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白介素-1β和胆固醇在猪瘟病毒感染中的作用

摘要第6-8页
abstract第8-9页
文献综述第13-38页
    第一章 病原感染过程中炎性小体的活化和IL-1β 释放研究进展第13-28页
        1.1 炎性小体及其功能第14-16页
        1.2 抗病毒免疫反应中的IL-1β 和IL-18第16-17页
        1.3 病毒感染中炎性小体的激活第17-22页
            1.3.1 NLRP3 炎性小体第18-20页
            1.3.2 AIM2 炎性小体第20-21页
            1.3.3 IFI16 炎性小体第21-22页
            1.3.4 RIG-I炎性小体第22页
        1.4 炎性小体激活病毒性逃避和效应功能第22-23页
        1.5 抑制炎性小体组装第23-25页
            1.5.1 抑制caspase-1 功能第24-25页
            1.5.2 IL-1β 和IL-18 的中和作用第25页
        1.6 Viroporin激活炎性小体第25-27页
        1.7 展望第27-28页
    第二章 脂筏和胆固醇在病毒感染中的作用研究进展第28-38页
        2.1 脂筏的功能及脂筏途径第28-30页
            2.1.1 发动蛋白依赖的脂筏途径第28-29页
            2.1.2 非发动蛋白依赖的脂筏途径第29-30页
        2.2 脂筏在病毒感染中的作用第30-31页
        2.3 脂筏作为病毒进入的平台第31-35页
            2.3.1 非囊膜病毒第32-33页
            2.3.2 囊膜病毒第33-35页
        2.4 脂筏在病毒复制、装配和释放中的作用第35-37页
            2.4.1 非囊膜病毒第35页
            2.4.2 囊膜病毒第35-37页
        2.5 展望第37-38页
试验研究第38-78页
    第三章 猪瘟病毒感染对IL-1β 释放的影响第38-47页
        3.1 材料第38-39页
            3.1.1 病毒,细胞与主要试剂第38-39页
            3.1.2 主要溶液的配制第39页
            3.1.3 主要仪器设备第39页
        3.2 方法第39-40页
            3.2.1 实时荧光定量PCR第39-40页
            3.2.2 Western blot第40页
            3.2.3 猪瘟病毒感染诱导IL-1β 释放的检测第40页
            3.2.4 ROS是否参与猪瘟病毒感染诱导IL-1β 释放的检测第40页
            3.2.5 猪瘟病毒感染激活caspase-1 的检测第40页
        3.3 结果第40-45页
            3.3.1 猪瘟病毒感染诱导IL-1β 释放第40-42页
            3.3.2 猪瘟病毒感染诱导IL-1β 释放需要病毒的复制第42页
            3.3.3 CSFV感染能够上调ROS水平第42-43页
            3.3.4 ROS不参与CSFV诱导的IL-1β 释放第43-44页
            3.3.5 CSFV感染激活caspase-1第44-45页
        3.4 讨论第45-46页
        3.5 小结第46-47页
    第四章 猪瘟病毒p7 蛋白诱导IL-1β 释放的研究第47-59页
        4.1 材料第47页
        4.2 方法第47-49页
            4.2.1 克隆CSFV p7 基因序列及分析第47-48页
            4.2.2 真核表达载体pEGFP-p7 的构建第48页
            4.2.3 pEGFP-p7 质粒的转染及稳转细胞系的建立第48页
            4.2.4 稳转细胞株的鉴定第48-49页
            4.2.5 CSFV p7 蛋白诱导IL-1β 释放的检测第49页
            4.2.6 CSFV p7 蛋白降解特性的研究第49页
            4.2.7 MG132 和amantadine对CSFV p7 诱导的IL-1β 释放的影响第49页
        4.3 结果第49-57页
            4.3.1 扩增CSFV p7 基因及序列分析第49-51页
            4.3.2 真核表达载体pEGFP-p7 的构建第51页
            4.3.3 稳定表答CSFV p7 蛋白的细胞株的建立及鉴定第51页
            4.3.4 CSFV p7 蛋白诱导IL-1β 释放第51-52页
            4.3.5 CSFV p7 蛋白是一种不稳定的蛋白第52-55页
            4.3.6 MG132 和amantadine对CSFV p7 诱导的IL-1β 释放的影响第55-57页
        4.4 讨论第57-58页
        4.5 小结第58-59页
    第五章 胆固醇在猪瘟病毒感染中的作用第59-70页
        5.1 材料第59页
        5.2 方法第59-61页
            5.2.1 MTT法检测甲基-β-环糊精(MβCD)对巨噬细胞毒性第59-60页
            5.2.2 细胞质膜及病毒囊膜上胆固醇的去除与补充第60页
            5.2.3 去除细胞质膜上的胆固醇对CSFV入侵的影响第60页
            5.2.4 不同浓度MβCD处理对CSFV入侵的影响第60页
            5.2.5 细胞质膜上的胆固醇耗竭对CSFV入侵细胞后的影响第60-61页
            5.2.6 病毒囊膜上胆固醇的耗竭对CSFV入侵细胞的影响第61页
        5.3 结果第61-68页
            5.3.1 MβCD细胞毒性的测定第61-62页
            5.3.2 去除胆固醇影响CSFV的入侵第62-64页
            5.3.3 胆固醇的耗竭影响CSFV的复制第64-65页
            5.3.4 添加外源性胆固醇能够部分逆转MβCD处理对CSFV的影响第65-66页
            5.3.5 病毒囊膜上的胆固醇影响CSFV感染第66-68页
        5.4 讨论第68-69页
        5.5 小结第69-70页
    第六章 猪瘟病毒感染对caveolin-1 表达的影响第70-78页
        6.1 材料第70页
        6.2 方法第70-72页
            6.2.1 caveolin-1 引物的设计第70页
            6.2.2 CSFV感染后巨噬细胞 3D4/2 中caveolin-1 表达的检测第70-71页
            6.2.3 确定嘌呤霉素筛选浓度第71页
            6.2.4 caveolin-1 干扰细胞的筛选第71页
            6.2.5 caveolin-1 干扰细胞干扰效果的检测第71页
            6.2.6 干扰caveolin-1 后对CSFV感染的影响第71-72页
        6.3 结果第72-76页
            6.3.1 CSFV上调caveolin-1 的表达第72-73页
            6.3.2 caveolin-1 干扰细胞的筛选第73-74页
            6.3.3 caveolin-1 干扰细胞株的鉴定第74-75页
            6.3.4 干扰caveolin-1 后对CSFV感染的影响第75-76页
        6.4 讨论第76-77页
        6.5 小结第77-78页
结论第78页
本论文的创新点第78页
有待于进一步研究的问题第78-79页
参考文献第79-94页
主要缩略词和中英文对照表(Abbreviation Index)第94-95页
致谢第95-96页
作者简介第96页

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