摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第17-18页 |
第一章 引言 | 第18-34页 |
1.1 昆虫化学通讯中的信息物质 | 第18-22页 |
1.1.1 来自植物的化学信息物质---绿叶挥发性气味 | 第18-19页 |
1.1.2 来自昆虫的化学信息物质---信息素类物质 | 第19-22页 |
1.1.3 植物化学信息物质和昆虫信息素的关系 | 第22页 |
1.2 昆虫的外周嗅觉系统 | 第22-26页 |
1.2.1 昆虫嗅觉感器种类 | 第22-24页 |
1.2.2 昆虫外周嗅觉感受过程 | 第24-26页 |
1.3 昆虫气味结合蛋白研究 | 第26-31页 |
1.3.1 气味结合蛋白的分类及结构特征 | 第26-28页 |
1.3.2 气味结合蛋白生理功能及分布 | 第28-29页 |
1.3.3 气味结合蛋白结合特性研究及其应用 | 第29-31页 |
1.4 立题依据及研究内容 | 第31-34页 |
1.4.1 立题依据 | 第31-32页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第32-34页 |
第二章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白基因的筛选 | 第34-57页 |
2.1 材料与方法 | 第34-42页 |
2.1.1 美洲斑潜蝇样品的收集 | 第34-35页 |
2.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第35页 |
2.1.3 美洲斑潜蝇转录组测序及序列拼装 | 第35-36页 |
2.1.4 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因的鉴定 | 第36-41页 |
2.1.5 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因的生物信息学分析 | 第41-42页 |
2.2 结果与分析 | 第42-56页 |
2.2.1 转录组的测序 | 第42页 |
2.2.2 转录组序列的拼装 | 第42-43页 |
2.2.3 转录组序列注释与分析 | 第43-48页 |
2.2.4 转录组数据中美洲斑潜蝇LsatOBPs基因的挖掘 | 第48-51页 |
2.2.5 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因RACE-PCR结果 | 第51-52页 |
2.2.6 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因生物信息学分析 | 第52-56页 |
2.3 讨论 | 第56-57页 |
第三章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白基因的表达谱分析 | 第57-69页 |
3.1 材料与方法 | 第57-61页 |
3.1.1 美洲斑潜蝇样品收集 | 第57-58页 |
3.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第58页 |
3.1.3 总RNA提取 | 第58页 |
3.1.4 cDNA反转录第一条链 | 第58页 |
3.1.5 qPCR引物设计 | 第58-60页 |
3.1.6 qPCR反应体系 | 第60-61页 |
3.2 结果与分析 | 第61-67页 |
3.2.1 荧光定量各个样品总RNA提取 | 第61页 |
3.2.2 荧光定量实验的内参基因的选择 | 第61-62页 |
3.2.3 荧光定量PCR实验中模板浓度的确定 | 第62-63页 |
3.2.4 幼虫和蛹中大量表达的LsatOBPs基因 | 第63-65页 |
3.2.5 雌雄成虫中大量表达的LsatOBPs基因的表达差异 | 第65-67页 |
3.3 讨论 | 第67-69页 |
第四章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白的结合特性研究 | 第69-88页 |
4.1 材料与方法 | 第69-77页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第69页 |
4.1.2 主要仪器和试剂 | 第69-70页 |
4.1.3 引物设计 | 第70-71页 |
4.1.4 总RNA的提取和反转录 | 第71页 |
4.1.5 原核表达载体的构建 | 第71-74页 |
4.1.6 目的蛋白表达和纯化 | 第74-75页 |
4.1.7 目的蛋白与 1-NPN的结合常数测定 | 第75-76页 |
4.1.8 目的蛋白与特定气味的结合特性分析 | 第76-77页 |
4.2 结果与分析 | 第77-86页 |
4.2.1 原核表达载体构建 | 第77-78页 |
4.2.2 目的蛋白表达形式以及纯化结果 | 第78-80页 |
4.2.3 LsatOBP1、LsatOBP13与气味物质的结合特性分析 | 第80-82页 |
4.2.4 LsatPBPRPs与气味物质的结合特性分析 | 第82-86页 |
4.3 讨论 | 第86-88页 |
第五章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白的组织免疫荧光共定位 | 第88-112页 |
5.1 材料与方法 | 第89-90页 |
5.1.1 实验材料与仪器 | 第89页 |
5.1.3 美洲斑潜蝇气味结合蛋白的免疫抗体制备 | 第89页 |
5.1.4 美洲斑潜蝇头部扫描电镜的观察 | 第89页 |
5.1.5 美洲斑潜蝇头部组织冷冻切片 | 第89-90页 |
5.1.6 LsatOPBs在美洲斑潜蝇头部的荧光免疫定位 | 第90页 |
5.2 结果与分析 | 第90-111页 |
5.2.1 美洲斑潜蝇七个LsatOBPs的蛋白相互作用预测 | 第90-92页 |
5.2.2 美洲斑潜蝇头部口器以及下颚须扫描电镜观察 | 第92页 |
5.2.3 美洲斑潜蝇七个LsatOBPs在触角嗅觉感器上的免疫定位 | 第92-105页 |
5.2.4 美洲斑潜蝇LsatOBPs在口器上的免疫定位 | 第105-111页 |
5.3 结论与讨论 | 第111-112页 |
第六章 全文结论 | 第112-116页 |
6.1 主要结论 | 第112-114页 |
6.2 本研究的创新 | 第114页 |
6.3 本研究的问题与不足 | 第114页 |
6.4 本研究的展望 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-128页 |
附录 | 第128-131页 |
致谢 | 第131-132页 |
作者简历 | 第132页 |