| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| ·乳糖 | 第14页 |
| ·乳糖不耐症 | 第14-15页 |
| ·乳糖酶 | 第15-19页 |
| ·乳糖酶的测定方法 | 第16-17页 |
| ·旋光法 | 第16页 |
| ·还原糖法 | 第16页 |
| ·乳糖法 | 第16-17页 |
| ·ONPG法 | 第17页 |
| ·HPLC法 | 第17页 |
| ·乳糖酶的应用 | 第17-19页 |
| ·乳品工业中的应用 | 第17页 |
| ·生产低聚半乳糖 | 第17-18页 |
| ·制药工业中的应用 | 第18页 |
| ·在免疫、检测及疾病诊断方面的应用 | 第18页 |
| ·酶联免疫反应(ELISA)中的应用 | 第18页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因及其在基因学中的应用 | 第18-19页 |
| ·耐热乳糖酶及其研究进展 | 第19-20页 |
| ·耐热乳糖酶的来源 | 第19页 |
| ·耐热乳糖酶的应用优势 | 第19-20页 |
| ·乳糖酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第20-22页 |
| ·论文研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 耐热乳糖酶产生菌的筛选 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·样品来源 | 第24页 |
| ·实验试剂 | 第24-25页 |
| ·实验仪器与设备 | 第25页 |
| ·实验试剂配制 | 第25-26页 |
| ·溶液配制 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·乳糖酶活力的测定：ONPG法 | 第26-27页 |
| ·测定原理 | 第26页 |
| ·乳糖酶活力定义 | 第26页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第26-27页 |
| ·乳糖酶活力测定 | 第27页 |
| ·乳糖酶活力计算公式 | 第27页 |
| ·菌体浓度测定 | 第27页 |
| ·产耐热乳糖酶细菌的分离筛选 | 第27-28页 |
| ·产耐热乳糖酶菌产酶位置确定：苯胺-二苯胺法 | 第28-29页 |
| ·薄层层析步骤 | 第28页 |
| ·迁移率计算 | 第28-29页 |
| ·苯胺-二苯胺法层析条件 | 第29页 |
| ·层析样品制备 | 第29页 |
| ·产耐热乳糖酶菌株破壁方法的选择 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-35页 |
| ·邻硝基酚(ONP)标准曲线 | 第30-31页 |
| ·产耐热乳糖酶菌的分离筛选 | 第31-32页 |
| ·产耐热乳糖酶菌产酶位置的确定 | 第32-34页 |
| ·产耐热乳糖酶菌破壁方法的选择 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第三章 产耐热乳糖酶菌T242的分类鉴定 | 第36-46页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·实验仪器与设备 | 第36页 |
| ·鉴定培养基 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·形态观察 | 第37页 |
| ·菌落形态 | 第37页 |
| ·菌体形态 | 第37页 |
| ·生理生化鉴定 | 第37-38页 |
| ·需氧性试验 | 第37页 |
| ·过氧化氢酶试验 | 第37-38页 |
| ·葡萄糖产气试验 | 第38页 |
| ·葡萄糖产酸试验 | 第38页 |
| ·V.P试验 | 第38页 |
| ·淀粉水解试验 | 第38页 |
| ·耐盐性试验 | 第38页 |
| ·16S rRNA分子生物学鉴定 | 第38-40页 |
| ·变性 | 第38页 |
| ·PCR扩增16S rRNA基因 | 第38-39页 |
| ·PCR产物的回收及DNA测序 | 第39页 |
| ·产耐热乳糖酶菌T242的同源性分析及系统进化树构建 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-45页 |
| ·形态观察 | 第40-41页 |
| ·菌落形态观察 | 第40页 |
| ·个体形态观察 | 第40-41页 |
| ·生理生化鉴定 | 第41-42页 |
| ·16S rRNA分子生物学鉴定 | 第42-45页 |
| ·PCR扩增16S rRNA基因并测序 | 第42-43页 |
| ·产耐热乳糖酶菌T242的同源性分析 | 第43-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第四章 耐热乳糖酶产生菌T242发酵产酶条件的研究 | 第46-60页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·实验仪器与设备 | 第46页 |
