| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 代谢组学研究的重要性与不足 | 第10-11页 |
| 1.1.1 代谢组学和代谢通量组学的定义 | 第10-11页 |
| 1.1.2 代谢组学的分类 | 第11页 |
| 1.1.3 代谢组学的研究平台 | 第11页 |
| 1.2 同位素辅助的代谢组学 | 第11-15页 |
| 1.2.1 同位素标记技术 | 第11-13页 |
| 1.2.2 同位素稀释质谱法(IDMS) | 第13-14页 |
| 1.2.3 ~(13)C非稳态代谢通量分析 | 第14-15页 |
| 1.3 毕赤酵母表达系统 | 第15-19页 |
| 1.3.1 外源蛋白表达对毕赤酵母的影响 | 第16页 |
| 1.3.2 毕赤酵母重组蛋白表达生理代谢变化的研究方法 | 第16页 |
| 1.3.3 代谢组学在毕赤酵母上的应用 | 第16-18页 |
| 1.3.4 葡萄糖代谢下外源蛋白表达过程菌体生理代谢的研究概况 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的、内容及意义 | 第19-20页 |
| 第2章 基于LC-MS的代谢组学方法的建立 | 第20-35页 |
| 2.1 引言 | 第20-21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2.2 药品与试剂 | 第21-23页 |
| 2.2.3 流动相及色谱条件 | 第23-25页 |
| 2.2.4 质谱优化 | 第25页 |
| 2.2.5 色谱优化 | 第25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-34页 |
| 2.3.1 质谱优化结果 | 第25-32页 |
| 2.3.2 色谱优化结果 | 第32-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 IDMS定量方法的建立 | 第35-56页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 材料与方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.2.2 药品与试剂 | 第36页 |
| 3.2.3 全扫描模式测定标记化合物 | 第36页 |
| 3.2.4 同位素的检测 | 第36-37页 |
| 3.2.5 仪器稳定性检测 | 第37页 |
| 3.2.6 IDMS标准曲线的绘制 | 第37-38页 |
| 3.2.7 IDMS标准曲线的评价 | 第38页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第38-55页 |
| 3.3.1 同位素检测离子对 | 第38-41页 |
| 3.3.2 同位素检测方法结果 | 第41-43页 |
| 3.3.3 仪器稳定性检测 | 第43-46页 |
| 3.3.4 IDMS标准曲线 | 第46-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第4章 外源蛋白表达强度和谷氨酸添加对毕赤酵母代谢的影响 | 第56-78页 |
| 4.1 引言 | 第56-57页 |
| 4.2 材料与方法 | 第57-66页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第57页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第57页 |
| 4.2.3 药品与试剂 | 第57-59页 |
| 4.2.4 培养基配方及溶液 | 第59-60页 |
| 4.2.5 毕赤酵母的培养 | 第60页 |
| 4.2.6 分析和测定方法 | 第60-66页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第66-77页 |
| 4.3.1 ~(13)C全标菌体的培养 | 第66-67页 |
| 4.3.2 两株菌两种工艺条件下宏观代谢比较 | 第67-68页 |
| 4.3.3 胞内代谢物定量结果和非稳态代谢流的计算 | 第68-71页 |
| 4.3.4 中心碳代谢途径中间体 | 第71页 |
| 4.3.5 能量及还原力 | 第71-72页 |
| 4.3.6 胞内氨基酸 | 第72-73页 |
| 4.3.7 定量结果验证 | 第73页 |
| 4.3.8 ~(13)C代谢通量分析 | 第73-77页 |
| 4.4 本章小结 | 第77-78页 |
| 第5章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 5.1 结论 | 第78页 |
| 5.2 展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附录 | 第89-93页 |
