摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-26页 |
·骨骼肌的发育和再生 | 第10-12页 |
·骨骼肌卫星细胞的角色 | 第12-13页 |
·细胞增殖分化过程中高度协调的基因调控网络 | 第13-20页 |
·生肌调节因子 | 第13-14页 |
·细胞分化抑制因子Id | 第14-17页 |
·miRNAs对肌细胞增殖/分化的调控 | 第17-20页 |
·miR-17-92 簇 | 第20-24页 |
·miR-17-92 功能介绍 | 第20-23页 |
·miR-17-92 的转录调节 | 第23-24页 |
·研究内容和意义 | 第24-26页 |
第二章 实验材料和方法 | 第26-35页 |
·实验材料 | 第26-28页 |
·实验模型及耗材 | 第26页 |
·主要试剂及数据处理软件 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-35页 |
·小鼠成肌分化模型的建立 | 第28页 |
·小鼠肌肉再生模型的建立 | 第28-29页 |
·小鼠肌肉发育模型的建立 | 第29页 |
·猪肌肉发育模型的建立 | 第29页 |
·miRNA荧光定量PCR检测 | 第29-30页 |
·总RNA的提取 | 第30-31页 |
·m RNA荧光定量PCR检测 | 第31-32页 |
·蛋白质免疫印迹 | 第32页 |
·miRNA过表达慢病毒载体以及抑制载体的构建 | 第32-33页 |
·Myog、Myo D启动子荧光素酶报告载体构建 | 第33页 |
·靶基因 3’-UTR载体和突变载体的构建 | 第33页 |
·慢病毒包装感染以及细胞转染实验 | 第33-34页 |
·双荧光素酶活性实验 | 第34页 |
·免疫荧光及免疫组化 | 第34-35页 |
第三章 结果分析 | 第35-55页 |
·miR-17-92 的表达 | 第35-39页 |
·miR-17-92 在猪肌肉发育过程中的表达 | 第35页 |
·miR-17-92 在小鼠肌肉发育发育过程的表达 | 第35-36页 |
·miR-17-92 在小鼠肌肉损伤再生过程的表达 | 第36页 |
·miR-17-92 在C2C12 细胞成肌分化模型中的表达 | 第36-39页 |
·miR-17-92 在成肌分化过程中的功能 | 第39-41页 |
·ENH1 是miR-17-92 的靶基因以及ENH1 的功能研究 | 第41-42页 |
·miR-17-92 通过靶向ENH1 的 3’UTR区域来调控ENH1 的表达 | 第42-44页 |
·ENH1 介导Id1 的出核促进成肌分化 | 第44-48页 |
·Id1 蛋白的表达和功能 | 第44-46页 |
·miR-17-92 通过ENH1-Id1 途径调控肌细胞增殖和分化 | 第46-48页 |
·miR-20a延缓了肌肉再生的动力学过程 | 第48-51页 |
·miR-17-92 在肌肉发育过程中的表达受到E2F1 的调控 | 第51-55页 |
·E2F1/miR-17-92 自主调节的反馈回路 | 第51-52页 |
·E2F1 与miR-17-92 的表达呈正相关 | 第52-55页 |
第四章 讨论 | 第55-65页 |
·miR-17-92 通过多种分子机制调控肌细胞的增殖与分化 | 第55-56页 |
·其他影响肌纤维生长发育的miRNAs | 第56-58页 |
·E2Fs因子对miR-17-92 转录表达的调控 | 第58-61页 |
·其他调控miR-17-92 转录表达的途径 | 第61-62页 |
·miR-17-92 通过ENH1-Id1 途径调控肌细胞的增殖与分化 | 第62-65页 |
第五章 结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
致谢 | 第75-76页 |