| ·种子培养基 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·培养方法 | 第46-47页 |
| ·菌体浓度测定 | 第47页 |
| ·乳糖酶活力测定：ONPG法 | 第47页 |
| ·营养条件对产耐热乳糖酶菌株T242产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·不同碳源对菌株T242产酶的影响 | 第47页 |
| ·不同乳糖浓度对菌株T242产酶的影响 | 第47页 |
| ·不同氮源对菌株T242产酶的影响 | 第47页 |
| ·不同酵母膏、蛋白胨浓度对菌株T242产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·不同无机盐对菌株T242产酶的影响 | 第48页 |
| ·不同MgSO4浓度对菌株T242产酶的影响 | 第48页 |
| ·发酵条件对产耐热乳糖酶菌株T242产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·培养温度对菌株T242产酶的影响 | 第48页 |
| ·培养时间对菌株T242产酶的影响 | 第48页 |
| ·培养基初始pH值对菌株T242产酶的影响 | 第48页 |
| ·装液量对菌株T242产酶的影响 | 第48页 |
| ·种龄对菌株T242产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·接种量对菌株T242产酶的影响 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-59页 |
| ·营养条件对耐热乳糖酶菌株T242产酶的影响 | 第49-54页 |
| ·不同碳源对菌株T242产酶的影响 | 第49-50页 |
| ·不同乳糖浓度对菌株T242产酶的影响 | 第50页 |
| ·氮源对T242菌产酶的影响 | 第50-51页 |
| ·不同酵母膏、蛋白胨浓度对菌株T242产酶的影响 | 第51-52页 |
| ·无机盐对菌株T242产酶的影响 | 第52-53页 |
| ·不同MgSO4浓度对菌株T242产酶的影响 | 第53-54页 |
| ·发酵条件对T242菌产酶的影响 | 第54-59页 |
| ·培养温度对T242菌产酶的影响 | 第54-55页 |
| ·初始pH值对T242菌产酶的影响 | 第55-56页 |
| ·接种量对T242菌产酶的影响 | 第56-57页 |
| ·装液量对T242菌产酶的影响 | 第57页 |
| ·培养时间对T242菌产酶的影响 | 第57-58页 |
| ·种龄对T242菌产酶的影响 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第五章 T242菌株产耐热乳糖酶酶学性质研究 | 第60-73页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·实验试剂 | 第60-61页 |
| ·实验仪器与设备 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-65页 |
| ·蛋白质测定方法 | 第61-62页 |
| ·酶活力测定方法：ONPG法 | 第62页 |
| ·乳糖水解率的计算 | 第62-63页 |
| ·样品制备 | 第63页 |
| ·DEAE-52阴离子交换柱层析分离耐热乳糖酶 | 第63页 |
| ·Sephadex G-75分离纯化耐热乳糖酶 | 第63-64页 |
| ·外水、内水体积确定 | 第63页 |
| ·洗脱条件 | 第63-64页 |
| ·耐热乳糖酶分子量的测定 | 第64页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第64页 |
| ·样品的测定 | 第64页 |
| ·耐热乳糖酶的最适温度及温度稳定性 | 第64-65页 |
| ·耐热乳糖酶的最适pH值及pH稳定性 | 第65页 |
| ·金属离子稳定性 | 第65页 |
| ·乳糖酶动力学常数的测定 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-71页 |
| ·DEAE-52分离耐热乳糖酶 | 第65-66页 |
| ·Sephadex G-75分离纯化耐热乳糖酶 | 第66-68页 |
| ·外水、内水体积确定 | 第66-67页 |
| ·Sephadex G-75分离耐热乳糖酶 | 第67-68页 |
| ·耐热乳糖酶分子量的测定 | 第68页 |
| ·耐热乳糖酶的最适温度和温度稳定性 | 第68-69页 |
| ·耐热乳糖酶的最适pH值及pH稳定性 | 第69-70页 |
| ·金属离子的影响 | 第70-71页 |
| ·动力学常数的测定 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第六章 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录A | 第80页 |