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PC-1特异性区段分析与功能研究及红麻油脂CLA抗癌功能初步探讨

英文缩略词表第1-8页
中文摘要第8-9页
英文摘要第9-11页
前言第11-15页
 1、前列腺癌背景介绍第11页
 2、PC-1 研究背景第11-12页
 3、腺病毒载体研究背景第12-13页
 4、红麻油脂理化性质及 CLA 研究背景第13-15页
材料与方法第15-24页
 1、材料第15-17页
   ·引物合成及序列测定第15页
   ·菌株、细胞株和质粒第15页
   ·细胞培养基与真核转染试剂第15页
   ·常用分子生物学工具酶第15-16页
   ·分子生物学试剂盒第16页
   ·蛋白免疫分析试剂第16页
   ·化学试剂第16页
   ·实验仪器设备第16-17页
 2、方法第17-24页
   ·PCR 反应、质粒构建以及阳性克隆的鉴定第17页
   ·腺病毒载体的构建与腺病毒的包装、收集、扩增、滴度测定第17-22页
   ·细胞转染第22页
   ·细胞蛋白的提取第22页
   ·蛋白定量第22-23页
     ·W estern 印迹分析第23页
   ·平板克隆形成实验第23页
   ·伤口愈合wound-healing 实验第23-24页
实验结果第24-43页
 第一部分PC-1 亚细胞定位的研究第24-31页
   ·生物信息学预测PC-1 亚细胞定位的关键氨基酸序列第24-26页
   ·融合绿色荧光蛋白的PC-1 截短体、缺失体、突变体的构建以及这些载体在细胞中的表达验证第26-27页
     ·G FP-PC-1 融合蛋白的亚细胞定位分析第27-29页
  讨论第29-31页
 第二部分PC-1 特异性区段功能的研究第31-39页
   ·腺病毒载体pAdEasy-EGFP 的构建第33-34页
     ·p AdEasy-EGFP-PC-11-46、pAdEasy-EGFP-PC-147-224、pAdEasy-EGFP-PC-1 的构建与表达验证第34-36页
   ·腺病毒滴度的测定第36-37页
   ·腺病毒pAd-EGFP 感染前列腺癌细胞系LNCaP第37-38页
  讨论第38-39页
 第三部分 共轭亚油酸(CLA)抗癌功能的初步探讨第39-43页
     ·C LA 体外抑制癌细胞的生长第39-40页
     ·C LA 体外抑制C4-2 细胞的迁移第40-41页
   ·高浓度CLA 抑制C4-2 细胞中AKT Se1473 的磷酸化水平第41-42页
  讨论第42-43页
结论第43-44页
参考文献第44-48页
附录一:构建载体用到的引物第48-50页
附录二:质粒构建流程图第50-52页
致谢第52页

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