| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1. 前言 | 第10-19页 |
| ·香蕉枯萎病概况 | 第10-11页 |
| ·转化丝状真菌的方法 | 第11-16页 |
| ·基因枪转化 | 第11-12页 |
| ·RNA干扰 | 第12页 |
| ·原生质体转化法 | 第12-13页 |
| ·同源重组技术 | 第13-14页 |
| ·农杆菌转化法 | 第14-15页 |
| ·电穿孔法 | 第15-16页 |
| ·限制性内切酶介导转化法 | 第16页 |
| ·研究的目的意义 | 第16-17页 |
| ·研究技术路线 | 第17-19页 |
| ·香蕉枯萎病菌4号生理小种T-DNA插入突变技术路线 | 第17-18页 |
| ·香蕉枯萎病菌4号生理小种Focr4-1422的致病相关基因的敲除和敲除突变体△Focr4-1422生物学特性研究技术路线 | 第18-19页 |
| 2. 香蕉枯萎病菌4号生理小种T-DNA插入突变 | 第19-38页 |
| ·材料 | 第19-22页 |
| ·供试质粒 | 第19-20页 |
| ·供试香蕉枯萎病病菌 | 第20页 |
| ·供试香蕉苗和香蕉叶片 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·引物合成 | 第21页 |
| ·生化试剂及配制 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·香蕉枯萎病菌4号小种的T-DNA插入 | 第22-23页 |
| ·香蕉枯萎病菌4号小种ATMT转化子的分析 | 第23-25页 |
| ·致病性丧失突变体Focr4-4001的生物学特性 | 第25-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-36页 |
| ·香蕉枯萎病菌4号生理小种遗传转化的结果 | 第27-28页 |
| ·香蕉枯萎病菌4号小种致病突变体的分析 | 第28-30页 |
| ·致病性丧失突变体Focr4-001生物学特性 | 第30-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·关于香蕉枯萎病菌T-DNA插入突变体筛选测定方法的讨论 | 第36页 |
| ·致病性丧失突变体Focr4-193-4001菌株与野生型菌株Focr4-193在生物学特性上的比较分析 | 第36-37页 |
| ·有待进一步研究的问题 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| ·扩建了香蕉枯萎病菌4号小种T-DNA插入突变体库 | 第37页 |
| ·优化了一种香蕉枯萎病菌致病性突变体筛选的测定方法 | 第37页 |
| ·获得了一株对巴西蕉致病性丧失的菌株 | 第37页 |
| ·比较了致病性丧失突变体Focr4-4001野生型菌株Focr4-193在部分生物学特性方面的差异性 | 第37-38页 |
| 3 香蕉枯萎病菌4号生理小种致病性丧失突变体Focr4-1422的致病相关基因研究 | 第38-58页 |
| ·材料、试剂和仪器 | 第38-40页 |
| ·菌株和质粒 | 第38页 |
| ·供试巴西蕉苗和巴西蕉叶片 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·引物 | 第39-40页 |
| ·研究方法 | 第40-44页 |
| ·敲除载体构建 | 第40页 |
| ·原生质体的制备和转化 | 第40-41页 |
| ·转化子的筛选 | 第41页 |
| ·转化子的分子验证 | 第41-42页 |
| ·突变体△Focr4-1422遗传稳定性 | 第42页 |
| ·突变体的生物学特性 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-56页 |
| ·敲除载体的获得 | 第44页 |
| ·转化子的筛选 | 第44页 |
| ·转化子的分子验证 | 第44-45页 |
| ·敲除突变体△Focr4-1422遗传稳定性 | 第45页 |
| ·敲除突变体△Focr4-1422与插入突变体Focr4-1422的生物学特性 | 第45-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·关于载体构建方法 | 第56页 |
| ·敲除子△Focr4-1422与插入突变体Focr4-1422致病性测定结果比较分析 | 第56页 |
| ·带有GFP标记的敲除子致病性检测 | 第56-57页 |
| ·敲除子、插入突变体与野生型菌株生物学特性比较分析 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| ·有待进一步解决的问题 | 第58页 |
| 4 结论 | 第58-60页 |
| ·扩建了香蕉枯萎病菌4号小种T-DNA插入突变体库 | 第58页 |
| ·优化了一种香蕉枯萎病菌致病性突变体筛选的测定方法 | 第58页 |
| ·获得了一株对巴西蕉致病性丧失的菌株 | 第58页 |
| ·比较了致病性丧失突变体Focr4-4001野生型菌株Focr4-193在部分生物学特性方面的差异性 | 第58-59页 |
| ·同源重组获得了一个带有潮霉素抗性和GFP标记蛋白的敲除子△Focr4-1422 | 第59页 |
| ·确定了致病性丧失敲除子△Focr4-1422,致病性丧失插入突变体Focr4-1422与野生型菌株193在部分生物学特性方面的差异性 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
