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仙鹤草内生真菌活性菌株的分离筛选及其与宿主相互作用的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 绪论第13-21页
   ·植物内生真菌的定义与活性研究现状第13-16页
     ·植物内生真菌抗氧化活性的研究进展第14-15页
     ·植物内生真菌抗肿瘤活性的研究进展第15-16页
   ·药用植物内生真菌与宿主相互作用研究进展第16-17页
     ·促进有效成分的生成与积累第16页
     ·促进生长发育第16-17页
     ·增强抗逆性第17页
   ·微生物对黄酮类成分的生物转化研究进展第17-18页
   ·仙鹤草及其内生真菌的研究进展第18-19页
     ·仙鹤草第18-19页
     ·仙鹤草内生真菌的研究进展第19页
   ·本课题选题及研究意义第19-21页
第二章 不同产地仙鹤草内生真菌的分离及活性菌株筛选第21-36页
   ·实验部分第21-24页
     ·实验仪器及材料第21页
     ·仙鹤草内生真菌的分离与纯化第21-22页
       ·仙鹤草内生菌株的形态学鉴定第22页
     ·内生真菌的发酵培养与样品制备第22-23页
       ·DPPH法测定抗氧化活性第22页
       ·FRAP法测定总抗氧化能力第22-23页
     ·细胞培养第23页
     ·MTT法测定抗肿瘤活性第23页
     ·仙鹤草总酚粗提液制备第23页
     ·内生真菌对仙鹤草多酚积累的影响第23-24页
     ·活性菌株分子生物学鉴定第24页
       ·基因组提取第24页
       ·序列比较及发育树构建第24页
   ·结果与分析第24-35页
     ·不同产地仙鹤草内生真菌的种类与分布第24-25页
     ·内生真菌菌株发酵产物的抗氧化活性研究第25-29页
       ·内生真菌菌株发酵产物对DPPH自由基的清除作用第25-27页
       ·FRAP法测定内生菌株发酵产物的抗氧化活性第27-29页
     ·仙鹤草内生真菌发酵产物的抗肿瘤活性第29-31页
       ·仙鹤草内生真菌发酵产物对SGC细胞生长的影响第29-30页
       ·不同浓度内生真菌发酵产物对SGC细胞生长的影响第30页
       ·仙鹤草内生真菌发酵产物对LOVO细胞生长的影响第30-31页
     ·影响仙鹤草多酚类积累的活性菌株筛选第31-33页
     ·活性菌株分子生物学鉴定第33-35页
       ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳第33页
       ·序列测定结果第33-34页
       ·BLAST同源性比较第34页
       ·系统发育树的构建第34-35页
   ·讨论第35-36页
第三章 仙鹤草内生真菌对宿主活性成分累积的影响第36-54页
   ·实验部分第36-40页
     ·实验材料与仪器第36页
     ·仙鹤草组配苗的培养第36-37页
       ·培养基第36-37页
       ·外植体的培养第37页
     ·组培苗共生菌株的筛选第37页
     ·人工接种组培苗的内生真菌再分离第37页
     ·内生菌株对宿主碳素吸收的影响第37-38页
     ·供试品溶液的制备第38页
     ·活性成分含量比色测定第38-39页
       ·Folin-Ciocalteu法测定总酚含量第38页
       ·硝酸铝比色法测定总黄酮第38-39页
       ·DNS法测定总多糖第39页
       ·香草醛-高氯酸比色法测定总皂苷第39页
     ·液相色谱测定第39-40页
       ·芦丁的测定第39-40页
       ·没食子酸的测定第40页
       ·木犀草素的测定第40页
   ·结果与分析第40-52页
     ·仙鹤草组培苗共生内生真菌的筛选第40-42页
       ·共生菌株的分子鉴定第41-42页
       ·共生后内生真菌的再分离第42页
     ·内生菌株对宿主碳素吸收的影响第42-43页
     ·仙鹤草内生菌株对宿主总酚物质积累的影响第43-44页
     ·仙鹤草内生菌株对宿主总黄酮物质积累的影响第44-46页
     ·仙鹤草内生菌株对宿主总多糖物质积累的影响第46-47页
     ·仙鹤草内生菌株对宿主总皂苷物质积累的影响第47-49页
     ·内生真菌侵染对宿主芦丁、木犀草素及没食子酸含量的影响第49-52页
       ·HPLC法对3种活性成分含量的测定第49-50页
       ·内生菌株对组培苗中芦丁积累的影响第50-51页
       ·内生菌株对组培苗木犀草素积累的影响第51-52页
       ·内生菌株对组培苗中没食子酸积累的影响第52页
   ·讨论第52-54页
第四章 仙鹤草内生真菌对宿主黄酮类物质的转化第54-66页
   ·实验部分第54-55页
     ·实验试剂及仪器第54页
     ·培养基第54页
     ·内生菌株的培养第54页
     ·空白对照制备第54-55页
     ·转化试验第55页
     ·HPLC法测定底物含量第55页
       ·芦丁含量的测定第55页
       ·槲皮素含量的测定第55页
       ·木犀草素含量的测定第55页
   ·结果与分析第55-64页
     ·仙鹤草内生菌株对芦丁的生物转化第55-59页
       ·标准曲线的绘制第55-56页
       ·内生真菌菌株对芦丁的转化率测定第56-59页
     ·仙鹤草内生真菌菌株对槲皮素的生物转化第59-62页
       ·标准曲线的绘制第59-60页
       ·槲皮素浓度及转化率测定第60-62页
     ·仙鹤草内生真菌菌株对木犀草素的生物转化第62-64页
       ·标准曲线的绘制第62-63页
       ·木犀草素浓度及转化率测定第63-64页
   ·讨论第64-66页
第五章 结论与展望第66-67页
参考文献第67-73页
附录第73-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间参加的科研项目和成果第75页

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