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沼泽绿牛蛙皮肤抗菌肽的分离纯化与活性检测

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第1章 绪论第10-24页
    1.1 沼泽绿牛蛙生物学概况及两栖类动物皮肤结构第10-13页
        1.1.1 沼泽绿牛蛙生物学概况第10页
        1.1.2 两栖类动物皮肤结构及活性物质第10-13页
            1.1.2.1 两栖类动物皮肤结构第10-12页
            1.1.2.2 两栖类动物皮肤活性物质第12-13页
    1.2 两栖类动物抗菌肽概述第13-18页
        1.2.1 两栖类动物抗菌肽种类第13-14页
        1.2.2 两栖类动物抗菌肽的理化特性第14页
        1.2.3 两栖类动物抗菌肽的生物活性第14-15页
        1.2.4 抗菌肽作用机制第15-18页
            1.2.4.1 抗菌肽对细菌的作用机制第15-17页
            1.2.4.2 抗菌肽对真菌的作用机制第17页
            1.2.4.3 抗菌肽对病毒的作用机制第17页
            1.2.4.4 抗菌肽对肿瘤细胞、原虫的作用机制第17-18页
    1.3 两栖类皮肤活性抗菌肽的研究现状第18-20页
        1.3.1 国外研究现状第18-19页
        1.3.2 国内研究现状第19-20页
    1.4 抗菌肽的应用前景第20-23页
        1.4.1 用于开发新型抗菌、抗病毒、抗肿瘤药物第20-21页
        1.4.2 应用在转基因工程中第21-22页
        1.4.3 应用于新型绿色饲料添加剂中第22-23页
    1.5 立题依据第23-24页
第2章 不同诱导方式得到沼泽绿牛蛙产物的抗菌活性比较第24-33页
    2.1 实验材料第24-25页
    2.2 实验设备第25页
    2.3 实验方法第25-27页
        2.3.1 样品收集第25-27页
            2.3.1.1 蛙皮分泌液的收集第25-26页
            2.3.1.2 蛙皮粗提取液的收集第26页
            2.3.1.3 蛙血清中抗菌物质的诱导与收集第26-27页
        2.3.2 检测抑菌活性第27页
    2.4 结果第27-29页
    2.5 讨论第29-33页
        2.5.1 不同诱导方式的选择依据第29-30页
        2.5.2 不同诱导方式的抑菌结果第30-33页
            2.5.2.1 四种样品对细菌抑菌结果第30-31页
            2.5.2.2 四种样品对酵母菌抑菌结果第31页
            2.5.2.3 四种样品抑菌结果的比较第31-33页
第3章 蛙皮分泌液的分离纯化第33-46页
    3.1 实验材料第33-34页
    3.2 实验设备第34-35页
    3.3 实验方法第35-38页
        3.3.1 凝胶过滤层析分离第35-36页
            3.3.1.1 Sephadex G-50凝胶过滤第35-36页
            3.3.1.2 抑菌活性测定第36页
            3.3.1.3 凝胶过滤层析脱盐第36页
        3.3.2 制备型反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离第36页
        3.3.3 各峰收集液抑菌实验第36-37页
        3.3.4 纯度鉴定第37-38页
            3.3.4.1 分析型反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测第37页
            3.3.4.2 组分分析第37页
            3.3.4.3 Tricine-SDS-PAGE检测第37-38页
    3.4 结果与分析第38-42页
        3.4.1 凝胶层析分离第38页
        3.4.2 抑菌活性测定第38-39页
        3.4.3 制备型反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离第39-40页
        3.4.4 分离后各峰收集液的抑菌作用第40页
        3.4.5 纯度测定第40-42页
            3.4.5.1 分析型反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测第40-41页
            3.4.5.2 组分分析第41-42页
            3.4.5.3 Tricine-SDS-PAGE检测第42页
    3.5 讨论第42-46页
        3.5.1 凝胶过滤层析分离参数分析第43页
        3.5.2 反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离分析第43-44页
        3.5.3 纯度鉴定第44-46页
第4章 测序分析与性质表征第46-56页
    4.1 实验材料及设备第46-48页
        4.2.1 测序第46-47页
        4.2.2 序列与结构分析第47页
        4.2.3 抗菌肽GUE Ⅰ对七种菌的最低抑制浓度(MIC)测定第47页
        4.2.4 温度和时间对抗菌活性的影响第47页
        4.2.5 胰蛋白酶对抗菌活性的影响第47-48页
        4.2.6 溶血及血液凝固活性测定第48页
    4.3 结果第48-52页
        4.3.1 抗菌肽GUE Ⅰ测序结果第48页
        4.3.2 序列与结构分析第48-50页
        4.3.3 抗菌肽GUE Ⅰ对七种菌的最低抑制浓度(MIC)第50-51页
        4.3.4 温度和时间对抗菌活性的影响第51页
        4.3.5 胰蛋白酶对抗菌活性的影响第51页
        4.3.6 溶血及血液凝固活性测定第51-52页
    4.4 讨论第52-56页
        4.4.1 抗菌肽GUE Ⅰ的序列与结构分析第52页
        4.4.2 抗菌肽GUE Ⅰ对七种菌的MIC第52-53页
        4.4.3 抗菌肽与抗生素作用机制的比较第53-54页
        4.4.4 理化因子对抗菌活性成分的影响第54页
        4.4.5 溶血活性第54-56页
第5章 结论第56-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-65页
攻读学位期间的研究成果第65页

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