| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 氧化葡萄糖酸杆菌 | 第11-15页 |
| 1.1.1 氧化葡萄糖酸杆菌的特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 氧化葡萄糖酸杆菌的呼吸链 | 第12-13页 |
| 1.1.3 氧化葡萄糖酸杆菌的膜结合脱氢酶系统 | 第13-15页 |
| 1.2 膜结合乙醇脱氢酶 | 第15-19页 |
| 1.2.1 膜结合乙醇脱氢酶的组成 | 第15-17页 |
| 1.2.2 膜结合乙醇脱氢酶与抗氰呼吸链 | 第17页 |
| 1.2.3 膜结合乙醇脱氢酶的底物特异性 | 第17-18页 |
| 1.2.4 膜结合乙醇脱氢酶的对映体选择性氧化 | 第18页 |
| 1.2.5 膜结合乙醇脱氢酶在生物电化学催化中的应用 | 第18-19页 |
| 1.3 甘油的催化氧化 | 第19-25页 |
| 1.3.1 化学法催化氧化甘油 | 第19-21页 |
| 1.3.2 生物法催化氧化甘油 | 第21-22页 |
| 1.3.3 甘油在氧化葡萄糖酸杆菌中的代谢 | 第22页 |
| 1.3.4 膜结合甘油脱氢酶和二羟基丙酮 | 第22-23页 |
| 1.3.5 氧化葡萄糖酸杆菌生产二羟基丙酮 | 第23-24页 |
| 1.3.6 甘油酸 | 第24-25页 |
| 1.3.7 氧化葡萄糖酸杆菌生产甘油酸 | 第25页 |
| 1.4 本论文选题依据及主要研究内容 | 第25-27页 |
| 第2章 G.oxydans中膜结合乙醇脱氢酶亚基Ⅲ的克隆鉴定及功能分析 | 第27-55页 |
| 2.1 前言 | 第27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-38页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第27-31页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-53页 |
| 2.3.1 G.oxydans DSM 2003中mADH亚基Ⅲ编码基因的克隆与鉴定 | 第38-39页 |
| 2.3.2 mADH差异过表达菌株的构建 | 第39-41页 |
| 2.3.3 mADH亚基(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ)的同源过表达 | 第41-48页 |
| 2.3.4 mADH亚基Ⅲ的同源过表达 | 第48-50页 |
| 2.3.5 mADH亚基(Ⅰ+Ⅱ)的同源过表达 | 第50-52页 |
| 2.3.6 差异过表达菌株中mADH各亚基的表达水平 | 第52-53页 |
| 2.4 本章小结 | 第53-55页 |
| 第3章 膜结合乙醇脱氢酶过表达的G.oxydans产羟基酸能力的研究 | 第55-64页 |
| 3.1 前言 | 第55页 |
| 3.2 材料与方法 | 第55-58页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第55页 |
| 3.2.2 菌体的培养与收集 | 第55页 |
| 3.2.3 静息细胞催化氧化1,2-丙二醇 | 第55-56页 |
| 3.2.4 静息细胞催化氧化乙二醇 | 第56页 |
| 3.2.5 直接发酵法转化乙二醇 | 第56页 |
| 3.2.6 分析方法 | 第56-58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-62页 |
| 3.3.1 静息细胞催化1,2-丙二醇合成D-乳酸 | 第58页 |
| 3.3.2 静息细胞催化乙二醇合成羟基乙酸 | 第58-61页 |
| 3.3.3 直接发酵法转化乙二醇 | 第61-62页 |
| 3.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第4章 膜结合乙醇脱氢酶的过表达对G.oxydans呼吸链及其它膜结合脱氢酶的影响 | 第64-87页 |
| 4.1 前言 | 第64页 |
| 4.2 材料与方法 | 第64-67页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第64-65页 |
| 4.2.2 发酵罐中细菌生长的测定 | 第65-66页 |
| 4.2.3 摄氧率的测定 | 第66页 |
| 4.2.4 细胞膜组分的制备 | 第66页 |
| 4.2.5 蛋白浓度的测定 | 第66页 |
| 4.2.6 膜蛋白酶活测定方法 | 第66页 |
| 4.2.7 不同底物的静息细胞催化 | 第66页 |
| 4.2.8 分析方法 | 第66-67页 |
| 4.3 结果与分析 | 第67-85页 |
| 4.3.1 过表达菌株G.oxydans-adhABS在摇瓶培养中的pH变化 | 第67-68页 |
| 4.3.2 过表达菌株G.oxydans-adhABS呼吸链元件的转录分析 | 第68-73页 |
| 4.3.3 过表达菌株G.oxydans-adhABS的摄氧率 | 第73-74页 |
| 4.3.4 不同供氧条件下过表达菌株G.oxydans-adhABS的培养 | 第74-75页 |
| 4.3.5 mADH的过表达对G.oxydans中其它主要膜结合脱氢酶的转录及活性影响 | 第75-85页 |
| 4.4 本章小结 | 第85-87页 |
| 第5章 膜结合乙醇脱氢酶差异过表达对G.oxydans中甘油氧化产物选择性的影响 | 第87-98页 |
| 5.1 前言 | 第87页 |
| 5.2 材料与方法 | 第87-89页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第87-88页 |
| 5.2.2 氧化葡萄糖酸杆菌催化甘油的动力学测定 | 第88页 |
| 5.2.3 甘油培养基中细菌生长及甘油利用率的测定 | 第88页 |
| 5.2.4 甘油的静息细胞催化 | 第88页 |
| 5.2.5 分析方法 | 第88-89页 |
| 5.3 结果与分析 | 第89-96页 |
| 5.3.1 G.oxydans DSM 2003催化甘油的动力学常数 | 第89页 |
| 5.3.2 mADH亚基(Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ)过表达菌株对甘油氧化产物的选择性 | 第89-92页 |
| 5.3.3 mADH亚基Ⅲ过表达对甘油氧化产物的选择性 | 第92-94页 |
| 5.3.4 mADH亚基(Ⅰ+Ⅱ)过表达对甘油氧化产物的选择性 | 第94-96页 |
| 5.4 本章小结 | 第96-98页 |
| 第6章 结论与展望 | 第98-101页 |
| 6.1 结论 | 第98-99页 |
| 6.2 展望 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 在学期间发表的论文 | 第113-114页 |
| 卷内备考表 | 第114页 |
