中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
·p,p'-DDE简介 | 第14-15页 |
·大肠癌 | 第15-20页 |
·大肠癌简介 | 第15-16页 |
·Wnt/β-catenin信号通路与大肠癌 | 第16-18页 |
·Hedgehog.Glil信号通路与大肠癌 | 第18-19页 |
·氧化应激与大肠癌 | 第19-20页 |
·p,p'-DDE与大肠癌 | 第20页 |
·本课题研究的目的及意义 | 第20页 |
参考文献 | 第20-24页 |
第二章 p,p'-DDE通过激活Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1信号通路促进大肠癌细胞增殖 | 第24-36页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·细胞株 | 第24页 |
·实验试剂及抗体 | 第24-25页 |
·研究方法 | 第25-28页 |
·大肠癌细胞的培养 | 第25页 |
·大肠癌细胞的复苏与冻存 | 第25页 |
·药物的配制 | 第25页 |
·MTT法检测细胞存活 | 第25页 |
·台盼蓝染色细胞计数法检测细胞增殖率 | 第25-26页 |
·RNA干扰实验 | 第26页 |
·大肠癌细胞总RNA提取及反转录 | 第26页 |
·荧光定量PCR | 第26-27页 |
·蛋白提取及Western印迹 | 第27页 |
·统计学分析 | 第27-28页 |
·结果 | 第28-33页 |
·低浓度的p,p'-DDE暴露促进DLD1和SW620细胞增殖 | 第28-29页 |
·p,p'-DDE暴露激活Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gil1信号通路 | 第29-31页 |
·敲减wnt信号通路的关键蛋白β-catenin抑制p,p'-DDE诱导的大肠癌细胞增殖 | 第31-32页 |
·敲减Hedgehog信号通路的关键蛋白Gli1抑制p,p'-DDE诱导的大肠癌细胞增殖 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-36页 |
第三章 p,p'-DDE通过改变氧化应激水平诱导大肠癌细胞增殖 | 第36-46页 |
·实验材料 | 第36页 |
·细胞株 | 第36页 |
·实验试剂 | 第36页 |
·研究方法 | 第36-40页 |
·细胞培养 | 第36页 |
·药物的配制 | 第36-37页 |
·活性氧(ROS)水平检测 | 第37页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性检测 | 第37-38页 |
·过氧化氢酶(CAT)活性检测 | 第38页 |
·还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测 | 第38-39页 |
·大肠癌细胞总RNA提取及反转录 | 第39页 |
·荧光定量PCR | 第39页 |
·MTT法检测细胞存活 | 第39-40页 |
·台盼蓝染色细胞计数法检测细胞的增殖率 | 第40页 |
·统计学分析 | 第40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·p,p'-DDE暴露对大肠癌细胞氧化应激水平的影响 | 第40页 |
·p,p'-DDE处理对大肠癌细胞NADPH氧化酶的影响 | 第40-43页 |
·p,p'-DDE通过氧化应激促进大肠癌细胞增殖 | 第43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第四章 p,p'-DDE通过氧化应激介导Wnt/β-catenin和Hedgehog/Gli1信号通路激活 | 第46-51页 |
·实验材料 | 第46页 |
·细胞株 | 第46页 |
·实验试剂 | 第46页 |
·研究方法 | 第46-47页 |
·大肠癌细胞的培养 | 第46-47页 |
·药物处理 | 第47页 |
·大肠癌细胞总RNA提取及反转录 | 第47页 |
·荧光定量PCR | 第47页 |
·蛋白提取及Western Blotting | 第47页 |
·统计学分析 | 第47页 |
·结果 | 第47-49页 |
·抗氧化剂处理抑制p,p'-DDE诱导的Wnt/β-catenin信号通路激活 | 第47-48页 |
·抗氧化剂处理抑制p,p'-DDE诱导的Hedgehog/Gli1信号通路激活 | 第48-49页 |
·抗氧化剂处理抑制p,p'-DDE诱导的c-Myc和cyclin D1的表达 | 第49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
附录1 主要试剂配方 | 第52-53页 |
附录2 实验主要仪器设备 | 第53-54页 |
附录3 英文缩略语表 | 第54-55页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
个人简况及联系方式 | 第57-58页 |
承诺书 | 第58-59页 |