中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
前言 | 第11-17页 |
参考文献 | 第14-17页 |
第一部分 地西他滨影响人骨髓瘤细胞系增殖、凋亡和周期的体外实验 | 第17-30页 |
1. 材料与方法 | 第17-20页 |
1.1 材料及试剂 | 第17页 |
1.2 细胞系的选择 | 第17-18页 |
1.3 主要仪器设备 | 第18页 |
1.4 细胞系的培养方法 | 第18页 |
1.5 CCK-8法检测细胞增殖能力 | 第18-19页 |
1.6 AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡 | 第19页 |
1.7 PI染色检测细胞周期 | 第19-20页 |
1.8 Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白 | 第20页 |
2. 统计学分析 | 第20页 |
3. 结果 | 第20-25页 |
3.1 地西他滨抑制U266、RPMI 8226/R5细胞增殖 | 第20-22页 |
3.2 地西他滨诱导U266、RPMI 8226/R5细胞凋亡 | 第22-24页 |
3.3 地西他滨诱导U266、RPMI 8226/R5细胞周期阻滞 | 第24-25页 |
4. 讨论 | 第25-28页 |
参考文献 | 第28-30页 |
第二部分 地西他滨对人及小鼠骨髓瘤细胞CTAS体外及体内表达的影响 | 第30-45页 |
1. 材料和方法 | 第30-35页 |
1.1 试剂 | 第30页 |
1.2 细胞系及实验动物 | 第30页 |
1.3 仪器与设备 | 第30-31页 |
1.4 SP2/0细胞系的培养及体外处理 | 第31页 |
1.5 构建SP2/0荷瘤小鼠 | 第31页 |
1.6 DAC治疗SP2/0荷瘤小鼠 | 第31-32页 |
1.7 MM患者骨髓单个核细胞的提取 | 第32页 |
1.8 MM原代细胞细胞培养及体外处理 | 第32页 |
1.9 总RNA的提取 | 第32-33页 |
1.10 RNA反转录 | 第33页 |
1.11 Real Time-PCR | 第33-34页 |
1.12 荧光实时定量PCR | 第34-35页 |
1.13 统计学方法 | 第35页 |
2. 结果 | 第35-42页 |
2.1 人多发性骨髓瘤细胞系CTAs的体外表达 | 第35-36页 |
2.2 人多发性骨髓瘤原代细胞CTAs的体外表达 | 第36-40页 |
2.3 SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠模型的构建 | 第40-41页 |
2.4 SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠经DAC处理后CTAs的体外及体内表达 | 第41-42页 |
3. 讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
第三部分 地西他滨单药或联合DLI对骨髓瘤荷瘤小鼠治疗作用 | 第45-68页 |
1. 材料和方法 | 第45-49页 |
1.1 试剂和实验动物 | 第45页 |
1.2 SP2/0及MPC-11细胞系的培养 | 第45-46页 |
1.3 AnnexinV/PI双染法检测SP2/0细胞体外经DAC处理后凋亡 | 第46页 |
1.4 SP2/0及MPC-11骨髓瘤荷瘤小鼠模型的建立及分组 | 第46页 |
1.5 DAC单药对SP2/0及MPC-11荷瘤小鼠的治疗 | 第46-47页 |
1.6 小鼠供者淋巴细胞的制备 | 第47页 |
1.7 DAC联合DLI对荷瘤小鼠的治疗 | 第47页 |
1.8 荷瘤小鼠肿瘤标本采集及固定 | 第47-48页 |
1.9 荷瘤小鼠肿瘤标本HE染色 | 第48页 |
1.10 荷瘤小鼠肿瘤标本免疫组化步骤 | 第48-49页 |
1.11 流式细胞术检测荷瘤小鼠肿瘤组织中淋巴细胞亚群比例 | 第49页 |
1.12 统计学方法 | 第49页 |
2. 结果 | 第49-62页 |
2.1 DAC体外促进SP2/0细胞凋亡,呈浓度依赖性 | 第49-50页 |
2.2 DAC明显抑制SP2/0及MPC-11荷瘤小鼠肿瘤生长,显著延长小鼠生存期 | 第50-52页 |
2.3 DAC促进SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠肿瘤坏死 | 第52-55页 |
2.4 DAC诱导SP2/0荷瘤小鼠肿瘤组织内淋巴细胞浸润 | 第55-56页 |
2.5 DAC诱导SP2/0荷瘤小鼠脾脏Treg细胞浸润 | 第56-58页 |
2.6 DAC联合DLI治疗SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠 | 第58-60页 |
2.7 提高DLI细胞数量联合DAC治疗SP2/0和MPC-11骨髓瘤荷瘤小鼠 | 第60-61页 |
2.8 DAC联合DLI抑制脾脏Treg细胞浸润 | 第61-62页 |
3. 讨论 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
结论 | 第68-69页 |
文献综述 | 第69-80页 |
参考文献 | 第75-80页 |
中英文缩略词汇对照 | 第80-81页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |