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苹果(Malus domestica Borkh)遗传转化体系的建立及ipt基因的导入

中文摘要第3-4页
英文摘要第4页
缩略词第6-11页
第一章 文献综述第11-28页
    1.1 根癌农杆菌介导苹果遗传转化研究进展第11-18页
        1.1.1 高效离体再生系统的影响因素第11-15页
            1.1.1.1 内因第13-14页
            1.1.1.2 外因第14-15页
        1.1.2 高效遗传转化系统的影响因素第15-18页
            1.1.2.1 内因第15-16页
            1.1.2.2 外因第16-18页
    1.2 植物基因转化技术在苹果遗传改良中的应用第18-22页
        1.2.1 苹果遗传转化技术研究第18-20页
            1.2.1.1 遗传转化体系第18-19页
            1.2.1.2 选择标记基因第19页
            1.2.1.3 报告基因第19-20页
            1.2.1.4 外源基因在苹果后代中遗传学行为第20页
        1.2.2 在苹果品种改良研究中的应用第20-22页
            1.2.2.1 抗病虫害育种第20-21页
            1.2.2.2 选育矮化苹果品种第21页
            1.2.2.3 培育易生根的苹果品种第21-22页
            1.2.2.4 选育耐贮运的苹果品种第22页
            1.2.2.5 选育耐除草剂苹果品种第22页
    1.3 苹果遗传转化中存在的问题、应用前景及展望第22-23页
        1.3.1 存在的问题第22页
        1.3.2 应用前景及展望第22-23页
            1.3.2.1 探索有效的基因转化方法第23页
            1.3.2.2 和常规育种结合第23页
            1.3.2.3 加强苹果基因组研究第23页
    1.4 ipt基因工程研究进展第23-27页
        1.4.1 细胞分裂素生物合成基因第24页
        1.4.2 ipt基因转化植物所使用的启动子第24-25页
        1.4.3 基因表达的生物学效应第25-26页
            1.4.3.1 ipt基因表达对内源激素水平的影响第25-26页
            1.4.3.2 ipt基因的表达对转基因植物表型的影响第26页
            1.4.3.3 细胞分裂素诱导衰老的延迟第26页
            1.4.3.4 细胞分裂素所参与的防御反应第26页
        1.4.4 展望第26-27页
            1.4.4.1 细胞分裂素生物合成的研究第26-27页
            1.4.4.2 细胞分裂素作用机理的研究第27页
            1.4.4.3 利用细胞分裂素基因工程进行遗传育种研究第27页
    1.5 试验研究的目的和意义第27-28页
第二章 苹果离体叶片高频再生系统的建立第28-42页
    2.1 材料与方法第28-31页
        2.1.1 试验材料第28页
        2.1.2 试验方法第28-31页
            2.1.2.1 试材继代培养基确定第29页
            2.1.2.2 离体叶片分化培养基不同细胞分裂素配比设置第29-30页
            2.1.2.3 叶片极性试验处理第30页
            2.1.2.4 离体叶片暗培养时间的设置第30页
            2.1.2.5 CH(水解酪蛋白)和LH(水解乳蛋白)对叶片再生频率的影响第30页
            2.1.2.6 AgNO_3(分子量169.78)处理第30页
            2.1.2.7 再生不定芽的生根试验设计第30页
            2.1.2.8 结果调查统计指标第30-31页
    2.2 试验结果与分析第31-39页
        2.2.1 试材继代培养基确定第31-32页
        2.2.2 不同细胞分裂素对苹果离体叶片再生频率的影响第32-36页
            2.2.2.1 BA对不同苹果离体叶片再生频率的影响第32-33页
            2.2.2.2 CPPU对不同苹果离体叶片再生频率的影响第33-34页
            2.2.2.3 TDZ对不同苹果离体叶片再生频率的影响第34-36页
            2.2.2.4 其它细胞分裂素对富士苹果离体叶片再生频率的影响第36页
        2.2.3 叶片极性对不定芽分化频率的影响第36-37页
        2.2.4 暗培养时间对不定芽分化频率的影响第37页
        2.2.5 CH(水解酪蛋白)和LH(水解乳蛋白)对叶片再生频率的影响第37-38页
        2.2.6 AgNO_3(分子量169.78)对苹果叶片再生频率影响试验第38页
        2.2.7 再生不定芽的生根试验第38-39页
    2.3 讨论第39-40页
        2.3.1 关于影响苹果离体叶片再生的外部因子第39-40页
        2.3.2 关于影响苹果离体叶片再生的内部因子第40页
    2.4 结论第40-42页
第三章 苹果遗传转化中对抗生素抗性敏感性试验的研究第42-47页
    3.1 试验材料与方法第42-43页
        3.1.1 试验材料第42页
        3.1.2 试验方法第42-43页
            3.1.2.1 抗生素对离体叶片再生频率的影响第42页
            3.1.2.2 抗生素对不定芽生长、生根的影响第42-43页
    3.2 结果和分析第43-45页
        3.2.1 抗生素对离体叶片再生频率的影响第43-45页
        3.2.2 抗生素对试管苗生根的影响第45页
    3.3 讨论第45-46页
        3.3.1 关于苹果转化的选择培养第45-46页
        3.3.2 关于苹果的脱菌培养第46页
    3.4 结论第46-47页
第四章 苹果转化体系的建立第47-59页
    4.1 材料和方法第47-49页
        4.1.1 试验材料第47-48页
        4.1.2 试验方法第48-49页
            4.1.2.1 农杆菌类型及适宜共培养时间第48页
            4.1.2.2 农杆菌浸染苹果离体叶片适宜浓度的确定第48页
            4.1.2.3 共培养时叶片放置方向第48页
            4.1.2.4 叶片切割方式第48页
            4.1.2.5 AS(乙酰丁香酮)和Pro(脯氨酸)第48-49页
            4.1.2.6 苹果基因型(品种)和共培养时间相互作用试验第49页
            4.1.2.7 延次选择第49页
            4.1.2.8 转化早期GUS检测第49页
    4.2 结果与分析第49-56页
        4.2.1 不同农杆菌及不同暗培养时间对苹果叶片的瞬时表达第49-52页
        4.2.2 不同浓度农杆菌浸染苹果叶片的瞬时表达第52页
        4.2.3 共培养时叶片放置方式对转化的影响第52-53页
        4.2.4 叶片切割方式对转化的影响第53页
        4.2.5 AS和Pro对转化的影响第53-54页
        4.2.6 苹果基因型对转化效率的影响第54-55页
        4.2.7 延次选择天数对转化的影响第55-56页
    4.3 讨论第56-58页
        4.3.1 关于农杆菌与外植体共培养问题第56-57页
        4.3.2 关于苹果延迟选择问题第57-58页
    4.4 结论第58-59页
第五章 ipt亡基因导入苹果第59-66页
    5.1 材料和方法第59-62页
        5.1.1 试验材料第59页
        5.1.2 试验方法第59-62页
            5.1.2.1 苹果叶片的遗传转化和生物法检测第59-60页
            5.1.2.2 转基因植株的PCR扩增鉴定第60-62页
            5.1.2.3 多聚酶链式(PCR)扩增所需引物序列第62页
    5.2 结果与分析第62-64页
        5.2.1 苹果叶片的遗传转化及生物性检测第62-63页
        5.2.2 转基因PCR检测第63-64页
    5.3 讨论第64-65页
        5.3.1 关于苹果转基因研究第64页
        5.3.2 关于苹果转化植株的形态第64页
        5.3.3 关于目的基因的表达和鉴定第64-65页
    5.4 结论第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
个人简介第75页

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