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转Bt基因棉花外源重组DNA土壤分布特征与水平转移研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第一章 引言第14-21页
    1.1 全球转基因作物现状第14-16页
    1.2 转基因作物对土壤环境的影响第16-19页
        1.2.1 转基因作物外源基因及其产物在土壤中的持留第16-17页
        1.2.2 转基因作物的基因水平转移第17页
        1.2.3 转基因作物对土壤动物的影响第17-18页
        1.2.4 转基因作物对土壤微生物的影响第18-19页
    1.3 研究的背景和意义第19-21页
        1.3.1 研究背景第19-20页
        1.3.2 研究意义第20-21页
第二章 试验区域概况及研究内容第21-23页
    2.1 试验区域概况第21页
    2.2 试验样地设置第21页
    2.3 研究内容第21-22页
    2.4 技术路线第22-23页
第三章 转Bt基因棉花重组DNA的时空分布第23-34页
    3.1 材料和方法第23-27页
        3.1.1 试验样地设计第23页
        3.1.2 试剂第23页
        3.1.3 主要仪器第23-24页
        3.1.4 土壤样品采集第24页
        3.1.5 土壤样品的分级第24页
        3.1.6 土壤DNA的提取第24页
        3.1.7 引物设计第24-26页
        3.1.8 实时荧光PCR的反应条件第26-27页
    3.2 结果与分析第27-32页
        3.2.1 土壤中转Bt基因棉花 35S-Cry1A片段的实时荧光PCR分析第27-28页
        3.2.2 土壤中转Bt基因棉花 35S-NPTⅡ片段的实时荧光PCR分析第28-29页
        3.2.3 转Bt基因棉花 35S-Cry1A片段在土壤团聚体中分布的实时荧光PCR分析第29-30页
        3.2.4 转Bt基因棉花 35S-NPTⅡ片段在土壤团聚体中分布的实时荧光PCR分析..第30-32页
    3.3 讨论第32-34页
第四章 转Bt基因棉花土壤中卡那霉素抗性细菌检测第34-42页
    4.1 材料与方法第34-36页
        4.1.1 试验样地设置第34页
        4.1.2 试剂第34-35页
        4.1.3 主要仪器第35页
        4.1.4 土壤样品采集第35页
        4.1.5 样品处理第35-36页
        4.1.6 细菌的分离第36页
        4.1.7 细菌的扩大培养第36页
    4.2 PCR技术检测NPTⅡ基因第36-38页
        4.2.1 细菌DNA的提取第36页
        4.2.2 引物设计第36页
        4.2.3 PCR反应体系和条件第36-37页
        4.2.4 PCR产物的回收纯化第37页
        4.2.5 PCR产物的连接转化第37-38页
    4.3 结果与分析第38-40页
        4.3.1 卡那霉素抗性细菌平板培养第38页
        4.3.2 卡那霉素抗性基因特异性引物设计第38-39页
        4.3.3 卡那霉素抗性基因基因转移检测结果第39-40页
    4.4 讨论第40-42页
第五章 转基因棉花对土壤AOB和AOA群落结构及丰度的影响第42-52页
    5.1 材料和方法第42-46页
        5.1.1 试验地设置第42页
        5.1.2 试剂第42页
        5.1.3 主要仪器第42-43页
        5.1.4 土壤样品采集第43页
        5.1.5 土壤理化性质和硝化势测定第43-44页
        5.1.6 PCR扩增及T-RFLP分析第44页
        5.1.7 实时荧光PCR分析第44-45页
        5.1.8 数据分析第45-46页
    5.2 结果与分析第46-50页
        5.2.1 土壤AOB和AOA群落结构和多样性变化第46-47页
        5.2.2 土壤AOB和AOA群落结构与土壤理化性质的典范对应分析第47-48页
        5.2.3 土壤AOB和AOA丰度变化第48-50页
    5.3 讨论第50-52页
第六章 结论第52-53页
参考文献第53-61页
致谢第61-62页
作者简历第62页

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