摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 小麦组织培养体系的研究 | 第12-15页 |
1.2.1 小麦幼胚培养 | 第12-13页 |
1.2.2 小麦成熟胚的培养 | 第13-14页 |
1.2.3 小麦花药培养 | 第14-15页 |
1.2.4 小麦幼穗培养 | 第15页 |
1.2.5 其他小麦外植体的培养 | 第15页 |
1.3 小麦的遗传转化方法 | 第15-18页 |
1.3.1 基因枪法 | 第16页 |
1.3.2 农杆菌介导法 | 第16-17页 |
1.3.3 花粉管通道法 | 第17-18页 |
1.3.4 PEG介导法 | 第18页 |
1.3.5 电穿孔转化法 | 第18页 |
1.3.6 显微注射法 | 第18页 |
1.4 农杆菌介导小麦遗传转化的影响因素 | 第18-22页 |
1.4.1 小麦基因型 | 第18-19页 |
1.4.2 农杆菌菌株类型 | 第19页 |
1.4.3 外植体种类及其生理状态 | 第19-20页 |
1.4.4 农杆菌菌液浓度、生长状态以及侵染时间 | 第20-21页 |
1.4.5 酚类化合物(AS) | 第21页 |
1.4.6 超声波与抽真空处理 | 第21页 |
1.4.7 其他因素 | 第21-22页 |
1.5 转基因植株检测方法 | 第22-24页 |
1.5.1 个体或组织水平的检测 | 第22页 |
1.5.1.1 选择标记抗性基因 | 第22页 |
1.5.1.2 编码能够催化人工底物产生颜色变化的酶基因 | 第22页 |
1.5.2 DNA分子水平的检测 | 第22-24页 |
1.5.2.1 聚合酶链式反应(PCR) | 第23页 |
1.5.2.2 Southern印迹杂交 | 第23页 |
1.5.2.3 Northern杂交 | 第23页 |
1.5.2.4 Western杂交 | 第23-24页 |
1.6 研究的目的意义和技术路线 | 第24-27页 |
1.6.1 研究的目的和意义 | 第24-25页 |
1.6.2 技术路线 | 第25-27页 |
1.6.2.1 小麦胚多芽诱导体系的建立 | 第25-26页 |
1.6.2.2 农杆菌介导幼胚转化 | 第26-27页 |
第二章 小麦成熟胚及大龄幼胚多芽诱导体系的建立 | 第27-36页 |
2.1 实验材料 | 第27-28页 |
2.2 培养基 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-30页 |
2.3.1 小麦成熟胚多芽诱导前处理 | 第28-29页 |
2.3.1.1 成熟种子的消毒处理 | 第28页 |
2.3.1.2 成熟胚的接种以及多芽诱导实验处理 | 第28-29页 |
2.3.2 小麦大龄幼胚的多芽诱导前处理 | 第29页 |
2.3.2.1 大龄幼种的消毒处理 | 第29页 |
2.3.2.2 大龄幼胚的接种以及多芽诱导实验处理 | 第29页 |
2.3.3 小麦胚多芽诱导培养程序 | 第29页 |
2.3.4 生根培养 | 第29页 |
2.3.5 数据统计与分析方法 | 第29-30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-35页 |
2.4.1 小麦成熟胚多芽诱导体系的建立 | 第30-32页 |
2.4.1.1 成熟胚多芽诱导过程 | 第30页 |
2.4.1.2 不同浓度植物激素对成熟胚多芽诱导效率的影响 | 第30-32页 |
2.4.2 小麦大龄幼胚多芽诱导体系的建立 | 第32-35页 |
2.4.2.1 大龄幼胚多芽诱导过程 | 第32-33页 |
2.4.2.2 不同浓度植物激素对大龄幼胚多芽诱导效率的影响 | 第33-35页 |
2.5 讨论 | 第35-36页 |
第三章 农杆菌介导幼胚愈伤转化的研究 | 第36-45页 |
3.1 实验材料 | 第36-37页 |
3.1.1 受体材料 | 第36页 |
3.1.2 农杆菌菌株及质粒载体 | 第36-37页 |
3.2 培养基 | 第37页 |
3.3 实验方法 | 第37-39页 |
3.3.1 材料的取样、消毒与接种 | 第37-38页 |
3.3.2 农杆菌C58C1的活化与扩大培养 | 第38页 |
3.3.3 农杆菌敏感基因型的筛选 | 第38页 |
3.3.4 使用不同浓度的菌液转化小麦愈伤 | 第38页 |
3.3.5 对小麦愈伤进行不同的时间的侵染 | 第38页 |
3.3.6 组织化学法染色检测GUS活性 | 第38-39页 |
3.3.7 数据统计与分析方法 | 第39页 |
3.4 结果与分析 | 第39-43页 |
3.4.1 农杆菌敏感基因型的筛选 | 第39-41页 |
3.4.2 不同菌液浓度条件下GUS基因瞬时表达结果 | 第41-42页 |
3.4.3 不同侵染时间下GUS基因的瞬时表达结果 | 第42-43页 |
3.5 讨论 | 第43-45页 |
第四章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |