| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-42页 |
| 一、橡胶树组织培养研究进展 | 第12-27页 |
| 1.橡胶树不同外植体的体胚发生 | 第12-23页 |
| ·花药 | 第12-16页 |
| ·内珠被 | 第16-19页 |
| ·易碎胚性愈伤组织 | 第19-21页 |
| ·树根 | 第21-22页 |
| ·子叶 | 第22页 |
| ·原生质体培养 | 第22-23页 |
| 2.大规模体胚植株繁育 | 第23-25页 |
| ·悬浮培养 | 第23-24页 |
| ·次生体胚发生 | 第24-25页 |
| 3.体胚植株大田表现 | 第25-27页 |
| 二、橡胶树遗传转化研究进展 | 第27-36页 |
| 1.国内外橡胶树遗传转化研究概况 | 第27-29页 |
| ·基因枪法 | 第27页 |
| ·农杆菌介导法 | 第27-29页 |
| 2.影响橡胶树遗传转化效率的因素 | 第29-31页 |
| ·钙离子 | 第29-30页 |
| ·农杆菌菌株 | 第30-31页 |
| ·共培养温度 | 第31页 |
| 3.橡胶树遗传转化的目的基因 | 第31-35页 |
| ·重要经济价值的外源蛋白基因 | 第31-32页 |
| ·抗死皮基因 | 第32-33页 |
| ·矮化基因 | 第33页 |
| ·天然橡胶合成相关基因 | 第33-35页 |
| ·抗逆相关基因 | 第35页 |
| 4.存在主要问题 | 第35-36页 |
| 三、CBF1基因及转基因研究进展 | 第36-40页 |
| 1.CBF1基因研究概况 | 第36-37页 |
| 2.橡胶树CBF1基因研究进展 | 第37页 |
| 3.植物转基因抗寒研究进展 | 第37-39页 |
| 4.橡胶树抗寒研究进展 | 第39-40页 |
| 四、本研究的目的和意义 | 第40页 |
| 五、研究思路 | 第40-42页 |
| 第二章 农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系的建立 | 第42-75页 |
| 一、材料和方法 | 第42-55页 |
| 1.材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·质粒 | 第42-43页 |
| ·抗生素 | 第43页 |
| 2.方法 | 第43-55页 |
| ·适宜转化受体的选择 | 第43-44页 |
| ·橡胶树花药高体细胞胚胎发生能力基因型的筛选 | 第44页 |
| ·农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系的建立 | 第44-55页 |
| 二、结果和分析 | 第55-70页 |
| 1.适宜转化受体的选择 | 第55页 |
| 2.橡胶树花药高体细胞胚胎发生能力基因型的筛选 | 第55-58页 |
| ·不同基因型橡胶树花药愈伤组织诱导 | 第56页 |
| ·不同基因型橡胶树花药体细胞胚胎发生 | 第56-58页 |
| 3.农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系的建立 | 第58-70页 |
| ·抑菌抗生素对花药愈伤组织生长量和体胚发生的影响 | 第58页 |
| ·筛选抗生素对花药愈伤组织生长量和体胚发生的影响 | 第58-59页 |
| ·不同处理对GUS瞬时表达的影响 | 第59-61页 |
| ·转化植株获得及其PCR鉴定 | 第61-62页 |
| ·转化植株的PCR产物测序 | 第62-66页 |
| ·转化植株的SOUTHERN检测 | 第66-67页 |
| ·转化植株的NORTHERN检测 | 第67-68页 |
| ·转化植株的繁殖及移栽 | 第68-70页 |
| 三、讨论 | 第70-75页 |
| 1.适宜转化受体的选择 | 第70页 |
| 2.橡胶树花药高体细胞胚胎发生能力基因型的筛选 | 第70-71页 |
| 3.适宜的抗生素种类及浓度 | 第71-72页 |
| 4.农杆菌介导橡胶树遗传转化体系建立 | 第72-73页 |
| 5.转基因植株移栽 | 第73页 |
| 6.橡胶树农杆菌介导遗传转化效率影响因素 | 第73-75页 |
| 第三章 遗传转化体系的验证:拟南芥转录激活因子CBF1转化橡胶树的研究 | 第75-84页 |
| 一、材料与方法 | 第75-77页 |
| 1.材料 | 第75页 |
| ·植物材料 | 第75页 |
| ·质粒 | 第75页 |
| 2.方法 | 第75-77页 |
| ·电击转化法将质粒PCAMBIA2301-CBF1导入EHA105 | 第75-76页 |
| ·遗传转化方法及GUS染色 | 第76页 |
| ·转基因植株的PCR检测及PCR产物序列分析 | 第76-77页 |
| 二、结果与分析 | 第77-82页 |
| 1.转基因植株的获得及GUS染色 | 第77-78页 |
| 2.转基因植株的PCR检测 | 第78页 |
| 3.转基因植株的PCR产物测序 | 第78-81页 |
| 4.转基因植株的增殖及移栽 | 第81-82页 |
| 三、讨论 | 第82-84页 |
| 1.遗传转化体系的验证 | 第82页 |
| 2.转录因子CBF基因在植物基因抗逆育种中的应用潜力 | 第82-83页 |
| 3.转CBF1基因橡胶树发育正常 | 第83-84页 |
| 第四章 结论 | 第84-86页 |
| 一、本研究的主要结论 | 第84-85页 |
| 二、本研究的创新之处 | 第85-86页 |
| 第五章 展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-99页 |
| 图版 | 第99-104页 |
| 附录 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
