| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 花色形成机理及影响因素 | 第13-16页 |
| 1.1.1 植物色素的种类及组成 | 第13页 |
| 1.1.2 花青素的结构 | 第13-14页 |
| 1.1.3 花青素的共着色作用 | 第14-15页 |
| 1.1.4 花青素与金属离子络合作用 | 第15页 |
| 1.1.5 细胞液泡的PH值 | 第15页 |
| 1.1.6 花瓣表皮形态 | 第15页 |
| 1.1.7 外界因素 | 第15-16页 |
| 1.2 花色育种与基因工程研究进展 | 第16-22页 |
| 1.2.1 花色素合成途径 | 第16-18页 |
| 1.2.2 花青素合成相关关键基因 | 第18-20页 |
| 1.2.3 花青素苷合成相关调控基因与作用 | 第20-22页 |
| 1.2.4 花青素苷合成相关microRNA | 第22页 |
| 1.3 花色素理化研究进展 | 第22-24页 |
| 1.3.1 物理研究方法 | 第22-23页 |
| 1.3.2 化学研究方法 | 第23-24页 |
| 1.4 农杆菌介导的瞬时表达系统研究进展 | 第24页 |
| 1.4.1 农杆菌介导的瞬时表达原理 | 第24页 |
| 1.4.2 瞬时表达的影响因素 | 第24页 |
| 1.5 蝴蝶兰花青素苷研究进展 | 第24-26页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 1.7 本研究的技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 蝴蝶兰花色成因的研究 | 第28-57页 |
| 2.1 材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28-29页 |
| 2.1.2 仪器和试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 内容和方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 蝴蝶兰花色表观鉴定 | 第30页 |
| 2.2.2 蝴蝶兰组织解剖观察 | 第30页 |
| 2.2.3 类黄酮成分分析方法的建立 | 第30-32页 |
| 2.2.4 类黄酮成分的定性分析 | 第32页 |
| 2.2.5 类黄酮成分的定量分析 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-54页 |
| 2.3.0 蝴蝶兰花色表型差异分析 | 第33-34页 |
| 2.3.1 蝴蝶兰色素分布模式 | 第34-35页 |
| 2.3.2 HPLC分析方法建立 | 第35-37页 |
| 2.3.3 蝴蝶兰花瓣中类黄酮组成分析 | 第37-47页 |
| 2.3.4 葡萄风信子花瓣中类黄酮组成分析 | 第47-54页 |
| 2.4 讨论 | 第54-56页 |
| 2.5 小结 | 第56-57页 |
| 第三章 蝴蝶兰花色形成基因表达研究 | 第57-77页 |
| 3.1 材料 | 第57-58页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第57页 |
| 3.1.2 质粒载体 | 第57页 |
| 3.1.3 菌株 | 第57-58页 |
| 3.1.4 试剂 | 第58页 |
| 3.1.5 常用培养基配制 | 第58页 |
| 3.1.6 仪器 | 第58页 |
| 3.2 内容和方法 | 第58-67页 |
| 3.2.1 总RNA提取及检测 | 第58-59页 |
| 3.2.2 RNA反转录合成cDNA第一链 | 第59-60页 |
| 3.2.3 引物 | 第60-61页 |
| 3.2.4 PCR反应及实时荧光定量PCR | 第61-62页 |
| 3.2.5 PCR扩增产物回收 | 第62页 |
| 3.2.6 连接克隆载体pMD19-T | 第62-63页 |
| 3.2.7 大肠杆菌转化 | 第63页 |
| 3.2.8 PCR鉴定阳性克隆 | 第63页 |
| 3.2.9 质粒提取 | 第63-64页 |
| 3.2.10 蝴蝶兰F3’5’H和DFR基因氨基酸序列聚类分析 | 第64-65页 |
| 3.2.11 载体构建 | 第65-66页 |
| 3.2.12 农杆菌介导瞬时转化蝴蝶兰 | 第66-67页 |
| 3.2.13 花青素苷总量测定 | 第67页 |
| 3.3 结果与分析 | 第67-73页 |
| 3.3.1 蝴蝶兰CHS，DFR，F3’H基因序列的获得 | 第67页 |
| 3.3.2 蝴蝶兰F3’5’H，DFR，F3’H基因表达模式分析 | 第67-68页 |
| 3.3.3 蝴蝶兰DFR，F3’5’H基因氨基酸序列分析 | 第68-70页 |
| 3.3.4 蝴蝶兰瞬时转化相关载体的构建 | 第70-72页 |
| 3.3.5 农杆菌介导蝴蝶兰瞬时转化 | 第72-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-75页 |
| 3.5 小结 | 第75-77页 |
| 第四章 结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 作者简介 | 第89页 |
