英文缩略词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-15页 |
1、前列腺癌背景介绍 | 第11页 |
2、PC-1 研究背景 | 第11-12页 |
3、腺病毒载体研究背景 | 第12-13页 |
4、红麻油脂理化性质及 CLA 研究背景 | 第13-15页 |
材料与方法 | 第15-24页 |
1、材料 | 第15-17页 |
·引物合成及序列测定 | 第15页 |
·菌株、细胞株和质粒 | 第15页 |
·细胞培养基与真核转染试剂 | 第15页 |
·常用分子生物学工具酶 | 第15-16页 |
·分子生物学试剂盒 | 第16页 |
·蛋白免疫分析试剂 | 第16页 |
·化学试剂 | 第16页 |
·实验仪器设备 | 第16-17页 |
2、方法 | 第17-24页 |
·PCR 反应、质粒构建以及阳性克隆的鉴定 | 第17页 |
·腺病毒载体的构建与腺病毒的包装、收集、扩增、滴度测定 | 第17-22页 |
·细胞转染 | 第22页 |
·细胞蛋白的提取 | 第22页 |
·蛋白定量 | 第22-23页 |
·W estern 印迹分析 | 第23页 |
·平板克隆形成实验 | 第23页 |
·伤口愈合wound-healing 实验 | 第23-24页 |
实验结果 | 第24-43页 |
第一部分PC-1 亚细胞定位的研究 | 第24-31页 |
·生物信息学预测PC-1 亚细胞定位的关键氨基酸序列 | 第24-26页 |
·融合绿色荧光蛋白的PC-1 截短体、缺失体、突变体的构建以及这些载体在细胞中的表达验证 | 第26-27页 |
·G FP-PC-1 融合蛋白的亚细胞定位分析 | 第27-29页 |
讨论 | 第29-31页 |
第二部分PC-1 特异性区段功能的研究 | 第31-39页 |
·腺病毒载体pAdEasy-EGFP 的构建 | 第33-34页 |
·p AdEasy-EGFP-PC-11-46、pAdEasy-EGFP-PC-147-224、pAdEasy-EGFP-PC-1 的构建与表达验证 | 第34-36页 |
·腺病毒滴度的测定 | 第36-37页 |
·腺病毒pAd-EGFP 感染前列腺癌细胞系LNCaP | 第37-38页 |
讨论 | 第38-39页 |
第三部分 共轭亚油酸(CLA)抗癌功能的初步探讨 | 第39-43页 |
·C LA 体外抑制癌细胞的生长 | 第39-40页 |
·C LA 体外抑制C4-2 细胞的迁移 | 第40-41页 |
·高浓度CLA 抑制C4-2 细胞中AKT Se1473 的磷酸化水平 | 第41-42页 |
讨论 | 第42-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录一:构建载体用到的引物 | 第48-50页 |
附录二:质粒构建流程图 | 第50-52页 |
致谢 | 第52页 |