| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-23页 |
| ·体细胞核移植技术概况 | 第10-11页 |
| ·体细胞核移植技术 | 第10页 |
| ·体细胞核移植存在的问题及研究现状 | 第10页 |
| ·体细胞核移植与表观重编程 | 第10-11页 |
| ·基因组印记研究进展 | 第11-13页 |
| ·基因组印记及其发现 | 第11页 |
| ·印记基因的特征 | 第11-13页 |
| ·DNA 甲基化 | 第13-18页 |
| ·DNA 甲基化概述 | 第13-14页 |
| ·DNA 甲基化的检测方法 | 第14-17页 |
| ·体细胞核移植动物中DNA 甲基化研究 | 第17-18页 |
| ·RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术 | 第18-20页 |
| ·RACE 技术的发展 | 第18页 |
| ·RACE 技术的原理 | 第18-20页 |
| ·RACE 技术的应用与展望 | 第20页 |
| ·Dlk1-Gtl2 印记区域的研究现状 | 第20-22页 |
| ·Gtl2 基因 | 第21页 |
| ·Dlk1 基因 | 第21-22页 |
| ·Dlk1-Gtl2 印记区域中的3 个DMRs | 第22页 |
| ·研究内容及意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·牛组织材料 | 第23页 |
| ·生化药品及试剂 | 第23页 |
| ·培养基的配置 | 第23-24页 |
| ·其他试剂的配制 | 第24页 |
| ·主要仪器和设备 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-38页 |
| ·牛肺脏总RNA 的提取及检测 | 第25-26页 |
| ·牛 Gtl2 基因cDNA 的克隆 | 第26-32页 |
| ·牛 Gtl2 基因全长的获得及其序列分析 | 第32页 |
| ·牛 Gtl2 基因的牛肺脏基因组 DNA 的提取及检测 | 第32-33页 |
| ·牛 Dlk1-Gtl2 印记区域DMRs 的确定 | 第33页 |
| ·牛Dlk1-Gtl2 印记区域甲基化状态分析 | 第33-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-55页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第38页 |
| ·牛 Gtl2 基因cDNA 的克隆 | 第38-40页 |
| ·牛Gtl2 基因RT-PCR 扩增结果 | 第38-39页 |
| ·牛Gtl2 基因3′RACE 扩增结果 | 第39-40页 |
| ·牛Gtl2 基因5′RACE 扩增结果 | 第40页 |
| ·牛Gtl2 基因序列生物信息学分析 | 第40-43页 |
| ·Gtl2 基因在各物种中的同源性比对 | 第40-41页 |
| ·牛Gtl2 基因可变剪切形式 | 第41-42页 |
| ·牛Gtl2 基因开放读码框的预测 | 第42-43页 |
| ·基因组DNA 的提取和检测结果 | 第43页 |
| ·Dlk1-Gtl2 印记区域DMR 区的确定 | 第43页 |
| ·Dlk1-Gtl2 印记区域甲基化状态分析 | 第43-55页 |
| ·CpG 岛预测及 BSP-PCR 引物设计 | 第44-47页 |
| ·BSP-PCR 扩增结果 | 第47-49页 |
| ·序列测定 | 第49-51页 |
| ·Dlk1-Gtl2 印记区域甲基化状态分析 | 第51-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| ·牛 Gtl2 基因序列生物信息学分析 | 第55页 |
| ·体细胞核移植牛中 Dlk1-Gtl2 印记区域甲基化状态分析 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| ·牛 Gtl2 基因 cDNA 序列分析 | 第57页 |
| ·Dlk1–Gtl2 印记区域DMRs 的确定 | 第57页 |
| ·Dlk1–Gtl2 印记区域甲基化状态分析 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 在读期间发表学术论文 | 第64-65页 |
| 简历 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
