| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-21页 |
| ·LEA蛋白研究现状 | 第11-16页 |
| ·LEA蛋白概述 | 第11-12页 |
| ·LEA蛋白的理化性质及分类 | 第12-13页 |
| ·LEA蛋白为固有无序蛋白（IDPs） | 第13页 |
| ·LEA蛋白在耐受胁迫中的多重保护功能 | 第13-14页 |
| ·LEA蛋白结合离子及抗氧化保护作用 | 第14-16页 |
| ·LEA4 蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
| ·Cu~(2+)对植物的胁迫作用及植物耐受Cu~(2+)胁迫的方式 | 第17-20页 |
| ·本实验的意义及目的 | 第20-21页 |
| 第2章 材料和方法 | 第21-43页 |
| ·实验材料与主要试剂 | 第21-29页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌种和质粒 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂盒、酶及化学试剂 | 第23-25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·主要培养基及试剂配制 | 第26-29页 |
| ·方法 | 第29-43页 |
| ·大豆幼苗的培养及Cu~(2+)胁迫处理 | 第29-30页 |
| ·大豆幼苗叶和根RNA的提取 | 第30页 |
| ·RNA质量检测及浓度测定 | 第30-31页 |
| ·大豆幼苗叶和根RNA反转录 | 第31-32页 |
| ·反转录产物的实时荧光定量PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·酵母感受态细胞的制备及转化 | 第33页 |
| ·Cu~(2+)胁迫条件下酵母生长状态的测定 | 第33-34页 |
| ·GmPM1 蛋白系列缺失短肽的设计 | 第34页 |
| ·GmPM1 蛋白系列缺失克隆的构建 | 第34-38页 |
| ·GmPM1 蛋白及系列缺失短肽的获得 | 第38-41页 |
| ·羟基自由基清除实验 | 第41页 |
| ·利用ITC研究Cu~(2+)和蛋白的相互作用 | 第41页 |
| ·圆二色谱（CD）测定GmPM1 及系列缺失短肽二级结构 | 第41-43页 |
| 第3章 结果与分析 | 第43-65页 |
| ·CuSO4胁迫下大豆幼苗GmPM1 和Gm PM9 基因的表达分析 | 第43-47页 |
| ·CuSO4胁迫下大豆幼苗表型变化 | 第43页 |
| ·大豆幼苗总RNA的提取及反转录c DNA的鉴定 | 第43-44页 |
| ·actin、GmPM1 和Gm PM9 基因溶解曲线的测定 | 第44-45页 |
| ·CuSO4胁迫大豆幼苗叶和根GmPM1 和Gm PM9 基因的相对表达量 | 第45-47页 |
| ·转GmPM1 和Gm PM9 基因的重组酵母细胞耐Cu~(2+)胁迫分析 | 第47-48页 |
| ·大豆GmPM1 蛋白可提高酵母突变体细胞（Δcup2）对Cu~(2+)胁迫的耐受力 | 第47-48页 |
| ·大豆GmPM9 蛋白可提高酵母突变体细胞（Δcup2）对Cu~(2+)胁迫的耐受力 | 第48页 |
| ·GmPM1 蛋白与Cu~(2+)结合及其抗氧化作用分析 | 第48-65页 |
| ·GmPM1 蛋白序列分析及缺失短肽设计 | 第48-49页 |
| ·GmPM1 蛋白系列缺失克隆构建 | 第49-51页 |
| ·GmPM1 蛋白及其短肽的获得 | 第51-53页 |
| ·GmPM1 蛋白及部分缺失短肽具有清除羟基自由的能力 | 第53-57页 |
| ·GmPM1 蛋白及其短肽与Cu~(2+)相互作用 | 第57-59页 |
| ·GmPM1 蛋白及短肽与Cu~(2+)结合后二级结构的变化 | 第59-65页 |
| 第4章 讨论 | 第65-69页 |
| ·Cu~(2+)胁迫诱导的大豆幼苗Gm PM1、Gm PM9 基因表达模式 | 第65-66页 |
| ·GmPM1、GmPM9 蛋白可对Cu~(2+)敏感型酵母突变体（Δcup2）的功能缺失起到补偿作用 | 第66-67页 |
| ·GmPM1 蛋白组氨酸与离子结合及清除羟基自由基的关系 | 第67-69页 |
| 第5章 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附录 | 第76-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第80-81页 |
