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流感病毒NS1蛋白以及SARS冠状病毒N蛋白参与的免疫逃逸机制研究

摘要第6-8页
abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
前言第11页
第一部分 流感病毒NS1蛋白参与的免疫应答第11-52页
    流感病毒第11-18页
        1.1 A型流感病毒特性及致病机理第11页
        1.2 流感病毒形态结构第11-12页
        1.3 宿主细胞对流感病毒感染的免疫应答以及病毒参与的免疫逃逸第12-17页
        1.4 本研究的立题依据以及拟解决的科学问题,研究思路以及研究方法第17-18页
    材料与方法第18-29页
        1 材料第18-19页
            1.1 质粒、菌株、病毒和细胞第18页
            1.2 分子生物学试剂第18-19页
            1.3 抗体第19页
            1.4 主要实验仪器设备第19页
        2 实验方法第19-29页
            2.1 重组质粒的构建第19页
            2.2 细胞复苏、传代和冻存第19-20页
            2.3 细胞的转染第20-21页
            2.4 免疫沉淀以及免疫印迹第21-22页
            2.5 免疫荧光第22页
            2.6 荧光素酶活性测定第22页
            2.7 Duo-Link实验第22-23页
            2.8 新城疫病毒(NDV-GFP)感染实验第23-24页
                2.8.1 NDV-GFP病毒培养第23页
                2.8.2 NDV-GFP感染实验第23页
                2.8.3 NDV-GFP生物学效应实验第23-24页
            2.9 病毒增殖与纯化第24-25页
                2.9.1 流感病毒增殖第24-25页
                2.9.2 流感病毒细胞感染第25页
            2.10 RNA的提取第25页
            2.11 RT-PCR第25-26页
                2.11.1 RT反应第25页
                2.11.2 定量PCR扩增以及结果分析第25-26页
                2.11.3 定量PCR使用引物第26页
            2.12 定点突变第26-28页
            2.13 siRNA第28页
            2.14 细胞凋亡检测第28页
            2.15 统计学分析第28-29页
    实验结果第29-49页
        1. 2009 年大流行流感病毒NS1蛋白分析第29-30页
            1.1 2009 年流感病毒NS1蛋白进化分析第29页
            1.2 2009 年流感病毒NS1蛋白序列分析第29-30页
        2. NS1蛋白功能位点筛选第30-39页
        3. NS1蛋白RIG-I信号通路第39-43页
        4. NS1与蛋白酶体信号通路第43-47页
        5. 反向遗传学拯救流感病毒第47-48页
        6. 位点突变对流感病毒致病性的影响第48-49页
    讨论第49-51页
        NS1同源性分析第49-50页
        NS1蛋白与病毒感染过程第50页
        NS1蛋白与宿主蛋白之间的相互作用第50-51页
    结论第51-52页
第二部分 SARS-CoV病毒N蛋白抑制干扰素产生机制的研究第52-72页
    SARS冠状病毒概述第52-54页
    结果第54-69页
        1. N蛋白抑制干扰素产生第54-60页
        2. N蛋白抑制RIG-I泛素化第60-62页
        3. N蛋白抑制干扰素下游信号通路的激活第62-64页
        4. TRIM25对SARS-Co V病毒复制的影响第64-67页
        5. MERS-Co V N蛋白与TRIM25相互作用第67-69页
    讨论第69-71页
    结论第71-72页
参考文献第72-77页
附录第77-78页
个人简介第78-79页
致谢第79页

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