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哈氏噬纤维菌电转化条件的优化及表达体系的构建

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略词表第13-14页
第一章 绪论第14-34页
   ·纤维素的结构第14-16页
   ·降解纤维素的微生物第16-18页
     ·真菌第16-17页
     ·细菌第17页
     ·未培养微生物第17-18页
   ·微生物降解纤维素的机制第18-22页
     ·复合型纤维素酶系第18-19页
     ·非复合型纤维素酶系第19-21页
     ·细胞结合的非复合型纤维素降解酶系第21-22页
   ·启动子概述第22-30页
     ·启动子的结构第23-24页
     ·启动子的类型第24-25页
     ·克隆启动子的方法第25-28页
     ·启动子克隆的意义第28-29页
     ·拟杆菌的启动子概述第29-30页
   ·噬纤维菌属基因转移系统的研究第30-31页
   ·哈氏噬纤维菌的研究现状第31-34页
第二章 哈氏噬纤维菌的电转化条件的优化第34-47页
   ·实验材料第34-35页
     ·试剂和仪器第34页
     ·菌种和质粒第34-35页
     ·培养基第35页
     ·抗生素类试剂第35页
   ·实验方法第35-39页
     ·菌体培养第35页
     ·哈氏菌感受态的制备第35-36页
     ·质粒提取第36页
     ·电转化第36-37页
     ·影响电转化效率的不同因素第37-38页
     ·转化效率的计算第38-39页
     ·菌落PCR验证转化子第39页
   ·实验结果与分析第39-45页
     ·转化子验证结果第39-40页
     ·不同培养条件对转化率的影响第40页
     ·不同生长状态对转化率的影响第40-41页
     ·不同电场强度对转化效率的影响第41页
     ·质粒浓度对电转化率的影响第41-42页
     ·复苏时间的影响第42-43页
     ·电击缓冲液对电转化效率的影响第43-44页
     ·其他因素的影响第44-45页
   ·本章小结与讨论第45-47页
第三章 哈氏噬纤维菌突变株的构建与性质研究第47-68页
   ·实验材料第47-50页
     ·菌种第47-48页
     ·质粒第48页
     ·培养基第48-49页
     ·抗生素类试剂第49页
     ·试剂和仪器第49页
     ·引物第49-50页
   ·实验方法第50-58页
     ·电转化第50-51页
     ·常规分子生物学方法第51-54页
     ·突变株的分子验证第54-56页
     ·突变株表型验证第56-58页
   ·实验结果与分析第58-67页
     ·突变株中断基因的信息学分析第58-59页
     ·敲除质粒pLYL03_3732的构建第59-60页
     ·电转化第60页
     ·突变株的分子验证第60-62页
     ·突变株表型检测第62-67页
   ·本章小结第67-68页
第四章 哈氏噬纤维菌自身强启动子的筛选第68-79页
   ·实验材料第68-71页
     ·试剂和仪器第68-69页
     ·菌种与质粒第69页
     ·培养基第69页
     ·引物第69-71页
   ·实验方法第71-72页
     ·DNA提取第71页
     ·常规分子生物学方法第71页
     ·反向PCR寻找转座子插入位点第71页
     ·启动子基因文库的构建第71-72页
     ·突变子库的筛选第72页
     ·定向PCR扩增启动子片段第72页
   ·实验结果与分析第72-77页
     ·转座子探针质粒构建第72-73页
     ·突变子库的筛选和验证第73-74页
     ·突变株转座子插入位点的确定第74-75页
     ·PCR定向克隆启动子片段第75-76页
     ·定向克隆的强启动子的筛选第76-77页
   ·本章小结与讨论第77-79页
第五章 哈氏菌表达体系的初步构建第79-89页
   ·实验材料第79-81页
     ·试剂和仪器第79-80页
     ·菌种和质粒第80页
     ·培养基第80-81页
     ·引物第81页
   ·实验方法第81-84页
     ·CHU_1280的克隆和表达质粒的构建第81-83页
     ·哈氏噬纤维菌的感受态制备及电转化第83页
     ·CHU_1280的自体表达与纯化第83-84页
   ·实验结果与分析第84-87页
     ·表达载体的构建第84-85页
     ·重组蛋白在哈氏噬纤维菌中的表达与纯化第85-87页
   ·本章小结与讨论第87-89页
全文总结第89-91页
参考文献第91-97页
致谢第97-98页
学位论文评阅及答辩情况表第98页

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