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结肠腺瘤息肉蛋白N端片段影响纤毛形成和细胞粘附的机制研究

中文摘要第1-14页
ABSTRACT第14-16页
第一章 文献综述第16-29页
   ·结肠腺瘤息肉蛋白第16-18页
     ·结肠腺瘤息肉蛋白的结构及其氨基酸序列组成第16-17页
     ·结肠腺瘤息肉蛋白的功能第17-18页
     ·结肠腺瘤息肉蛋白突变与相关疾病第18页
   ·纤毛第18-21页
     ·纤毛的结构及组装解聚第18-19页
     ·纤毛的功能第19-20页
     ·纤毛与Hedgehog信号通路第20-21页
   ·结肠腺瘤息肉蛋白、Hedgehog信号通路和纤毛第21-22页
   ·细胞粘附第22-23页
     ·细胞粘附简介第22-23页
     ·PI3K/AKT信号通路和细胞粘附第23页
   ·结肠腺瘤息肉蛋白和细胞粘附第23-24页
   ·研究目的及意义第24页
 参考文献第24-29页
第二章 APC-N1通过β-catenin激活Hedgehog信号通路进而抑制纤毛形成第29-42页
   ·实验材料第29-31页
     ·细胞株和质粒第29-30页
     ·抗体及实验试剂第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·MDCK细胞的培养第31页
     ·MDCK细胞的复苏第31页
     ·MDCK细胞的冻存第31-32页
     ·RNA干扰第32页
     ·抑制剂GANT61药物处理第32页
     ·总RNA提取及反转录第32-33页
     ·荧光定量PCR第33页
     ·总蛋白提取第33页
     ·Western印迹第33-34页
     ·免疫荧光染色第34页
     ·统计学分析第34页
   ·实验结果第34-40页
     ·APC-N1片段过表达激活Hedgehog信号通路第34-36页
     ·APC-N1通过Hedgehog信号通路抑制纤毛的生长第36-38页
     ·APC-N1通过β-catenin激活Hedgehog信号通路第38-40页
   ·讨论第40页
 参考文献第40-42页
第三章 APC-N1通过Hedgehog信号通路调节AurA/HDAC6进而抑制纤毛生长第42-50页
   ·实验材料第42-43页
     ·细胞株和质粒第42页
     ·抗体及试剂第42-43页
   ·实验方法第43-44页
     ·MDCK-APC-N1细胞的培养第43页
     ·MDCK-APC-N1细胞的复苏第43页
     ·MDCK-APC-N1细胞的冻存第43页
     ·抑制剂TSA药物处理第43页
     ·RNA干扰第43页
     ·总RNA提取及反转录第43页
     ·免疫荧光染色第43页
     ·荧光定量PCR第43-44页
     ·总蛋白提取及Western印迹第44页
     ·统计学分析第44页
   ·实验结果第44-47页
     ·APC-N1通过上调AurA和HDAC6影响纤毛形成第44-46页
     ·APC-N1通过Hedgehog信号通路调节AurA和HDAC6进而抑制纤毛形成第46-47页
   ·讨论第47-48页
 参考文献第48-50页
第四章 APC-N1对犬肾细胞MDCK细胞粘附的影响第50-61页
   ·实验材料第50-51页
     ·细胞株和质粒第50页
     ·抗体及试剂第50-51页
   ·实验方法第51-52页
     ·MDCK-APC-GFP、MDCK-APC-N1细胞的培养、复苏、冻存第51页
     ·抑制剂LY294002药物处理第51页
     ·细胞聚集实验第51页
     ·细胞-基质粘附实验第51页
     ·RNA干扰第51页
     ·总RNA提取及反转录第51页
     ·荧光定量PCR第51-52页
     ·总蛋白提取及Western印迹第52页
     ·统计学分析第52页
   ·实验结果第52-56页
     ·APC-N1过表达对MDCK细胞间粘附和E-cadherin表达的影响第52-53页
     ·APC-N1过表达对MDCK细胞基质间粘附和CD29表达的影响第53-55页
     ·APC-N1通过β-catenin影响E-cadherin表达第55页
     ·APC-N1通过PI3K/AKT信号通路影响E-cadherin和CD29的表达第55-56页
   ·讨论第56-57页
 参考文献第57-61页
结论与讨论第61-63页
附录1 英文缩略语表第63-65页
附录2 主要试剂配制第65-67页
附录3 实验主要仪器设备第67-68页
攻读学位期间取得的研究成果第68-69页
致谢第69-70页
个人简历及联系方式第70-71页
承诺书第71-72页

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