摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
前言 | 第11页 |
第一部分 流感病毒NS1蛋白参与的免疫应答 | 第11-52页 |
流感病毒 | 第11-18页 |
1.1 A型流感病毒特性及致病机理 | 第11页 |
1.2 流感病毒形态结构 | 第11-12页 |
1.3 宿主细胞对流感病毒感染的免疫应答以及病毒参与的免疫逃逸 | 第12-17页 |
1.4 本研究的立题依据以及拟解决的科学问题,研究思路以及研究方法 | 第17-18页 |
材料与方法 | 第18-29页 |
1 材料 | 第18-19页 |
1.1 质粒、菌株、病毒和细胞 | 第18页 |
1.2 分子生物学试剂 | 第18-19页 |
1.3 抗体 | 第19页 |
1.4 主要实验仪器设备 | 第19页 |
2 实验方法 | 第19-29页 |
2.1 重组质粒的构建 | 第19页 |
2.2 细胞复苏、传代和冻存 | 第19-20页 |
2.3 细胞的转染 | 第20-21页 |
2.4 免疫沉淀以及免疫印迹 | 第21-22页 |
2.5 免疫荧光 | 第22页 |
2.6 荧光素酶活性测定 | 第22页 |
2.7 Duo-Link实验 | 第22-23页 |
2.8 新城疫病毒(NDV-GFP)感染实验 | 第23-24页 |
2.8.1 NDV-GFP病毒培养 | 第23页 |
2.8.2 NDV-GFP感染实验 | 第23页 |
2.8.3 NDV-GFP生物学效应实验 | 第23-24页 |
2.9 病毒增殖与纯化 | 第24-25页 |
2.9.1 流感病毒增殖 | 第24-25页 |
2.9.2 流感病毒细胞感染 | 第25页 |
2.10 RNA的提取 | 第25页 |
2.11 RT-PCR | 第25-26页 |
2.11.1 RT反应 | 第25页 |
2.11.2 定量PCR扩增以及结果分析 | 第25-26页 |
2.11.3 定量PCR使用引物 | 第26页 |
2.12 定点突变 | 第26-28页 |
2.13 siRNA | 第28页 |
2.14 细胞凋亡检测 | 第28页 |
2.15 统计学分析 | 第28-29页 |
实验结果 | 第29-49页 |
1. 2009 年大流行流感病毒NS1蛋白分析 | 第29-30页 |
1.1 2009 年流感病毒NS1蛋白进化分析 | 第29页 |
1.2 2009 年流感病毒NS1蛋白序列分析 | 第29-30页 |
2. NS1蛋白功能位点筛选 | 第30-39页 |
3. NS1蛋白RIG-I信号通路 | 第39-43页 |
4. NS1与蛋白酶体信号通路 | 第43-47页 |
5. 反向遗传学拯救流感病毒 | 第47-48页 |
6. 位点突变对流感病毒致病性的影响 | 第48-49页 |
讨论 | 第49-51页 |
NS1同源性分析 | 第49-50页 |
NS1蛋白与病毒感染过程 | 第50页 |
NS1蛋白与宿主蛋白之间的相互作用 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
第二部分 SARS-CoV病毒N蛋白抑制干扰素产生机制的研究 | 第52-72页 |
SARS冠状病毒概述 | 第52-54页 |
结果 | 第54-69页 |
1. N蛋白抑制干扰素产生 | 第54-60页 |
2. N蛋白抑制RIG-I泛素化 | 第60-62页 |
3. N蛋白抑制干扰素下游信号通路的激活 | 第62-64页 |
4. TRIM25对SARS-Co V病毒复制的影响 | 第64-67页 |
5. MERS-Co V N蛋白与TRIM25相互作用 | 第67-69页 |
讨论 | 第69-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-77页 |
附录 | 第77-78页 |
个人简介 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |