| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 常用英文缩略语说明一览表 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-28页 |
| 1.1 肝炎疾病概况 | 第15页 |
| 1.2 各类肝炎病理概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 病毒性肝炎 | 第15页 |
| 1.2.2 酒精性肝炎 | 第15页 |
| 1.2.3 自身免疫性肝炎 | 第15-16页 |
| 1.2.4 非酒精性脂肪性肝炎 | 第16页 |
| 1.2.5 药物损伤性肝炎 | 第16-17页 |
| 1.3 药物损伤性肝炎相关细胞因子研究概述 | 第17-24页 |
| 1.3.1 核转录蛋白HMGB-1研究概述 | 第17-21页 |
| 1.3.2 核转录蛋白NF-κB研究概述 | 第21-23页 |
| 1.3.3 核转录蛋白AP-1研究概述 | 第23-24页 |
| 1.3.4 核转录蛋白STAT-3研究概述 | 第24页 |
| 1.4 中药天然产物抗炎保肝研究进展 | 第24-26页 |
| 1.5 立题目的、意义及研究内容 | 第26-28页 |
| 1.5.1 立题目的 | 第26页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第26页 |
| 1.5.3 研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第28-45页 |
| 2.1 主要实验材料与仪器 | 第28-37页 |
| 2.1.1 实验材料与试剂配制 | 第28-36页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第37-45页 |
| 2.2.1 制作组织病理切片 | 第37页 |
| 2.2.2 CCK-8实验 | 第37-38页 |
| 2.2.3 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第38页 |
| 2.2.4 Griess Reaction实验 | 第38-39页 |
| 2.2.5 RT-PCR实验 | 第39-40页 |
| 2.2.6 计算机模拟分子对接 | 第40-41页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀 | 第41-42页 |
| 2.2.8 免疫荧光成像 | 第42页 |
| 2.2.9 Western blot实验 | 第42-45页 |
| 第三章 DMC对CCl_4诱导小鼠急性肝脏炎症损伤的保护作用 | 第45-51页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第45-46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46页 |
| 3.3.1 建立CCl_4诱导小鼠急性肝脏炎症损伤模型 | 第46页 |
| 3.3.2 化学检测试剂盒测定肝脏炎症损伤指标 | 第46页 |
| 3.3.3 肝脏组织病理形态检测 | 第46页 |
| 3.3.4 数据统计分析 | 第46页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第46-50页 |
| 3.4.1 DMC对CCl_4诱导小鼠急性肝脏炎症损伤指标AST和ALT的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.2 DMC对CCl_4诱导小鼠急性肝脏炎症损伤指标ALP和LDH的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.3 DMC对CCl_4诱导小鼠急性肝脏炎症损伤指标T-Bili和γ-GT的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.4 DMC对CCl_4诱导小鼠急性肝脏炎症损伤组织病理形态的影响 | 第49-50页 |
| 3.5 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 考察DMC抗炎保肝主要作用靶点 | 第51-59页 |
| 4.1 引言 | 第51-52页 |
| 4.2 实验材料与试剂 | 第52页 |
| 4.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.3.1 建立Kupffer Cell急性炎症损伤模型 | 第52页 |
| 4.3.2 RT-PCR法检测TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB-1 mRNA转录 | 第52-53页 |
