符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-23页 |
1.1 植物萜类物质 | 第13-16页 |
1.1.1 植物萜类化合物的功能 | 第13-14页 |
1.1.2 植物萜类化合物的代谢途径 | 第14-15页 |
1.1.2.1 甲羟戊酸(MVA)途径 | 第14-15页 |
1.1.2.2 2-甲基赤藓糖醇4磷酸(MEP)途径 | 第15页 |
1.1.3 植物萜类代谢途径中的相关酶 | 第15-16页 |
1.1.3.1 3-烃基3甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)的研究进展 | 第16页 |
1.2 植物启动子简述 | 第16-22页 |
1.2.1 启动子的种类 | 第17-20页 |
1.2.1.1 组成型启动子 | 第17-18页 |
1.2.1.2 组织特异型启动子 | 第18页 |
1.2.1.3 诱导型启动子 | 第18-20页 |
1.2.2 启动子的分离 | 第20-22页 |
1.2.2.1 利用基因组文库筛选启动子 | 第21页 |
1.2.2.2 利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第21页 |
1.2.2.3 启动子捕获方法分离和鉴别启动子 | 第21-22页 |
1.2.2.4 通过PCR技术克隆启动子 | 第22页 |
1.3 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-36页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第23页 |
2.1.3 酶和生化试剂 | 第23页 |
2.1.4 PCR引物 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-36页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.2 cDNA第一条链的合成 | 第25-26页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR | 第26页 |
2.2.4 CTAB法提取青香蕉苹果叶片的基因组DNA | 第26-27页 |
2.2.5 目的片段的回收 | 第27页 |
2.2.6 连接反应 | 第27-28页 |
2.2.7 重组载体转化大肠杆菌及克隆的筛选 | 第28页 |
2.2.8 质粒提取试剂盒提取质粒DNA | 第28-29页 |
2.2.9 重组质粒的双酶切鉴定 | 第29页 |
2.2.10 农杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
2.2.11 冻融法转化农杆菌 | 第30页 |
2.2.12 农杆菌介导转化番茄 | 第30-32页 |
2.2.13 转基因番茄的PCR检测 | 第32页 |
2.2.14 转基因番茄的组织表达分析 | 第32页 |
2.2.14.1 试剂盒法提取总RNA | 第32页 |
2.2.14.2 RNA反转录 | 第32页 |
2.2.14.3 转基因植株的qRT-PCR分析荧光定量PCR分析 | 第32页 |
2.2.15 激素诱导表达分析 | 第32页 |
2.2.16 转基因番茄生长发育特征分析 | 第32-34页 |
2.2.16.1 纵径和横径 | 第32-33页 |
2.2.16.2 果形指数 | 第33页 |
2.2.16.3 MdHMGR1对番茄果实发育的影响 | 第33页 |
2.2.16.4 番茄植株不同部位中细胞分裂素和生长素的含量 | 第33-34页 |
2.2.17 转基因植株逆境生理指标测定 | 第34-36页 |
2.2.17.1 叶绿素和类胡萝卜素含量的测定 | 第34页 |
2.2.17.2 抗氧化酶活性的测定 | 第34-36页 |
3 结果与分析 | 第36-47页 |
3.1 表达载体的构建 | 第36-37页 |
3.2 转基因番茄的鉴定及基因的表达分析 | 第37-39页 |
3.2.1 基因组水平鉴定 | 第37-38页 |
3.2.2 转录水平鉴定 | 第38-39页 |
3.3 苹果HMGR基因家族的表达模式分析 | 第39-40页 |
3.3.1 MdHMGR1在转基因番茄的组织表达分析 | 第39页 |
3.3.2 MdHMGR1-1+HMGR1转基因番茄的激素诱导表达分析 | 第39-40页 |
3.4 转基因番茄果实的生长发育特征分析 | 第40-44页 |
3.4.1 MdHMGR1诱导转基因番茄根的伸长 | 第40-41页 |
3.4.2 转基因番茄果实发育过程中的表型分析 | 第41-43页 |
3.4.2.1 番茄果实发育过程中果实型状的变化 | 第42页 |
3.4.2.2 转基因番茄果实的发育 | 第42-43页 |
3.4.3 MdHMGR1-1+HMGR1番茄植株的幼果中有较高的CTK、IAA含量 | 第43-44页 |
3.5 盐胁迫对转基因番茄的影响 | 第44-47页 |
3.5.1 过量表达MdHMGR1提高了转基因番茄叶绿素、类胡萝卜素含量 | 第44-45页 |
3.5.2 过表达MdHMGR1提高了转基因番茄抗氧化酶活性 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56页 |