摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-15页 |
·糖生物学简介 | 第8-9页 |
·神经细胞粘附分子 | 第9-11页 |
·多聚唾液酸和多聚唾液酸转移酶 | 第11-12页 |
·ldlD 细胞简介 | 第12-13页 |
·立题依据及意义 | 第13页 |
·本论文的主要研究内容 | 第13-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-25页 |
·实验材料 | 第15-17页 |
·菌株、细胞株与质粒 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-25页 |
·引物设计和目的基因的扩增 | 第17-19页 |
·NCAM-140、STX 及 PST 真核表达载体的构建 | 第19页 |
·细胞培养 | 第19-20页 |
·细胞转染及阳性单克隆的筛选 | 第20页 |
·Western blotting | 第20-21页 |
·Western blotting 检测糖链修饰后的 NCAM | 第21页 |
·甲苯胺蓝染色 | 第21页 |
·实时荧光定量 PCR | 第21-22页 |
·凝集素细胞染色 | 第22页 |
·免疫荧光技术 | 第22页 |
·流式细胞检测 | 第22-23页 |
·细胞增殖实验(MTT 法) | 第23页 |
·细胞迁移实验(胶体金法) | 第23页 |
·糖链的提取及质谱分析 | 第23-25页 |
第三章 结果与讨论 | 第25-37页 |
·NCAM-140、STX 及 PST 基因表达载体的构建 | 第25-26页 |
·目的基因的 PCR 扩增 | 第25页 |
·真核表达载体的酶切验证 | 第25-26页 |
·过表达 NCAM-140 对 ldlD 细胞的影响及细胞糖链的检测 | 第26-33页 |
·ldlD-14 细胞中过表达 NCAM-140 稳定转染细胞株的筛选 | 第26页 |
·NCAM-140 在不同浓度的 Gal 处理下糖链的变化 | 第26-27页 |
·过表达 NCAM-140 对 ldlD-14 细胞形态的影响 | 第27-28页 |
·凝集素荧光染色检测稳定转染细胞株的糖链完整性 | 第28-29页 |
·ldlD-14/N-140 细胞 NCAM-140 的免疫荧光检测 | 第29-30页 |
·ldlD-14/N-140 细胞 N-聚糖的质谱分析 | 第30-31页 |
·过表达 NCAM-140 促进细胞的增殖 | 第31-32页 |
·过表达 NCAM-140 增加细胞的迁移 | 第32-33页 |
·过表达 STX 和 PST 细胞株的筛选及其对细胞的影响 | 第33-37页 |
·STX 和 PST 的 mRNA 水平检测 | 第33页 |
·STX 和 PST 蛋白的过表达检测 | 第33-34页 |
·过表达 STX 和 PST 增加了 NCAM 的 PSA 化 | 第34页 |
·PSA-NCAM 促进细胞的增殖 | 第34-35页 |
·PSA-NCAM 增加细胞的迁移能力 | 第35-37页 |
主要结论与展望 | 第37-39页 |
主要结论 | 第37页 |
展望 | 第37-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |