| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| 1.1 抗氧化系统的概述 | 第11页 |
| 1.2 酶类抗氧化物 | 第11-13页 |
| 1.2.1 超氧化物歧化酶 | 第11-12页 |
| 1.2.2 硫氧还蛋白过氧化物酶 | 第12页 |
| 1.2.3 硫氧还蛋白 | 第12-13页 |
| 1.2.4 金属硫蛋白 | 第13页 |
| 1.3 非酶类抗氧化物 | 第13-15页 |
| 1.3.1 谷胱甘肽 | 第13-14页 |
| 1.3.2 维生素E | 第14页 |
| 1.3.3 维生素C | 第14-15页 |
| 1.4 抗氧化蛋白的提取制备与分离 | 第15-17页 |
| 1.4.1 直接提取法 | 第15-16页 |
| 1.4.2 酶解法 | 第16页 |
| 1.4.3 发酵法 | 第16页 |
| 1.4.4 基因重组法 | 第16-17页 |
| 1.5 抗氧化活性的测定 | 第17-20页 |
| 1.5.1 清除超氧阴离子活性的测定 | 第17-18页 |
| 1.5.2 清除羟自由基活性的测定 | 第18页 |
| 1.5.3 DPPH活性的测定 | 第18-19页 |
| 1.5.4 SOD活性的测定 | 第19页 |
| 1.5.5 TPX活性的测定 | 第19-20页 |
| 1.6 抗氧化蛋白的抗氧化机制 | 第20页 |
| 1.7 抗氧化蛋白的应用与展望 | 第20-21页 |
| 1.8 研究的内容、技术路线及目的意义 | 第21-24页 |
| 1.8.1 研究内容 | 第21-22页 |
| 1.8.2 研究技术路线 | 第22页 |
| 1.8.3 研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 皱纹盘鲍抗氧化蛋白的制备 | 第24-48页 |
| 2.1 材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂和主要耗材 | 第24-25页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 毕赤酵母分泌型表达载体的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.2 pPIC9K-HdhCu/Zn-SOD和pPIC9K-HdhTPX2载体的构建、转化和鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.3 电击转化线性化的重组表达载体 | 第32页 |
| 2.2.4 HdhCu/Zn-SOD和HdhTPX2优化工艺条件 | 第32-35页 |
| 2.2.5 目的蛋白Cu/Zn-SOD和TPX2的大量表达和纯化 | 第35-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-47页 |
| 2.3.1 HdhCu/Zn-SOD和HdhTPX2真核表达载体的构建及表达纯化 | 第37-39页 |
| 2.3.2 HdhCu/Zn-SOD和HdhTPX2优化诱导表达条件 | 第39-44页 |
| 2.3.3 Cu/Zn-SOD和TPX2纯化 | 第44-46页 |
| 2.3.4 Cu/Zn-SOD和TPX2质谱结果分析 | 第46-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第三章 皱纹盘鲍抗氧化蛋白测定体外抗氧化活性 | 第48-56页 |
| 3.1 材料 | 第48页 |
| 3.1.1 重组表达蛋白Cu/Zn-SOD和TPX2的制备 | 第48页 |
| 3.1.2 主要试剂及主要耗材 | 第48页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第48页 |
| 3.2 方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 蛋白浓度的测定 | 第48-49页 |
| 3.2.2 活性的测定 | 第49-51页 |
| 3.3 结果分析 | 第51-54页 |
| 3.3.1 标准蛋白的标准曲线 | 第51-52页 |
| 3.3.2 体外抗氧化活性测定 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 皱纹盘鲍抗氧化蛋白细胞活性评价 | 第56-64页 |
| 4.1 材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 实验细胞 | 第56页 |
| 4.1.2 主要试剂及主要耗材 | 第56页 |
| 4.1.3 细胞活性测定试剂配制 | 第56-57页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第57页 |
| 4.2 方法 | 第57-58页 |
| 4.2.1 细胞传代 | 第57-58页 |
| 4.2.2 细胞种板 | 第58页 |
| 4.3 评价细胞活性 | 第58-59页 |
| 4.3.1 细胞饥饿 | 第58页 |
| 4.3.2 细胞敷药 | 第58-59页 |
| 4.3.3 溶血实验 | 第59页 |
| 4.4 结果分析 | 第59-62页 |
| 4.4.1 安全性评价 | 第59-61页 |
| 4.4.2 抗氧化功能评价 | 第61-62页 |
| 4.5 讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 5.1 结论 | 第64-65页 |
| 5.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 附表 缩略词对照表 | 第74-77页 |
| 研究生期间发表论文及参加科研项目 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
