| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 常用缩略语中英文对照表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·抗病基因研究 | 第12-20页 |
| ·基因对基因假说 | 第12-14页 |
| ·已克隆的植物抗病基因 | 第14-18页 |
| ·植物抗病相关基因的克隆方法 | 第18-20页 |
| ·棉花枯萎病研究进展 | 第20-25页 |
| ·棉花枯萎病的分布与危害 | 第20-21页 |
| ·棉花枯萎病菌的类型及生理小种 | 第21-22页 |
| ·棉花对枯萎病的抗性机理 | 第22-23页 |
| ·棉花枯萎病致病机理 | 第23页 |
| ·棉花枯萎病抗性遗传研究 | 第23-25页 |
| ·RGA 的研究进展 | 第25-27页 |
| ·作为一种新型的分子标记构建遗传图谱 | 第26页 |
| ·用于基因定位 | 第26-27页 |
| ·本研究要解决的问题 | 第27-28页 |
| 第二章 RGA 标记的开发及应用 | 第28-39页 |
| ·材料和方法 | 第29页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·田间调查及抗病性鉴定 | 第29页 |
| ·抗病基因序列的查询 | 第29-30页 |
| ·RGA 引物的设计 | 第30-31页 |
| ·RGA 分析 | 第31页 |
| ·BSA (Bulked Segregant Analysis)分池 | 第31页 |
| ·BSA 分池标记记录及数据分析 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-37页 |
| ·RGA 引物的设计 | 第32-33页 |
| ·枯萎病病情田间调查及主要农艺形状的分析 | 第33-35页 |
| ·RGA 引物的多态性筛选 | 第35页 |
| ·RGA 与枯萎病抗性的遗传连锁分析 | 第35-36页 |
| ·RGA 引物的来源和结构 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 海岛棉枯萎病抗性相关基因的克隆与生物信息学分析 | 第39-57页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·目的基因片段的分离 | 第39-40页 |
| ·同源序列克隆 | 第40页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第40-41页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第41-42页 |
| ·RGBCH 和 SGBCH 基因的克隆 | 第42-43页 |
| ·基因的序列分析 | 第43页 |
| ·功能基因标记转化 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-55页 |
| ·RNA 的提取与检测 | 第44页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第44-45页 |
| ·所获基因片段的克隆 | 第45-47页 |
| ·基因克隆及序列分析 | 第47-54页 |
| ·功能基因标记的获得与验证 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 枯萎病抗性相关基因的组织特异性表达分析 | 第57-70页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-59页 |
| ·总 RNA 的提取及 cDNA 合成 | 第57-58页 |
| ·棉种处理 | 第58页 |
| ·棉苗的培育 | 第58页 |
| ·菌种的准备 | 第58页 |
| ·棉苗接种 | 第58页 |
| ·棉花总 RNA 的提取及 cDNA 合成 | 第58页 |
| ·荧光定量特异性引物的设计 | 第58-59页 |
| ·抗性相关基因表达分析 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-67页 |
| ·不同组织器官的表达分析 | 第59-60页 |
| ·实时荧光定量熔解曲线 | 第60-61页 |
| ·枯萎病病原菌诱导下五种材料叶片组织的实时荧光定量分析 | 第61-63页 |
| ·枯萎病病原菌诱导下五种材料下胚轴组织的实时荧光定量分析 | 第63-65页 |
| ·枯萎病病原菌诱导下五种材料根组织的实时荧光定量 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| 第五章 新疆海岛棉枯萎病抗性相关基因植物表达载体的构建和转基因植株的获得及抗性鉴定 | 第70-83页 |
| ·实验材料 | 第70-71页 |
| ·材料 | 第70页 |
| ·试剂 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-76页 |
| ·RGBCH、SGBCH 基因编码区的克隆 | 第71页 |
| ·pCAMBIA1301-RGBCH、pCAMBIA1301-SGBCH 植物表达载体的构建 | 第71-72页 |
| ·pCAMBIA1301-RGBCH、pCAMBIA1301-SGBCH 植物表达载体的酶切和测序鉴定 | 第72页 |
| ·根癌农杆菌 EHA105 感受态的制备 | 第72页 |
| ·pCAMBIA1301-RGBCH、pCAMBIA1301-SGBCH 转化 EHA105 | 第72页 |
| ·根癌农杆菌中植物表达载体的检测 | 第72-73页 |
| ·培养基 | 第73页 |
| ·转基因烟草的培育方法 | 第73-74页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化方案 | 第74-75页 |
| ·转基因植株的筛选 | 第75页 |
| ·转基因烟草的接种 | 第75-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-81页 |
| ·pCAMBIA1301-RGBCH、pCAMBIA1301-SGBCH 植物表达载体的构建 | 第76页 |
| ·pCAMBIA1301-RGBCH、pCAMBIA1301-SGBCH 植物表达载体的酶切检测 | 第76-77页 |
| ·根癌农杆菌中植物表达载体的 PCR 检测 | 第77页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第77-78页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第78-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 第六章 结论与展望 | 第83-85页 |
| ·RGA 标记的开发与应用 | 第83页 |
| ·RGBCH、SGBCH 基因的克隆 | 第83页 |
| ·抗性相关基因在海岛棉和陆地棉中的表达分析 | 第83-84页 |
| ·RGBCH、SGBCH 基因植物表达载体的构建 | 第84页 |
| ·展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 作者简介 | 第94-95页 |
