缩略语说明 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 综述 | 第12-28页 |
1.1 丝状真菌概述 | 第12-13页 |
1.2 丝状真菌次级代谢产物和调控途径 | 第13-16页 |
1.2.1 丝状真菌次级代谢产物分类和应用 | 第13页 |
1.2.2 丝状真菌的次级代谢调控途径 | 第13-16页 |
1.3 丝状真菌生长发育 | 第16-19页 |
1.3.1 丝状真菌的无性生殖 | 第17页 |
1.3.2 丝状真菌的有性生殖 | 第17-19页 |
1.3.3 丝状真菌生长发育和次级代谢的关系 | 第19页 |
1.4 丝状真菌甲基转移酶的研究进展 | 第19-26页 |
1.4.1 丝状真菌中甲基转移酶Lae A和Llm | 第20-22页 |
1.4.2 丝状真菌中甲基转移酶Lae A和Llm的结构特点 | 第22-23页 |
1.4.3 丝状真菌甲基转移酶LaeA和Llm蛋白对生长发育的影响 | 第23页 |
1.4.4 丝状真菌甲基转移酶LaeA和Llm蛋白对次级代谢的影响 | 第23-25页 |
1.4.5 丝状真菌中甲基转移酶Lae A和Llm蛋白的作用机制 | 第25-26页 |
1.5 橘青霉Lae A全局调控机制研究与本课题的提出 | 第26-28页 |
1.5.1 橘青霉的LaeA全局调控机制研究 | 第26-27页 |
1.5.2 本课题的提出 | 第27-28页 |
第2章 实验材料和方法 | 第28-44页 |
2.1 实验材料 | 第28-32页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第28页 |
2.1.2 培养基 | 第28-29页 |
2.1.3 抗生素 | 第29-30页 |
2.1.4 所用引物 | 第30-31页 |
2.1.5 实验试剂 | 第31页 |
2.1.6 主要仪器 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-44页 |
2.2.1 菌种培养条件 | 第32-33页 |
2.2.2 大肠杆菌质粒提取和酵母质粒提取 | 第33-34页 |
2.2.3 酶切、连接 | 第34-35页 |
2.2.4 转化及转化子验证 | 第35-38页 |
2.2.5 转化子菌落形态观察 | 第38页 |
2.2.6 转化子菌丝发育观察 | 第38页 |
2.2.7 孢子计数 | 第38-39页 |
2.2.8 橘青霉DNA提取 | 第39页 |
2.2.9 RNA提取、纯化和质量检测 | 第39-41页 |
2.2.10 RT-qPCR分析 | 第41-42页 |
2.2.11 转化子发酵及美伐他汀的HPLC检测 | 第42页 |
2.2.12 序列分析工具及结果统计学分析 | 第42-44页 |
第3章 实验结果与分析 | 第44-62页 |
3.1 橘青霉次级代谢基因簇分析和甲基转移酶家族蛋白的分析 | 第44-47页 |
3.1.1 橘青霉次级代谢基因簇序列分析 | 第44页 |
3.1.2 橘青霉甲基转移酶家族蛋白分析 | 第44-46页 |
3.1.3 橘青霉甲基转移酶家族基因功能初步探究 | 第46-47页 |
3.2 橘青霉中甲基转移酶(llm3)的鉴定 | 第47-48页 |
3.3 llm3过表达和敲除载体的构建 | 第48-49页 |
3.4 llm3过表达和敲除菌株的获得 | 第49-51页 |
3.5 llm3过表达和敲除菌株对美伐他汀生物合成的影响 | 第51-54页 |
3.5.1 llm3对橘青霉菌体干重的影响 | 第51页 |
3.5.2 llm3对美伐他汀生物合成的影响 | 第51-52页 |
3.5.3 llm3调控美伐他汀合成基因mlcB和mlcR的表达 | 第52-54页 |
3.6 llm3过表达和敲除菌株对生长发育的影响 | 第54-62页 |
3.6.1 llm3过表达和敲除对橘青霉菌落形态的影响 | 第54-56页 |
3.6.2 llm3过表达和敲除对橘青霉菌丝形态的影响 | 第56-57页 |
3.6.3 llm3过表达和敲除对橘青霉孢子产量的影响 | 第57-58页 |
3.6.4 llm3对无性繁殖相关基因abaA和brlA转录水平的影响 | 第58-62页 |
第4章 讨论 | 第62-66页 |
4.1 甲基转移酶家族基因的鉴定和分析 | 第62页 |
4.2 橘青霉中llm3调控美伐他汀的生物合成 | 第62-63页 |
4.3 橘青霉中llm3调控菌丝生长和分生孢子的形成 | 第63-66页 |
第5章 总结和展望 | 第66-68页 |
5.1 总结 | 第66页 |
5.2 创新点 | 第66页 |
5.3 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
附录 | 第74-76页 |
硕士期间发表的论文和奖励情况 | 第76-78页 |
致谢 | 第78页 |