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去甲基化药物联合DLI治疗多发性骨髓瘤的免疫效应和机制研究

中文摘要第7-9页
英文摘要第9-10页
前言第11-17页
    参考文献第14-17页
第一部分 地西他滨影响人骨髓瘤细胞系增殖、凋亡和周期的体外实验第17-30页
    1. 材料与方法第17-20页
        1.1 材料及试剂第17页
        1.2 细胞系的选择第17-18页
        1.3 主要仪器设备第18页
        1.4 细胞系的培养方法第18页
        1.5 CCK-8法检测细胞增殖能力第18-19页
        1.6 AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡第19页
        1.7 PI染色检测细胞周期第19-20页
        1.8 Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白第20页
    2. 统计学分析第20页
    3. 结果第20-25页
        3.1 地西他滨抑制U266、RPMI 8226/R5细胞增殖第20-22页
        3.2 地西他滨诱导U266、RPMI 8226/R5细胞凋亡第22-24页
        3.3 地西他滨诱导U266、RPMI 8226/R5细胞周期阻滞第24-25页
    4. 讨论第25-28页
    参考文献第28-30页
第二部分 地西他滨对人及小鼠骨髓瘤细胞CTAS体外及体内表达的影响第30-45页
    1. 材料和方法第30-35页
        1.1 试剂第30页
        1.2 细胞系及实验动物第30页
        1.3 仪器与设备第30-31页
        1.4 SP2/0细胞系的培养及体外处理第31页
        1.5 构建SP2/0荷瘤小鼠第31页
        1.6 DAC治疗SP2/0荷瘤小鼠第31-32页
        1.7 MM患者骨髓单个核细胞的提取第32页
        1.8 MM原代细胞细胞培养及体外处理第32页
        1.9 总RNA的提取第32-33页
        1.10 RNA反转录第33页
        1.11 Real Time-PCR第33-34页
        1.12 荧光实时定量PCR第34-35页
        1.13 统计学方法第35页
    2. 结果第35-42页
        2.1 人多发性骨髓瘤细胞系CTAs的体外表达第35-36页
        2.2 人多发性骨髓瘤原代细胞CTAs的体外表达第36-40页
        2.3 SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠模型的构建第40-41页
        2.4 SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠经DAC处理后CTAs的体外及体内表达第41-42页
    3. 讨论第42-43页
    参考文献第43-45页
第三部分 地西他滨单药或联合DLI对骨髓瘤荷瘤小鼠治疗作用第45-68页
    1. 材料和方法第45-49页
        1.1 试剂和实验动物第45页
        1.2 SP2/0及MPC-11细胞系的培养第45-46页
        1.3 AnnexinV/PI双染法检测SP2/0细胞体外经DAC处理后凋亡第46页
        1.4 SP2/0及MPC-11骨髓瘤荷瘤小鼠模型的建立及分组第46页
        1.5 DAC单药对SP2/0及MPC-11荷瘤小鼠的治疗第46-47页
        1.6 小鼠供者淋巴细胞的制备第47页
        1.7 DAC联合DLI对荷瘤小鼠的治疗第47页
        1.8 荷瘤小鼠肿瘤标本采集及固定第47-48页
        1.9 荷瘤小鼠肿瘤标本HE染色第48页
        1.10 荷瘤小鼠肿瘤标本免疫组化步骤第48-49页
        1.11 流式细胞术检测荷瘤小鼠肿瘤组织中淋巴细胞亚群比例第49页
        1.12 统计学方法第49页
    2. 结果第49-62页
        2.1 DAC体外促进SP2/0细胞凋亡,呈浓度依赖性第49-50页
        2.2 DAC明显抑制SP2/0及MPC-11荷瘤小鼠肿瘤生长,显著延长小鼠生存期第50-52页
        2.3 DAC促进SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠肿瘤坏死第52-55页
        2.4 DAC诱导SP2/0荷瘤小鼠肿瘤组织内淋巴细胞浸润第55-56页
        2.5 DAC诱导SP2/0荷瘤小鼠脾脏Treg细胞浸润第56-58页
        2.6 DAC联合DLI治疗SP2/0骨髓瘤荷瘤小鼠第58-60页
        2.7 提高DLI细胞数量联合DAC治疗SP2/0和MPC-11骨髓瘤荷瘤小鼠第60-61页
        2.8 DAC联合DLI抑制脾脏Treg细胞浸润第61-62页
    3. 讨论第62-65页
    参考文献第65-68页
结论第68-69页
文献综述第69-80页
    参考文献第75-80页
中英文缩略词汇对照第80-81页
攻读学位期间发表文章情况第81-82页
致谢第82页

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