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蓝舌病病毒反向遗传操作系统的建立

目录第1-6页
CONTENTS第6-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-13页
1 引言第13-31页
   ·蓝舌病概述第13-25页
     ·蓝舌病的历史与现状第13-14页
     ·蓝舌病的流行病学特性第14-15页
     ·蓝舌病临床症状与病理变化第15-16页
     ·蓝舌病病毒第16-20页
     ·蓝舌病的实验室诊断第20-23页
     ·蓝舌病疫苗的研究进展第23-25页
   ·动物RNA病毒反向遗传技术发展概况第25-27页
   ·呼肠孤病毒科病毒反向遗传技术研究进展第27-29页
     ·哺乳动物正呼肠孤病毒的反向遗传操作系统第28页
     ·蓝舌病病毒的反向遗传操作系统第28页
     ·非洲马瘟病毒的反向遗传操作系统第28-29页
     ·轮状病毒的反向遗传技术研究第29页
   ·本研究的目的与意义第29-31页
2 材料与方法第31-48页
   ·材料第31-33页
     ·病毒、质粒、菌株与细胞第31页
     ·单克隆抗体第31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要仪器和设备第31-32页
     ·主要溶液配制第32-33页
   ·方法第33-48页
     ·血清1型蓝舌病病毒SZ97/1株的增殖第33页
     ·血清1型蓝舌病病毒SZ97/1株的RNA提取与纯化第33-34页
     ·血清1型蓝舌病病毒SZ97/1株的全基因测序与VP2基因序列分析第34-37页
     ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统7个蛋白辅助质粒的构建第37-40页
     ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统体外转录载体的构建第40-42页
     ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统10个体外转录质粒的构建第42-44页
     ·蓝舌病病毒10个基因节段RNA的体外转录与纯化第44-45页
     ·蓝舌病病毒的拯救与鉴定第45-48页
3 结果与分析第48-60页
   ·病毒RNA的SDS-PAGE电泳鉴定第48页
   ·血清1型蓝舌病病毒SZ97/1株的全基因测序与VP2基因序列分析第48-51页
     ·应用全长cDNA扩增法对病毒基因的PCR扩增结果第48-49页
     ·病毒全基因的序列测定结果第49-50页
     ·VP2基因序列同源性分析结果第50-51页
   ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统7个蛋白辅助质粒的构建第51-53页
   ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统体外转录载体的构建第53页
   ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统10个体外转录质粒的构建第53-55页
     ·目的基因的扩增第53-54页
     ·质粒的构建第54-55页
   ·蓝舌病病毒10个基因节段RNA的体外转录与纯化第55-56页
   ·蓝舌病病毒的拯救与鉴定第56-60页
     ·病毒的拯救第56-57页
     ·拯救病毒的间接免疫荧光鉴定第57页
     ·拯救病毒的电镜观察第57-58页
     ·拯救病毒的分子标签鉴定第58-59页
     ·拯救病毒生长曲线测定第59-60页
4 讨论第60-65页
   ·蓝舌病病毒的全基因克隆与测序第60-61页
     ·蓝舌病病毒的全基因测序方法第60-61页
     ·我国蓝舌病病毒的全基因测序第61页
   ·蓝舌病病毒的拯救方法的选择第61-62页
   ·体外转录载体的构建第62页
   ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统第62-63页
     ·蓝舌病病毒反向遗传操作系统辅助质粒的选择第62-63页
     ·转染使用细胞系的选择第63页
     ·辅助质粒与体外转录RNA的转染第63页
   ·蓝舌病病毒分子标签的引入第63-65页
5 结论第65-66页
致谢第66-67页
参考文献第67-78页
附录第78-86页
攻读博士学位期间发表的学术论文第86页

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