| 目录 | 第1-7页 |
| CONTENTS | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-29页 |
| ·研究的目的和意义 | 第14页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第14-15页 |
| ·国内外研究动态与趋势 | 第15-26页 |
| ·植物的抗病性机制 | 第15-16页 |
| ·植物抗病的组成型防御系统 | 第16-17页 |
| ·植物的诱导型防御系统 | 第17页 |
| ·植物系统获得抗性 | 第17-18页 |
| ·植物的抗病中的ROS机制 | 第18-19页 |
| ·植物的抗病中的Ca~(2+)机制 | 第19页 |
| ·植物的抗病中的HR机制 | 第19-20页 |
| ·植物的抗病中的HSP机制 | 第20页 |
| ·植物的抗病中的蛋白质泛素化机制 | 第20页 |
| ·拟南芥抗霜霉病研究进展 | 第20-22页 |
| ·病原物的毒性策略 | 第22-25页 |
| ·黄瓜抗霜霉病研究进展 | 第25-26页 |
| ·本试验用到的技术原理及特点 | 第26-29页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH) | 第26-27页 |
| ·比较基因组学 | 第27页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第27-28页 |
| ·RNAi基因干扰 | 第28页 |
| ·转录组测序 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·不同黄瓜基因型抗霜霉病鉴定 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·病原菌 | 第29页 |
| ·子叶点滴接种鉴定 | 第29-30页 |
| ·田间评价 | 第30页 |
| ·不同黄瓜品种接种霜霉病菌后基因表达谱差异分析 | 第30-32页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-32页 |
| ·利用SSH技术鉴定黄瓜抗霜霉病相关基因 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·处理方法 | 第32页 |
| ·mRNA的分离和提取 | 第32页 |
| ·SSH cDNA文库的构建 | 第32页 |
| ·差减文库生成 | 第32-33页 |
| ·反向Northern blot鉴定阳性克隆 | 第33页 |
| ·差异表达基因的测序及序列分析 | 第33页 |
| ·黄瓜基因组中抗霜霉病候选基因的生物信息学分析及其组织表达特异性分析 | 第33-37页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·处理方法 | 第33-34页 |
| ·黄瓜抗霜霉病候选基因的鉴定和PCR引物的设计 | 第34-35页 |
| ·总RNA的提取和RT-PCR | 第35页 |
| ·候选R基因在抗病和感病自交系叶片中表达实时荧光定量RT-PCR分析 | 第35-37页 |
| ·利用RNAi验证基于候选R基因在黄瓜抗霜霉病中的功能 | 第37-40页 |
| ·dsRNAi干扰载体的构建 | 第37-39页 |
| ·dsRNAi干扰载体的遗传转化 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-77页 |
| ·不同黄瓜基因型抗霜霉病鉴定 | 第40页 |
| ·不同黄瓜品种接种霜霉病菌后基因表达谱差异分析 | 第40-57页 |
| ·Solexa测序结果评估 | 第40-44页 |
| ·数据分析结果 | 第44-57页 |
| ·利用SSH技术鉴定黄瓜抗霜霉病相关基因 | 第57-66页 |
| ·总RNA的提取及mRNA的分离纯化 | 第57-58页 |
| ·差异表达cDNA文库的建立 | 第58页 |
| ·反向Northern blot鉴定阳性克隆 | 第58-59页 |
| ·Est序列 | 第59-62页 |
| ·cDNA差异表达文库序列分析 | 第62-63页 |
| ·SSH-EST相关热激蛋白家族进化分析 | 第63-66页 |
| ·小热激蛋白和谷胱甘肽比较 | 第66页 |
| ·黄瓜基因组中抗霜霉病候选基因的生物信息学分析及其组织表达特异性分析 | 第66-73页 |
| ·黄瓜抗霜霉病候选基因的获得和结构分析 | 第66-68页 |
| ·黄瓜抗霜霉病候选基因的进化树 | 第68-70页 |
| ·RT-PCT验证 | 第70页 |
| ·Csa001907和Csa002921在抗病和感病自交系叶片中的表达分析 | 第70-73页 |
| ·利用RNAi验证Csa002921在黄瓜抗霜霉病中的功能 | 第73-77页 |
| ·植物干涉表达载体pJawoh18-CSa002921的构建 | 第73-74页 |
| ·RNAi目的序列的获得 | 第74页 |
| ·BP反应 | 第74-75页 |
| ·LR反应 | 第75-76页 |
| ·干涉载体转化农杆菌 | 第76页 |
| ·黄瓜干扰载体转基因再生植株的获得 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-83页 |
| ·黄瓜抗霜霉病过程中的R基因的识别机制 | 第77-79页 |
| ·黄瓜抗霜霉病过程中的系统获得抗性(SAR) | 第79-80页 |
| ·黄瓜抗霜霉病综合机制 | 第80页 |
| ·本研究对于黄瓜抗霜霉病育种的启示 | 第80页 |
| ·本论文的创新之处 | 第80-82页 |
| ·下一步工作的设想 | 第82-83页 |
| 5 结论 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 附录 | 第95-99页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第99页 |
