附录2:蛋白质含量测定 | 第111-113页 |
附录3:SDS-PAGE | 第113-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
攻读硕士学位期间主要科研成果 | 第118页 |