| 摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| ·羊痘病毒的研究概况 | 第12-17页 |
| ·病原的分类及形态特征 | 第12页 |
| ·地理分布 | 第12-13页 |
| ·宿主范围 | 第13-14页 |
| ·传播方式 | 第14-15页 |
| ·临床症状及发病机制 | 第15页 |
| ·CaPV的免疫应答 | 第15-16页 |
| ·CaPV的疫苗 | 第16-17页 |
| ·痘病毒宿主范围及毒力相关基因的研究概况 | 第17-29页 |
| ·痘病毒的基因组结构和宿主范围 | 第18-19页 |
| ·痘病毒毒力基因和宿主范围基因 | 第19-28页 |
| ·痘病毒N1L基因研究概况 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第29-30页 |
| 第二章 山羊痘病毒N1L基因缺失重组毒株的构建及其生物特性研究 | 第30-55页 |
| ·材料和方法 | 第30-43页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·转移载体质粒pLR-EGFP-gpt和pLR-EGFP-gpt-N1Lrev的构建及鉴定 | 第34-39页 |
| ·重组转移质粒转染条件的优化 | 第39页 |
| ·重组病毒GTPV△N1L和GTPV N1Lrev的制备、筛选和纯化 | 第39-40页 |
| ·GTPV P32荧光定量PCR检测方法 | 第40-42页 |
| ·重组病毒的生物学特性鉴定 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-51页 |
| ·同源重组臂基因片段的克隆结果 | 第43-44页 |
| ·重组转移载体质粒的构建鉴定结果 | 第44页 |
| ·重组质粒转染条件优化结果 | 第44页 |
| ·重组病毒GTPV△N1L和GTPV N1Lrev的制备、纯化及PCR鉴定结果 | 第44-46页 |
| ·GTPV P32 Taqman荧光定量PCR检测方法的建立 | 第46-48页 |
| ·重组病毒的生物学特性鉴定 | 第48-51页 |
| ·讨论 | 第51-55页 |
| ·基因缺失转移载体质粒的设计与构建 | 第51-52页 |
| ·优化共转染条件,提高重组效率 | 第52-53页 |
| ·重组病毒的筛选与鉴定 | 第53页 |
| ·缺失N1基因对病毒生长和致病性的影响 | 第53-55页 |
| 第三章 稳定表达山羊痘病毒N1L基因的Hela细胞系筛选 | 第55-65页 |
| ·材料和方法 | 第55-60页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-60页 |
| ·结果 | 第60-62页 |
| ·真核表达质粒pcDNA-N1L酶切鉴定结果 | 第60页 |
| ·G418工作浓度和最佳转染条件的确定 | 第60页 |
| ·抗性Hela细胞株RT-PCR的检测 | 第60-62页 |
| ·抗性Hela细胞Westem-blot结果 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·瞬时转染与稳定转染的区别 | 第62-63页 |
| ·痘病毒N1蛋白的研究背景 | 第63-64页 |
| ·构建稳定表达GTPVN1蛋白的Hela细胞株 | 第64-65页 |
| 第四章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第80页 |
