摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 植物种子脂肪酸生物合成途径 | 第14-15页 |
2 脂肪酸延伸酶1基因FAE1遗传调控研究 | 第15-17页 |
3 △~(12)-油酰脱饱和酶基因FAD2遗传调控研究 | 第17-18页 |
4 油菜种子油酸含量的遗传改良 | 第18-19页 |
5 本论文研究内容和目的意义 | 第19-22页 |
·研究内容 | 第20-21页 |
·研究目的 | 第21-22页 |
第二章 FAE1干涉表达转基因株系保持低芥酸含量异交稳定的验证 | 第22-29页 |
1 材料和方法 | 第22-24页 |
·材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-24页 |
·PCR检测 | 第23-24页 |
·简易法提取油菜基因组DNA | 第23页 |
·PCR反应体系及扩增程序 | 第23-24页 |
·田间杂交 | 第24页 |
·气相色谱法分析油菜种子脂肪酸组分 | 第24页 |
2 结果与分析 | 第24-25页 |
·PCR检测结果 | 第24-25页 |
·脂肪酸组分分析结果 | 第25页 |
3 讨论 | 第25-29页 |
第三章 FAD2干涉表达转基因株系分子鉴定和脂肪酸组分分析 | 第29-42页 |
1 材料和方法 | 第29-35页 |
·材料 | 第29-30页 |
·植物材料 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-35页 |
·转基因植株PCR检测 | 第30页 |
·转基因植株Southern杂交分析 | 第30-34页 |
·CTAB法大量提取基因组DNA | 第30-31页 |
·基因组DNA酶切和琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
·转膜 | 第31-32页 |
·探针制备 | 第32-33页 |
·探针标记 | 第33页 |
·预杂交和杂交 | 第33页 |
·洗膜和压片 | 第33-34页 |
·转基因植株RT-PCR分析 | 第34-35页 |
·Trizol法提取油菜种子总RNA | 第34页 |
·cDNA合成 | 第34-35页 |
·半定量RT-PCR | 第35页 |
·T1代和T2代FAD2干涉表达转基因株系脂肪酸组分分析 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-38页 |
·转基因株系PCR检测 | 第35-36页 |
·转基因植株Southern杂交分析 | 第36-37页 |
·转基因植株RT-PCR分析 | 第37页 |
·转基因株系脂肪酸组分分析 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-42页 |
第四章 FAD2干涉表达转基因株系保持低亚油酸和亚麻酸含量异交稳定的验证 | 第42-46页 |
1 材料和方法 | 第42-43页 |
·植物材料 | 第42-43页 |
·方法 | 第43页 |
·田间杂交 | 第43页 |
·脂肪酸组分分析 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-46页 |
第五章 FAE1和FAD2基因单独与协同干涉表达对油菜种子脂肪酸组分的调控作用 | 第46-51页 |
1 材料和方法 | 第46-47页 |
·材料 | 第46页 |
·植物材料 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·方法 | 第46-47页 |
·PCR检测 | 第47页 |
·脂肪酸组分分析 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-49页 |
·FAE1和FAD2协同干涉表达转基因植株PCR检测 | 第47-48页 |
·脂肪酸组分分析 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第59-60页 |