摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 引言 | 第12-18页 |
1.1 口蹄疫病毒概述 | 第12页 |
1.2 病毒样颗粒概述 | 第12-16页 |
1.2.1 病毒样颗粒作为疫苗的优势 | 第12-13页 |
1.2.2 病毒样颗粒诱导免疫应答的分子机制 | 第13-14页 |
1.2.3 VLPs在动物防疫中的应用 | 第14-15页 |
1.2.4 病毒样颗粒疫苗存在的问题 | 第15-16页 |
1.3 壳聚糖的应用 | 第16-18页 |
第二章 O型口蹄疫病毒样颗粒的表达及体外组装 | 第18-26页 |
2.1 试验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 菌种、表达载体及抗体 | 第18页 |
2.1.2 生物学试剂及主要试剂的配制 | 第18-19页 |
2.1.3 主要试验仪器与设备 | 第19-20页 |
2.2 试验方法 | 第20-22页 |
2.2.1 O型FMDV衣壳蛋白VP0、VP3、VP1的原核表达 | 第20页 |
2.2.2 目的蛋白的纯化 | 第20页 |
2.2.3 免疫印迹试验(Western Blotting)检测 | 第20-21页 |
2.2.4 VLPs的体外组装 | 第21页 |
2.2.5 动态光散射试验(Dynamic Light Scattering,DLS) | 第21-22页 |
2.2.6 Bradford法测定O型口蹄疫VLPs蛋白含量 | 第22页 |
2.3 试验结果 | 第22-24页 |
2.3.1 目的蛋白的表达与纯化 | 第22-23页 |
2.3.2 O型口蹄疫VLPs体外组装及鉴定 | 第23-24页 |
2.3.3 O型口蹄疫VLPs蛋白含量测定 | 第24页 |
2.4 讨论 | 第24-26页 |
第三章 壳聚糖季铵盐凝乳胶微球对O型口蹄疫VLPs的豚鼠免疫影响 | 第26-35页 |
3.1 试验材料 | 第26-28页 |
3.1.1 蛋白和佐剂 | 第26-27页 |
3.1.2 病毒、细胞与试验动物 | 第27页 |
3.1.3 试剂及耗材 | 第27页 |
3.1.4 主要仪器与设备 | 第27-28页 |
3.2 试验方法 | 第28-30页 |
3.2.1 疫苗的制备 | 第28页 |
3.2.2 试验动物免疫及分组 | 第28页 |
3.2.3 双抗夹心ELISA法检测豚鼠血清抗体水平 | 第28-29页 |
3.2.4 MTS法检测豚鼠T淋巴细胞增殖 | 第29页 |
3.2.5 O型FMDV乳鼠毒复壮 | 第29-30页 |
3.2.6 O型FMDV豚鼠毒GPID_(50)(50% Guinea pig infectious dose)测定 | 第30页 |
3.2.7 豚鼠攻毒试验及临床症状观察 | 第30页 |
3.3 试验结果 | 第30-33页 |
3.3.1 FMDV特异性抗体水平变化 | 第30-31页 |
3.3.2 T淋巴细胞增殖试验 | 第31-32页 |
3.3.3 O型FMDV O/BY/CHA/2010豚鼠毒价 | 第32页 |
3.3.4 豚鼠攻毒后临床症状观察 | 第32-33页 |
3.3.5 豚鼠攻毒保护试验 | 第33页 |
3.4 讨论 | 第33-35页 |
第四章 壳聚糖季铵盐凝乳胶微球对O型口蹄疫VLPs的猪免疫影响 | 第35-46页 |
4.1 试验材料 | 第35-36页 |
4.1.1 疫苗、病毒与细胞 | 第35页 |
4.1.2 试验动物的筛选 | 第35页 |
4.1.3 主要生物学试剂及耗材 | 第35-36页 |
4.1.4 主要仪器与设备 | 第36页 |
4.2 试验方法 | 第36-41页 |
4.2.1 试验动物的筛选与免疫 | 第36页 |
4.2.2 FMDV特异性抗体检测 | 第36-38页 |
4.2.3 FMDV中和抗体检测 | 第38-39页 |
4.2.4 猪免疫后相关细胞因子测定 | 第39-40页 |
4.2.5 猪攻毒试验及保护率检测 | 第40-41页 |
4.3 试验结果 | 第41-44页 |
4.3.1 FMDV特异性抗体水平 | 第41页 |
4.3.2 FMDV中和抗体水平 | 第41-42页 |
4.3.3 细胞因子的检测 | 第42-44页 |
4.3.4 猪攻毒后保护率 | 第44页 |
4.4 结论 | 第44-46页 |
第五章 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |