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美洲斑潜蝇气味结合蛋白鉴定及功能研究

摘要第6-8页
abstract第8-9页
英文缩略表第17-18页
第一章 引言第18-34页
    1.1 昆虫化学通讯中的信息物质第18-22页
        1.1.1 来自植物的化学信息物质---绿叶挥发性气味第18-19页
        1.1.2 来自昆虫的化学信息物质---信息素类物质第19-22页
        1.1.3 植物化学信息物质和昆虫信息素的关系第22页
    1.2 昆虫的外周嗅觉系统第22-26页
        1.2.1 昆虫嗅觉感器种类第22-24页
        1.2.2 昆虫外周嗅觉感受过程第24-26页
    1.3 昆虫气味结合蛋白研究第26-31页
        1.3.1 气味结合蛋白的分类及结构特征第26-28页
        1.3.2 气味结合蛋白生理功能及分布第28-29页
        1.3.3 气味结合蛋白结合特性研究及其应用第29-31页
    1.4 立题依据及研究内容第31-34页
        1.4.1 立题依据第31-32页
        1.4.2 主要研究内容第32-34页
第二章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白基因的筛选第34-57页
    2.1 材料与方法第34-42页
        2.1.1 美洲斑潜蝇样品的收集第34-35页
        2.1.2 主要试剂及仪器设备第35页
        2.1.3 美洲斑潜蝇转录组测序及序列拼装第35-36页
        2.1.4 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因的鉴定第36-41页
        2.1.5 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因的生物信息学分析第41-42页
    2.2 结果与分析第42-56页
        2.2.1 转录组的测序第42页
        2.2.2 转录组序列的拼装第42-43页
        2.2.3 转录组序列注释与分析第43-48页
        2.2.4 转录组数据中美洲斑潜蝇LsatOBPs基因的挖掘第48-51页
        2.2.5 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因RACE-PCR结果第51-52页
        2.2.6 美洲斑潜蝇LsatOBPs基因生物信息学分析第52-56页
    2.3 讨论第56-57页
第三章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白基因的表达谱分析第57-69页
    3.1 材料与方法第57-61页
        3.1.1 美洲斑潜蝇样品收集第57-58页
        3.1.2 主要试剂及仪器设备第58页
        3.1.3 总RNA提取第58页
        3.1.4 cDNA反转录第一条链第58页
        3.1.5 qPCR引物设计第58-60页
        3.1.6 qPCR反应体系第60-61页
    3.2 结果与分析第61-67页
        3.2.1 荧光定量各个样品总RNA提取第61页
        3.2.2 荧光定量实验的内参基因的选择第61-62页
        3.2.3 荧光定量PCR实验中模板浓度的确定第62-63页
        3.2.4 幼虫和蛹中大量表达的LsatOBPs基因第63-65页
        3.2.5 雌雄成虫中大量表达的LsatOBPs基因的表达差异第65-67页
    3.3 讨论第67-69页
第四章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白的结合特性研究第69-88页
    4.1 材料与方法第69-77页
        4.1.1 供试昆虫第69页
        4.1.2 主要仪器和试剂第69-70页
        4.1.3 引物设计第70-71页
        4.1.4 总RNA的提取和反转录第71页
        4.1.5 原核表达载体的构建第71-74页
        4.1.6 目的蛋白表达和纯化第74-75页
        4.1.7 目的蛋白与 1-NPN的结合常数测定第75-76页
        4.1.8 目的蛋白与特定气味的结合特性分析第76-77页
    4.2 结果与分析第77-86页
        4.2.1 原核表达载体构建第77-78页
        4.2.2 目的蛋白表达形式以及纯化结果第78-80页
        4.2.3 LsatOBP1、LsatOBP13与气味物质的结合特性分析第80-82页
        4.2.4 LsatPBPRPs与气味物质的结合特性分析第82-86页
    4.3 讨论第86-88页
第五章 美洲斑潜蝇气味结合蛋白的组织免疫荧光共定位第88-112页
    5.1 材料与方法第89-90页
        5.1.1 实验材料与仪器第89页
        5.1.3 美洲斑潜蝇气味结合蛋白的免疫抗体制备第89页
        5.1.4 美洲斑潜蝇头部扫描电镜的观察第89页
        5.1.5 美洲斑潜蝇头部组织冷冻切片第89-90页
        5.1.6 LsatOPBs在美洲斑潜蝇头部的荧光免疫定位第90页
    5.2 结果与分析第90-111页
        5.2.1 美洲斑潜蝇七个LsatOBPs的蛋白相互作用预测第90-92页
        5.2.2 美洲斑潜蝇头部口器以及下颚须扫描电镜观察第92页
        5.2.3 美洲斑潜蝇七个LsatOBPs在触角嗅觉感器上的免疫定位第92-105页
        5.2.4 美洲斑潜蝇LsatOBPs在口器上的免疫定位第105-111页
    5.3 结论与讨论第111-112页
第六章 全文结论第112-116页
    6.1 主要结论第112-114页
    6.2 本研究的创新第114页
    6.3 本研究的问题与不足第114页
    6.4 本研究的展望第114-116页
参考文献第116-128页
附录第128-131页
致谢第131-132页
作者简历第132页

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