摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 南方水稻黑条矮缩病毒研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 南方水稻黑条矮缩病的发生与危害 | 第12页 |
1.1.2 南方水稻黑条矮缩病毒的分类地位 | 第12-13页 |
1.1.3 南方水稻黑条矮缩病的典型症状 | 第13页 |
1.1.4 南方水稻黑条矮缩病毒的寄主和传播介体 | 第13-15页 |
1.2 南方水稻黑条矮缩病毒的分子生物学研究进展 | 第15-21页 |
1.2.1 南方水稻黑条矮缩病毒粒体特性 | 第15-16页 |
1.2.2 南方水稻黑条矮缩病毒基因组结构 | 第16-17页 |
1.2.3 南方水稻黑条矮缩病毒基因组功能 | 第17-21页 |
1.3 转基因植物的研究进展 | 第21-22页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第22页 |
2 材料与方法 | 第22-38页 |
2.1 实验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 主要仪器与设备 | 第22-23页 |
2.1.2 主要试剂与配方 | 第23-24页 |
2.1.3 供试材料 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-38页 |
2.2.1 SRBSDV编码基因的克隆与序列测定 | 第25-29页 |
2.2.2 SRBSDV植物表达载体p Cambia1302的构建 | 第29-30页 |
2.2.3 SRBSDV植物表达载体p Cambia1302转化根癌农杆菌 | 第30-31页 |
2.2.4 根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第31-33页 |
2.2.5 转Rd RP与CP水稻植株的分子检测 | 第33-36页 |
2.2.6 T1代阳性转基因水稻植株的分子检测与表型观察 | 第36页 |
2.2.7 T1代转CP水稻的外源基因表达水平检测方法的建立 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-62页 |
3.1 SRBSDV植物表达载体p Cambia1302的构建 | 第38-46页 |
3.1.1 SRBSDV编码基因的克隆 | 第38-39页 |
3.1.2 SRBSDV各编码基因植物表达载体的构建 | 第39-46页 |
3.1.3 SRBSDV各编码基因植物表达载体工程农杆菌的获得 | 第46页 |
3.2 转基因水稻的获得 | 第46-50页 |
3.2.1 水稻胚性愈伤组织的诱导与培养 | 第46-47页 |
3.2.2 愈伤组织的遗传转化、抗性筛选与分化 | 第47-48页 |
3.2.3 T0代转基因水稻植株的获得 | 第48-50页 |
3.3 T0代P1及P10转基因水稻植株的分子检测 | 第50-51页 |
3.3.1 T0代P1及P10转基因水稻植株的PCR检测 | 第50页 |
3.3.2 T0代P10转基因水稻植株的Southern blot检测 | 第50-51页 |
3.4 T0代P1与P10转基因水稻植株表型观察 | 第51-54页 |
3.4.1 T0代P1转基因水稻植株表型观察 | 第51-52页 |
3.4.2 T0代P10转基因水稻植株表型观察 | 第52-54页 |
3.5 T0代P1与P10转基因水稻植株结实与种子收获 | 第54-55页 |
3.5.1 T0代P1转基因水稻植株结实情况 | 第54页 |
3.5.2 T0代P10转基因水稻植株结实情况 | 第54-55页 |
3.6 T1代P1转基因水稻植株分子检测与表型观察 | 第55-58页 |
3.6.1 T1代P1转基因水稻植株的培育 | 第55页 |
3.6.2 T1代P1转基因水稻植株的PCR检测 | 第55-56页 |
3.6.3 T1代P1转基因水稻植株的表型初步观察 | 第56-58页 |
3.7 T1代P10转基因水稻植株分子检测与表型观察 | 第58-62页 |
3.7.1 T1代P10转基因水稻植株的培育 | 第58页 |
3.7.2 T1代转基因水稻植株的PCR检测 | 第58-59页 |
3.7.3 T1代转基因水稻植株的表型初步观察 | 第59-60页 |
3.7.4 T1代转基因水稻CP表达量RT-q PCR检测方法的建立 | 第60-62页 |
4 结论与讨论 | 第62-69页 |
4.1 结论 | 第62-63页 |
4.2 讨论 | 第63-67页 |
4.2.1 SRBSDV基因组各组分植物表达载体的选择与构建 | 第63-64页 |
4.2.2 农杆菌介导法对水稻愈伤的遗传转化优化 | 第64-65页 |
4.2.3 P1转基因水稻表型变化的可能性分析 | 第65-66页 |
4.2.4 P10转基因水稻表型变化的可能性分析 | 第66-67页 |
4.2.5 转基因水稻体内CP相对表达量检测方法的建立 | 第67页 |
4.3 进一步的研究建议 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录A SRBSDV基因组12个基因ORF测序结果 | 第78-96页 |
附录B 组织培养各培养基配方 | 第96-102页 |
附录C 攻读学位期间发表的学位论文 | 第102页 |
附录D 攻读学位期间参加的学术活动 | 第102页 |