| 4.3.3 ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB-1胞外释放 | 第53页 |
| 4.3.4 数据统计分析 | 第53页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第53-58页 |
| 4.4.1 DMC对LPS诱导Kupffer Cell存活率的影响 | 第53-54页 |
| 4.4.2 DMC对前期炎症因子TNF-α和IL-1β转录与胞外释放的影响 | 第54-55页 |
| 4.4.3 DMC对中期炎症因子IL-6转录与胞外释放的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.4 DMC对后期炎症因子HMGB-1转录与胞外释放的影响 | 第56-58页 |
| 4.5 小结 | 第58-59页 |
| 第五章 DMC对HMGB-1的靶向调控作用机理 | 第59-70页 |
| 5.1 引言 | 第59-60页 |
| 5.2 实验材料与试剂 | 第60-61页 |
| 5.3 实验方法 | 第61-63页 |
| 5.3.1 计算机模拟分子对接法筛选靶向结构域 | 第61页 |
| 5.3.2 免疫共沉淀法验证DMC与HMGB-1的靶向结合作用 | 第61页 |
| 5.3.3 RT-PCR法检测HMGB-1 mRNA转录 | 第61-62页 |
| 5.3.4 ELISA法检测HMGB-1胞内含量 | 第62页 |
| 5.3.5 免疫荧光成像法检测HMGB-1核质迁移 | 第62页 |
| 5.3.6 Western blot法检测HMGB-1核质分布 | 第62-63页 |
| 5.3.7 数据统计分析 | 第63页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第63-68页 |
| 5.4.1 计算机模拟DMC与HMGB-1靶向结合结构域 | 第63-65页 |
| 5.4.2 DMC对HMGB-1磷酸化的影响 | 第65页 |
| 5.4.3 DMC对HMGB-1 mRNA转录的影响 | 第65-66页 |
| 5.4.4 DMC对胞内HMGB-1表达的影响 | 第66页 |
| 5.4.5 DMC对HMGB-1核质迁移的影响 | 第66-67页 |
| 5.4.6 DMC对HMGB-1核质分布的影响 | 第67-68页 |
| 5.5 小结 | 第68-70页 |
| 第六章 DMC对HMGB-1上游相关分子信号途径的影响 | 第70-77页 |
| 6.1 引言 | 第70-71页 |
| 6.2 实验材料与试剂 | 第71页 |
| 6.3 实验方法 | 第71-72页 |
| 6.3.1 免疫共沉淀法验证DMC干扰PKC对HMGB-1的结合激活 | 第71-72页 |
| 6.3.2 Western blot法检测分子信号通路相关蛋白表达 | 第72页 |
| 6.3.3 数据统计分析 | 第72页 |
| 6.4 实验结果与讨论 | 第72-76页 |
| 6.4.1 DMC对PKC结合激活HMGB-1的影响 | 第72-73页 |
| 6.4.2 DMC对cPKC相关亚基磷酸化的影响 | 第73-75页 |
| 6.4.3 DMC对PDK1磷酸化的影响 | 第75页 |
| 6.4.4 DMC对PI3K磷酸化的影响 | 第75-76页 |
| 6.5 小结 | 第76-77页 |
| 第七章 DMC靶向结合B-box(88～97残基)对肝炎的反馈调控作用 | 第77-84页 |
| 7.1 引言 | 第77-78页 |
| 7.2 实验材料与试剂 | 第78页 |
| 7.3 实验方法 | 第78-79页 |
| 7.3.1 建立Kupffer Cell慢性炎症损伤模型 | 第78页 |
| 7.3.2 RT-PCR法检测TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS mRNA转录 | 第78-79页 |
| 7.3.3 ELISA法检测TNF-α、IL-1β和IL-6胞内含量 | 第79页 |
| 7.3.4 Griess Reaction法检测胞内亚硝酸盐浓度 | 第79页 |
| 7.3.5 数据统计分析 | 第79页 |
| 7.4 实验结果与讨论 | 第79-83页 |
| 7.4.1 DMC对前期炎症因子TNF-α和IL-1β转录与胞内表达的影响 | 第79-81页 |
| 7.4.2 DMC对中期炎症因子IL-6和Nitric oxide转录与胞内表达的影响 | 第81-83页 |
| 7.5 小结 | 第83-84页 |
| 第八章 结论、创新点与展望 | 第84-87页 |
| 8.1 结论 | 第84-85页 |
| 8.2 创新点 | 第85页 |
| 8.3 展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 攻读博士阶段撰写的学术论文 | 第103-104页 |
| 攻读博士阶段获奖情况 | 第104页 |
