| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-27页 |
| 1.1 G.oxydans | 第12-14页 |
| 1.1.1 G.oxydans的基本特征 | 第12-13页 |
| 1.1.2 G.oxydans工业应用 | 第13-14页 |
| 1.2 G.oxydans中的D-山梨醇代谢 | 第14-17页 |
| 1.2.1 G.oxydans碳源代谢特征 | 第14-15页 |
| 1.2.2 D-山梨醇在G.oxydans中的代谢 | 第15页 |
| 1.2.3 G.oxydans中的山梨醇脱氢酶 | 第15-16页 |
| 1.2.4 G.oxydans中的L-山梨糖还原酶 | 第16-17页 |
| 1.3 G.oxydans的呼吸链 | 第17-20页 |
| 1.3.1 G.oxydans核心呼吸链的组成 | 第17-19页 |
| 1.3.2 G.oxydans的膜结合脱氢酶 | 第19-20页 |
| 1.4 NADH脱氢酶Ⅱ | 第20-26页 |
| 1.4.1 NADH脱氢酶的分布 | 第20-21页 |
| 1.4.2 NADH脱氢酶Ⅱ基本特征与分类 | 第21-24页 |
| 1.4.3 NADH脱氢酶Ⅱ的生理应用及医学应用 | 第24-25页 |
| 1.4.4 G.oxydans NADH脱氢酶Ⅱ的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.5 论文选题的依据和意义以及主要的研究内容 | 第26-27页 |
| 第2章 氧化葡萄糖酸杆菌中NADH脱氢酶Ⅱ的酶学性质研究 | 第27-45页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 菌种、质粒及引物 | 第28页 |
| 2.2.2 培养条件及抗生素 | 第28页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第29-33页 |
| 2.3 本章实验思路 | 第33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-44页 |
| 2.4.1 G.oxydans DSM 2003 NDH-2的生物信息学分析 | 第33-36页 |
| 2.4.2 重组质粒pET28a-ndh的构建 | 第36-37页 |
| 2.4.3 NDH-2在E.coli BL21中的表达形态的确定 | 第37-39页 |
| 2.4.4 NDH-2在E.coli BL21中表达活性的鉴定 | 第39页 |
| 2.4.5 NDH-2蛋白的纯化及亚基数确定 | 第39-40页 |
| 2.4.6 NDH-2酶学性质的研究 | 第40-44页 |
| 2.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第3章 NDH-2过表达对G.oxydans生长及碳源代谢的影响 | 第45-80页 |
| 3.1 引言 | 第45-46页 |
| 3.2 材料和方法 | 第46-56页 |
| 3.2.1 菌种、质粒及引物 | 第46-47页 |
| 3.2.2 培养条件及抗生素 | 第47页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第47页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第47-56页 |
| 3.3 本章实验思路 | 第56页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第56-79页 |
| 3.4.1 考察不同启动子对NDH-2在G.oxydans中过表达的影响 | 第56-60页 |
| 3.4.2 NDH-2过表达质粒pBBR1pndh-ndh缺失率的测定 | 第60页 |
| 3.4.3 摇瓶中NDH-2过表达菌株生长曲线测定 | 第60-61页 |
| 3.4.4 发酵罐中葡萄糖为碳源时,NDH-2过表达对G.oxydans生长及代谢的影响 | 第61-62页 |
| 3.4.5 发酵罐中甘油为碳源时,NDH-2过表达对G.oxydans生长及代谢的影响 | 第62-63页 |
| 3.4.6 发酵罐中D-山梨醇为碳源时,NDH-2过表达对G.oxydans生长及代谢的影响 | 第63-79页 |
| 3.5 本章小结 | 第79-80页 |
| 第4章 NDH-2过表达对G.oxydans能量代谢的影响 | 第80-104页 |
| 4.1 引言 | 第80-81页 |
| 4.2 材料和方法 | 第81-85页 |
| 4.2.1 菌种、质粒及引物 | 第81页 |
| 4.2.2 培养条件及抗生素 | 第81页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第81页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第81-85页 |
| 4.3 本章实验思路 | 第85页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第85-103页 |
| 4.4.1 NDH-2过表达对G.oxydans膜蛋白的影响 | 第85-92页 |
| 4.4.2 NDH-2过表达对G.oxydans呼吸链组分的影响 | 第92-96页 |
| 4.4.3 NDH-2过表达对G.oxydans摄氧率(OUR)和对H~+/O的影响 | 第96-98页 |
| 4.4.4 NDH-2过表达对G.oxydans各主要膜结合脱氢酶转录及催化活性的影响 | 第98-103页 |
| 4.5 本章小结 | 第103-104页 |
| 第5章 G.oxydans新型强启动子的筛选及应用 | 第104-122页 |
| 5.1 引言 | 第104-105页 |
| 5.2 材料与方法 | 第105-107页 |
| 5.2.1 菌株、质粒及引物 | 第105页 |
| 5.2.2 培养条件及抗生素 | 第105页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第105-106页 |
| 5.2.4 实验方法 | 第106-107页 |
| 5.3 本章实验思路 | 第107页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第107-121页 |
| 5.4.1 启动子gHp0169的筛选及序列分析 | 第107-109页 |
| 5.4.2 检测gHp0169在G.oxydans中启动外源基因表达的活性 | 第109-113页 |
| 5.4.3 检测gHp0169在G.oxydans中启动内源基因表达的活性 | 第113-114页 |
| 5.4.4 启动子gHp0169在G.oxydans中的应用-构建2-KGA高产菌株 | 第114-119页 |
| 5.4.5 启动子gHp0169在E.coli中的应用 | 第119-121页 |
| 5.5 本章小结 | 第121-122页 |
| 第6章 结论与展望 | 第122-124页 |
| 6.1 结论 | 第122页 |
| 6.2 展望 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 博士期间撰写发表的论文与专利 | 第140-141页 |
| 卷内备考表 | 第141页 |
