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多聚唾液酸化的神经细胞粘附分子对1d1D细胞生长及迁移的影响

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-15页
   ·糖生物学简介第8-9页
   ·神经细胞粘附分子第9-11页
   ·多聚唾液酸和多聚唾液酸转移酶第11-12页
   ·ldlD 细胞简介第12-13页
   ·立题依据及意义第13页
   ·本论文的主要研究内容第13-15页
第二章 材料与方法第15-25页
   ·实验材料第15-17页
     ·菌株、细胞株与质粒第15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·主要仪器第16-17页
   ·实验方法第17-25页
     ·引物设计和目的基因的扩增第17-19页
     ·NCAM-140、STX 及 PST 真核表达载体的构建第19页
     ·细胞培养第19-20页
     ·细胞转染及阳性单克隆的筛选第20页
     ·Western blotting第20-21页
     ·Western blotting 检测糖链修饰后的 NCAM第21页
     ·甲苯胺蓝染色第21页
     ·实时荧光定量 PCR第21-22页
     ·凝集素细胞染色第22页
     ·免疫荧光技术第22页
     ·流式细胞检测第22-23页
     ·细胞增殖实验(MTT 法)第23页
     ·细胞迁移实验(胶体金法)第23页
     ·糖链的提取及质谱分析第23-25页
第三章 结果与讨论第25-37页
   ·NCAM-140、STX 及 PST 基因表达载体的构建第25-26页
     ·目的基因的 PCR 扩增第25页
     ·真核表达载体的酶切验证第25-26页
   ·过表达 NCAM-140 对 ldlD 细胞的影响及细胞糖链的检测第26-33页
     ·ldlD-14 细胞中过表达 NCAM-140 稳定转染细胞株的筛选第26页
     ·NCAM-140 在不同浓度的 Gal 处理下糖链的变化第26-27页
     ·过表达 NCAM-140 对 ldlD-14 细胞形态的影响第27-28页
     ·凝集素荧光染色检测稳定转染细胞株的糖链完整性第28-29页
     ·ldlD-14/N-140 细胞 NCAM-140 的免疫荧光检测第29-30页
     ·ldlD-14/N-140 细胞 N-聚糖的质谱分析第30-31页
     ·过表达 NCAM-140 促进细胞的增殖第31-32页
     ·过表达 NCAM-140 增加细胞的迁移第32-33页
   ·过表达 STX 和 PST 细胞株的筛选及其对细胞的影响第33-37页
     ·STX 和 PST 的 mRNA 水平检测第33页
     ·STX 和 PST 蛋白的过表达检测第33-34页
     ·过表达 STX 和 PST 增加了 NCAM 的 PSA 化第34页
     ·PSA-NCAM 促进细胞的增殖第34-35页
     ·PSA-NCAM 增加细胞的迁移能力第35-37页
主要结论与展望第37-39页
 主要结论第37页
 展望第37-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-44页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第44页

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