| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| ·橡胶树形态学及生理学研究 | 第11-13页 |
| ·橡胶树幼态无性系的研究 | 第13-14页 |
| ·橡胶树自根幼态无性系的研究 | 第14-15页 |
| ·表观遗传及DNA甲基化 | 第15-22页 |
| ·DNA甲基化的功能 | 第16-17页 |
| ·DNA甲基化生物化学 | 第17-18页 |
| ·树木生长发育和老化时的DNA甲基化 | 第18页 |
| ·DNA甲基化对开花和阶段发育的调控 | 第18-19页 |
| ·DNA甲基化控制休眠 | 第19页 |
| ·微繁和体细胞变异 | 第19-20页 |
| ·DNA甲基化研究方法 | 第20-22页 |
| ·抑制差减杂交技术 | 第22-24页 |
| ·SSH技术原理 | 第23页 |
| ·SSH的特点 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 橡胶树体细胞胚发生过程中DNA甲基化变化 | 第26-49页 |
| ·植物材料 | 第26-27页 |
| ·质粒及菌种 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-38页 |
| ·各种组织材料基因组DNA的提取与纯化 | 第27-29页 |
| ·甲基化敏感性扩增片段长度多态性(MSAP)分析 | 第29页 |
| ·预扩增 | 第29-30页 |
| ·选择性扩增 | 第30页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·银染检测 | 第31页 |
| ·多态性甲基化片段的回收、测序及分析 | 第31-32页 |
| ·目的片段的克隆及其重组子筛选 | 第32-35页 |
| ·Southern杂交分析 | 第35-38页 |
| ·数据分析 | 第38页 |
| ·结果分析 | 第38-45页 |
| ·橡胶树体细胞胚发生过程中各组织材料基因组DNA的提取 | 第38-39页 |
| ·橡胶树体细胞胚发生过程中各组织材料DNA的双酶切 | 第39页 |
| ·橡胶树体细胞胚发生过程的组织特异性甲基化分析 | 第39-43页 |
| ·甲基化多态性片段的验证 | 第43-44页 |
| ·甲基化片段序列分析 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-49页 |
| ·MSAP方法的可行性 | 第45页 |
| ·甲基化模式的形成及变化关系 | 第45-47页 |
| ·甲基化模式和形态发生 | 第47页 |
| ·甲基化模式鉴定及组织特异性甲基化序列分析 | 第47-49页 |
| 第三章 橡胶树自根幼态和老态无性系胶乳中基因的差异表达分析 | 第49-70页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·质粒及菌种 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-59页 |
| ·胶乳Total RNA的提取 | 第50页 |
| ·RNA电泳检测 | 第50-51页 |
| ·mRNA的纯化 | 第51页 |
| ·橡胶树自根幼态无性系和老态无性系胶乳的差减cDNA文库构建 | 第51-56页 |
| ·差减文库的构建及重组子的筛选 | 第56-58页 |
| ·Reverse Northern Dot-Blot筛选鉴定阳性差异片段 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-65页 |
| ·橡胶树胶乳Total RNA的提取结果 | 第59页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切结果 | 第59-60页 |
| ·PCR扩增结果分析 | 第60-61页 |
| ·差减cDNA文库重组子的筛选 | 第61页 |
| ·Reverse Northern Dot-Blot鉴定结果 | 第61-62页 |
| ·Semi-quantitative RT-PCR分析 | 第62页 |
| ·Reverse Northern Dot-Blot中部分阳性克隆的测序分析与同源性比较 | 第62-65页 |
| ·cDNA的功能分类 | 第65页 |
| ·讨论 | 第65-70页 |
| ·SSH法构建幼态与老态胶乳差减cDNA文库 | 第65-67页 |
| ·基于SSH方法所得结果的可靠性 | 第67页 |
| ·部分差异基因片段的序列分析及功能预测 | 第67-70页 |
| 第四章 差异片段全长cDNA克隆及其表达分析 | 第70-93页 |
| ·材料及其处理 | 第70页 |
| ·材料 | 第70页 |
| ·采样方法 | 第70页 |
| ·试剂 | 第70页 |
| ·方法 | 第70-76页 |
| ·橡胶树胶乳RNA的提取 | 第70-71页 |
| ·橡胶树花、愈伤组织、体细胞胚、叶、芽RNA的提取 | 第71页 |
| ·橡胶树胶乳5'RACE、3'RACE第一链cDNA合成 | 第71-72页 |
| ·RACE引物设计 | 第72页 |
| ·cDNA末端的快速扩增5’端和3’端 | 第72-73页 |
| ·RACE产物的克隆及重组子筛选 | 第73-74页 |
| ·全长cDNA序列的获得 | 第74-75页 |
| ·RT-PCR分析第一链cDNA合成 | 第75页 |
| ·RT-PCR引物的设计 | 第75-76页 |
| ·指数增长期的确定 | 第76页 |
| ·RT-PCR分析 | 第76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-93页 |
| ·HbHDT1基因的克隆及表达分析 | 第76-80页 |
| ·HbSKP1基因的克隆及表达分析 | 第80-84页 |
| ·HbCC基因的克隆及表达分析 | 第84-89页 |
| ·Hb14-3-3基因的克隆及表达分析 | 第89-93页 |
| 结论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
