中文摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-29页 |
·结肠腺瘤息肉蛋白 | 第16-18页 |
·结肠腺瘤息肉蛋白的结构及其氨基酸序列组成 | 第16-17页 |
·结肠腺瘤息肉蛋白的功能 | 第17-18页 |
·结肠腺瘤息肉蛋白突变与相关疾病 | 第18页 |
·纤毛 | 第18-21页 |
·纤毛的结构及组装解聚 | 第18-19页 |
·纤毛的功能 | 第19-20页 |
·纤毛与Hedgehog信号通路 | 第20-21页 |
·结肠腺瘤息肉蛋白、Hedgehog信号通路和纤毛 | 第21-22页 |
·细胞粘附 | 第22-23页 |
·细胞粘附简介 | 第22-23页 |
·PI3K/AKT信号通路和细胞粘附 | 第23页 |
·结肠腺瘤息肉蛋白和细胞粘附 | 第23-24页 |
·研究目的及意义 | 第24页 |
参考文献 | 第24-29页 |
第二章 APC-N1通过β-catenin激活Hedgehog信号通路进而抑制纤毛形成 | 第29-42页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·细胞株和质粒 | 第29-30页 |
·抗体及实验试剂 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·MDCK细胞的培养 | 第31页 |
·MDCK细胞的复苏 | 第31页 |
·MDCK细胞的冻存 | 第31-32页 |
·RNA干扰 | 第32页 |
·抑制剂GANT61药物处理 | 第32页 |
·总RNA提取及反转录 | 第32-33页 |
·荧光定量PCR | 第33页 |
·总蛋白提取 | 第33页 |
·Western印迹 | 第33-34页 |
·免疫荧光染色 | 第34页 |
·统计学分析 | 第34页 |
·实验结果 | 第34-40页 |
·APC-N1片段过表达激活Hedgehog信号通路 | 第34-36页 |
·APC-N1通过Hedgehog信号通路抑制纤毛的生长 | 第36-38页 |
·APC-N1通过β-catenin激活Hedgehog信号通路 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第三章 APC-N1通过Hedgehog信号通路调节AurA/HDAC6进而抑制纤毛生长 | 第42-50页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·细胞株和质粒 | 第42页 |
·抗体及试剂 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-44页 |
·MDCK-APC-N1细胞的培养 | 第43页 |
·MDCK-APC-N1细胞的复苏 | 第43页 |
·MDCK-APC-N1细胞的冻存 | 第43页 |
·抑制剂TSA药物处理 | 第43页 |
·RNA干扰 | 第43页 |
·总RNA提取及反转录 | 第43页 |
·免疫荧光染色 | 第43页 |
·荧光定量PCR | 第43-44页 |
·总蛋白提取及Western印迹 | 第44页 |
·统计学分析 | 第44页 |
·实验结果 | 第44-47页 |
·APC-N1通过上调AurA和HDAC6影响纤毛形成 | 第44-46页 |
·APC-N1通过Hedgehog信号通路调节AurA和HDAC6进而抑制纤毛形成 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-50页 |
第四章 APC-N1对犬肾细胞MDCK细胞粘附的影响 | 第50-61页 |
·实验材料 | 第50-51页 |
·细胞株和质粒 | 第50页 |
·抗体及试剂 | 第50-51页 |
·实验方法 | 第51-52页 |
·MDCK-APC-GFP、MDCK-APC-N1细胞的培养、复苏、冻存 | 第51页 |
·抑制剂LY294002药物处理 | 第51页 |
·细胞聚集实验 | 第51页 |
·细胞-基质粘附实验 | 第51页 |
·RNA干扰 | 第51页 |
·总RNA提取及反转录 | 第51页 |
·荧光定量PCR | 第51-52页 |
·总蛋白提取及Western印迹 | 第52页 |
·统计学分析 | 第52页 |
·实验结果 | 第52-56页 |
·APC-N1过表达对MDCK细胞间粘附和E-cadherin表达的影响 | 第52-53页 |
·APC-N1过表达对MDCK细胞基质间粘附和CD29表达的影响 | 第53-55页 |
·APC-N1通过β-catenin影响E-cadherin表达 | 第55页 |
·APC-N1通过PI3K/AKT信号通路影响E-cadherin和CD29的表达 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
结论与讨论 | 第61-63页 |
附录1 英文缩略语表 | 第63-65页 |
附录2 主要试剂配制 | 第65-67页 |
附录3 实验主要仪器设备 | 第67-68页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
个人简历及联系方式 | 第70-71页 |
承诺书 | 第71-72页 |