| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| ·氰化物及其降解酶 | 第13-16页 |
| ·底物特异性 | 第13-14页 |
| ·催化机理 | 第14-16页 |
| ·氰降解酶催化功能的研究 | 第16-20页 |
| ·酶催化功能的研究方法 | 第16-18页 |
| ·氰降解酶催化功能的研究现状 | 第18-20页 |
| ·降氰微生物和含氰废水的生物修复 | 第20-24页 |
| ·氰降解微生物 | 第20-21页 |
| ·含氰废水的生物修复 | 第21-24页 |
| ·课题研究目的和意义 | 第24页 |
| ·本文的主要工作 | 第24-25页 |
| 第二章 产碱杆菌DN25降氰酶的催化特性 | 第25-39页 |
| ·实验材料与设备 | 第25-27页 |
| ·试剂和药品 | 第25页 |
| ·菌种和培养基 | 第25-26页 |
| ·实验设备及型号 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-31页 |
| ·氰根离子及其产物的测定 | 第27页 |
| ·cdE的诱导表达和纯化 | 第27-28页 |
| ·pH和温度对cdE酶活的影响 | 第28页 |
| ·cdE氮端组氨酸标签的切除 | 第28页 |
| ·突变体的构建 | 第28-30页 |
| ·感受太细胞制备 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第30-31页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第31页 |
| ·实验结果与讨论 | 第31-38页 |
| ·cdE的纯化 | 第31-32页 |
| ·pH和温度对cdE活力的影响 | 第32-33页 |
| ·cdE氮端组氨酸标签的切除 | 第33-35页 |
| ·cdE与P stutzeri AK61中氰水解酶催化特性的对比 | 第35-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 产碱杆菌DN25降氰酶催化机制的研究 | 第39-62页 |
| ·实验材料与设备 | 第39-40页 |
| ·试剂和仪器设备 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·氰根离子及其产物的测定 | 第40页 |
| ·不同温度和pH对甲酸和甲酰胺比的影响 | 第40页 |
| ·巯基的化学修饰 | 第40页 |
| ·同源建模与分子对接 | 第40页 |
| ·突变小库的构建 | 第40-42页 |
| ·碳端突变体的构建 | 第42页 |
| ·突变体的表达与纯化 | 第42页 |
| ·实验结果与讨论 | 第42-60页 |
| ·cdE的催化机理 | 第42-45页 |
| ·温度和pH对甲酸和甲酰胺之比的影响 | 第45-46页 |
| ·同源建模与分子对接 | 第46-48页 |
| ·Met162与Trp164位点对cdE催化功能的影响 | 第48-53页 |
| ·6A范围内氨基酸对cdE催化功能的影响 | 第53-56页 |
| ·组合突变对cdE催化功能的影响 | 第56-57页 |
| ·碳端突变体对cdE催化功能的影响 | 第57-60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 第四章 产碱杆菌DN25对金矿废水中氰的降解 | 第62-69页 |
| ·实验材料与设备 | 第62-63页 |
| ·试剂和药品 | 第62页 |
| ·菌株和培养基 | 第62-63页 |
| ·实验设备及型号 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-64页 |
| ·生物量的测定 | 第63页 |
| ·种子液的制备 | 第63-64页 |
| ·矿渣浸出液的提取 | 第64页 |
| ·游离氰及总氰的测定 | 第64页 |
| ·游离氰及总氰的降解 | 第64页 |
| ·实验结果与讨论 | 第64-68页 |
| ·菌株对选矿厂废水中氰的降解 | 第64-65页 |
| ·菌株对矿渣浸出液中氰的降解 | 第65-67页 |
| ·矿渣浸出液对产碱杆菌DN25生长的影响 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 第五章 结论与展望 | 第69-71页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| ·展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 附录 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第84页 |