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以酿酒酵母为模式真菌初探吩嗪-1-羧酸杀抑真菌的机理

摘要第8-10页
abstract第10-11页
符号与缩略语说明第12-14页
前言第14-16页
第一章 文献综述第16-28页
    1. 植物病害情况及防治第16-18页
        1.1 植物病害第16页
        1.2 植物病原真菌及危害第16-17页
        1.3 植物病原真菌防治第17-18页
    2. 生物农药及其优势第18-20页
        2.1 生物农药第18-19页
        2.2 生物农药的优势第19-20页
    3. 生物农药及其杀菌机理的研究第20-22页
        3.1 微生物生物农药及作用机制第20-21页
        3.2 植物性生物农药及作用机制第21-22页
        3.3 动物源生物农药与作用机制第22页
    4. 新型生物农药申嗪霉素的应用及存在的问题第22-24页
        4.1 申嗪霉素的定义及组成第23页
        4.2 申嗪霉素的应用及其优越性第23页
        4.3 申嗪霉素应用存在的问题及发展前景第23-24页
    5. 利用酿酒酵母研究吩嗪-1-羧酸杀抑真菌的可能机制第24-28页
        5.1 模式生物酿酒酵母第24页
        5.2 酿酒酵母中的囊泡运输第24-25页
        5.3 酿酒酵母中的细胞自噬第25-28页
第二章 吩嗪-1-羧酸对酿酒酵母和白假丝酵母生长的影响第28-42页
    1. 材料与方法第28-31页
        1.1 酵母菌第28-29页
        1.2 培养基第29页
        1.3 试剂第29页
        1.4 吩嗪-1-羧酸(PCA)母液的配制第29页
        1.5 仪器第29页
        1.6 实验方法和技术第29-31页
            1.6.1 检测甲醇(用于PCA溶媒)对酵母菌生长的影响第29-30页
            1.6.2 检测丙酮(用于PCA溶媒)对酵母菌生长的影响第30页
            1.6.3 检测PCA(以丙酮为溶媒)对酿酒酵母和白假丝酵母生长的影响第30页
            1.6.4 检测不同pH值的YPD培养基中PCA(以丙酮为溶媒)对酿酒酵母及白假丝酵母生长的影响第30-31页
    2. 结果与分析第31-40页
        2.1 结果第31-39页
            2.1.1 培养基中甲醇浓度达到约20%可抑制甚者杀死酵母菌第31-32页
                2.1.1.1 培养基中甲醇浓度达到约20%可抑制酿酒酵母生长第31页
                2.1.1.2 培养基中甲醇浓度达到约20%可抑制甚者杀死白假丝酵母第31-32页
            2.1.2 浓度达到约20%的丙酮轻微抑制酿酒酵母与白假丝酵母生长第32-34页
                2.1.2.1 浓度达到约20%的丙酮轻微抑制酿酒酵母第32-33页
                2.1.2.2 浓度达到约20%的丙酮轻微抑制白假丝酵母的生长第33-34页
            2.1.3 PCA抑制酵母菌的生长第34-36页
                2.1.3.1 PCA抑制酿酒酵母的生长第34-35页
                2.1.3.2 PCA抑制白假丝酵母的生长第35-36页
            2.1.4 培养基的pH值影响PCA的抑菌效果第36-39页
                2.1.4.1 在pH值越低的YPD中,PCA能更好地抑制酿酒酵母的生长第36-38页
                2.1.4.2 在pH值越低的YPD中,PCA能更好地抑制白假丝酵母的生长第38-39页
        2.2 小结第39-40页
    3. 讨论第40-42页
第三章 利用基因芯片分析酿酒酵母经吩嗪-1-羧酸处理后基因表达水平的变化第42-48页
    1. 材料与方法第42-44页
        1.1 酵母菌第42页
        1.2 培养基第42页
        1.3 PCA及使用浓度第42-43页
        1.4 试剂第43页
        1.5 仪器与耗材第43页
        1.6 实验方法和技术第43-44页
            1.6.1 实验原理及基本流程第43-44页
            1.6.2 实验过程第44页
    2. 结果与分析第44-47页
        2.1 不同基因表达水平的变化趋势第44-45页
        2.2 PCA处理对不同代谢途径的影响情况第45-47页
    3. 小结第47-48页
第四章 吩嗪-1-羧酸对酿酒酵母中重要代谢途径的标志性蛋白的影响第48-76页
    1. 材料与方法第48-57页
        1.1 酿酒酵母和质粒第48-49页
            1.1.1 酿酒酵母第48页
            1.1.2 质粒第48-49页
        1.2 培养基第49页
        1.3 PCA及使用浓度第49页
        1.4 试剂第49页
        1.5 仪器第49-50页
        1.6 实验方法和技术第50-57页
            1.6.1 大肠杆菌电击感受态细胞的制备第50页
            1.6.2 PCR产物及质粒酶切产物的纯化第50-51页
            1.6.3 构建CFP荧光蛋白表达载体第51-52页
            1.6.4 电转化第52-53页
            1.6.5 大肠杆菌质粒的提取第53页
            1.6.6 转化质粒到相关酵母菌株第53-54页
            1.6.7 Htb1-GFP荧光标记菌株的制作第54-55页
            1.6.8 荧光观察第55-56页
            1.6.9 Western Blot检测第56-57页
    2. 结果与分析第57-76页
        2.1 结果第57-74页
            2.1.1 PCA影响囊泡运输途径第57-61页
                2.1.1.1 PCA影响外吐途径蛋白Snc1的定位与运输第57-58页
                2.1.1.2 Snc1产生的亮圈结构位于内质网第58-60页
                2.1.1.3 PCA影响小G蛋白Ypt6的定位第60-61页
            2.1.2 PCA对内质网蛋白Pmp2-LRKR定位的影响第61-62页
            2.1.3 PCA对细胞自噬的影响第62-70页
                2.1.3.1 PCA影响Atg8的定位和降解第63-64页
                2.1.3.2 潮霉素B抑制酵母细胞的生长但不影响GFP-Atg8的定位第64-65页
                2.1.3.3 PCA处理后GFP-Atg8的定位第65-66页
                2.1.3.4 PCA影响Apel的定位第66-67页
                2.1.3.5 GFP-Atg8产生多点状结构的最低PCA浓度第67-68页
                2.1.3.6 atg5A不影响GFP-Atg8的多点状结构的产生第68-70页
            2.1.4 PCA处理影响CFP标记荧光蛋白的定位第70-73页
                2.1.4.1 PCA处理影响CFP标记细胞质蛋白第71-72页
                2.1.4.2 PCA影响单一CFP和GFP蛋白第72-73页
            2.1.5 核蛋白Htb1定位不受PCA影响第73-74页
        2.2 小结第74页
        2.3 讨论第74-76页
全文总结第76-77页
本文创新之处第77-78页
参考文献第78-82页
附录一 培养基、常备试剂与缓冲液第82-86页
致谢第86页

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