| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 水产养殖 | 第11-12页 |
| 1.2 迟缓爱德华氏菌 | 第12-13页 |
| 1.3 果糖1,6二磷酸醛缩酶FBA | 第13-14页 |
| 1.3.1 FBA在糖酵解中的催化作用 | 第13页 |
| 1.3.2 FBA的亚细胞定位 | 第13页 |
| 1.3.3 FBA的免疫原性 | 第13-14页 |
| 1.4 毕赤酵母表达系统 | 第14-17页 |
| 1.4.1 毕赤酵母表达系统的优势 | 第14-15页 |
| 1.4.2 毕赤酵母表达载体 | 第15-16页 |
| 1.4.3 毕赤酵母表达的外源蛋白 | 第16页 |
| 1.4.4 毕赤酵母的发酵调控 | 第16-17页 |
| 1.5 抗原表位的筛选 | 第17-19页 |
| 1.5.1 抗原表位 | 第17页 |
| 1.5.2 常用抗原表位筛选方法 | 第17-19页 |
| 1.6 本课题研究意义 | 第19-20页 |
| 第2章 E. tarda抗原蛋白FBA在毕赤酵母中的表达 | 第20-43页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.2.1 载体与菌株 | 第20页 |
| 2.2.2 实验动物 | 第20页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第20-24页 |
| 2.2.4 引物设计及数据处理软件 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.3.1 FBA毕赤酵母表达株的构建 | 第24-27页 |
| 2.3.2 重组毕赤酵母的摇瓶培养和蛋白检测 | 第27-28页 |
| 2.3.3 重组毕赤酵母GS115-pPIC9K::fba的发酵培养 | 第28-30页 |
| 2.3.4 重组FBA蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| 2.3.5 Bradford法检测纯化后蛋白浓度 | 第31页 |
| 2.3.6 重组FBA的免疫原性检测 | 第31-33页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第33-41页 |
| 2.4.1 FBA毕赤酵母表达株的构建 | 第33-35页 |
| 2.4.2 GS1 15-pPIC9K::fba的摇瓶培养和蛋白表达检测 | 第35页 |
| 2.4.3 GS1 15-pPIC9K::fba的发酵罐培养和蛋白检测 | 第35-38页 |
| 2.4.4 重组FBA蛋白的亲和纯化 | 第38-39页 |
| 2.4.5 重组FBA蛋白免疫原性检测 | 第39-41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-43页 |
| 第3章 E. tarda抗原蛋白FBA的表位筛选 | 第43-60页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 实验材料 | 第43-45页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第43页 |
| 3.2.2 载体和菌株 | 第43页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第43-45页 |
| 3.2.4 引物设计及数据处理软件 | 第45页 |
| 3.3 实验方案 | 第45-50页 |
| 3.3.1 构建方案 | 第45页 |
| 3.3.2 EIB202基因组的抽提 | 第45-46页 |
| 3.3.3 重组质粒pET28a::△fba的构建 | 第46-48页 |
| 3.3.4 △FBA蛋白的表达检测及纯化 | 第48-49页 |
| 3.3.5 △FBA蛋白对斑马鱼免疫效果的评价实验 | 第49-50页 |
| 3.3.6 AFBA蛋白与抗血清反应性检测实验 | 第50页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第50-59页 |
| 3.4.1 FBA表位在线预测结果 | 第50页 |
| 3.4.2 重组质粒pET28a::△fba的构建 | 第50-53页 |
| 3.4.3 △FBA蛋白的表达检测及纯化 | 第53-57页 |
| 3.4.4 △FBA蛋白对斑马鱼免疫效果的评价 | 第57-58页 |
| 3.4.5 △FBA蛋白与抗血清反应性检测实验 | 第58-59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 FBA蛋白和GAPDH蛋白的融合表达 | 第60-68页 |
| 4.1 前言 | 第60页 |
| 4.2 实验材料 | 第60页 |
| 4.3 实验方法 | 第60-62页 |
| 4.3.1 FBA-GAP融合蛋白表达菌株的构建 | 第60-61页 |
| 4.3.2 FBA-GAP融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第61-62页 |
| 4.3.3 FBA-GAP融合蛋白的Western blotting检测 | 第62页 |
| 4.4 实验结果 | 第62-67页 |
| 4.4.1 FBA-GAP串联蛋白表达菌株的构建 | 第62-63页 |
| 4.4.2 FBA-GAP融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第63-67页 |
| 4.5 本章小结 | 第67-68页 |
| 第5章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 5.1 结论 | 第68页 |
| 5.2 展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
