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单核细胞增生性李斯特菌磷脂酶C的克隆表达及其在油脂脱胶中的应用研究

中英文缩写词对照表第1-4页
摘要第4-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-16页
   ·微生物来源的磷脂酶C第9-12页
     ·磷脂酶 C 简介第9页
     ·微生物来源磷脂酶 C 的国内外研究进展第9-10页
     ·微生物来源磷脂酶 C 应用研究第10-11页
     ·单核细胞增生性李斯特菌磷脂酶 C第11-12页
   ·磷脂酶C酶法脱胶第12-15页
     ·磷脂酶 C 酶法脱胶的优点第12-13页
     ·磷脂酶 C 酶法脱胶的意义第13页
     ·磷脂酶 C 酶法脱胶研究现状第13-15页
   ·本课题的立题依据与意义第15页
   ·本课题的主要内容与研究思路第15-16页
2 材料与方法第16-23页
   ·实验材料第16-17页
     ·菌株和质粒第16页
     ·主要工具酶和试剂第16页
     ·培养基第16页
     ·仪器设备第16-17页
     ·其他原料第17页
   ·实验方法第17-23页
     ·L.monocytogenes 基因组 DNA 的提取第17-18页
     ·L.monocytogenes 的 lm-plcB 基因克隆第18页
     ·E.coil (JM109)感受态的制备及转化第18页
     ·E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB 的构建第18-19页
     ·E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB 的诱导表达第19页
     ·E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB 诱导条件的优化第19-20页
     ·重组 PLC 的纯化第20-21页
     ·重组 PLC 的酶学性质研究第21-22页
     ·重组 PLC 的脱胶应用第22-23页
3 结果与讨论第23-45页
   ·PLC在大肠杆菌中的克隆表达第23-25页
     ·lm-plcB 基因的克隆第23页
     ·重组表达载体 pET28a-lm-plcB 的构建与鉴定第23-25页
   ·E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB的诱导表达第25-27页
     ·重组 PLC 的 SDS-PAGE 分析第25-26页
     ·重组 PLC 的硼砂卵黄固体平板分析第26-27页
   ·E.coil BL21(DE3)/pET28a-lm-plcB诱导条件的初步优化第27-31页
     ·重组 PLC 的酶活力测定第27页
     ·诱导接种量的确定第27-28页
     ·诱导剂添加时间的确定第28页
     ·诱导温度的确定第28-29页
     ·诱导剂浓度的确定第29-30页
     ·诱导时间的确定第30-31页
   ·重组PLC的纯化第31-32页
   ·重组PLC酶学性质测定第32-40页
     ·最适温度和热稳定性第32-34页
     ·最适 pH 和 pH 稳定性第34-35页
     ·金属离子对 PLC 活性的影响第35页
     ·重组 PLC 的底物特异性研究第35-39页
     ·关于 PLC 酶活力测定方法的讨论第39-40页
   ·重组PLC的脱胶应用第40-45页
     ·重组 PLC 的脱胶第40页
     ·重组 PLC 的脱胶工艺优化第40-43页
     ·PLC 酶法脱胶对大豆毛油精炼得率的影响第43-45页
主要结论与展望第45-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-52页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第52页

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