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吸水链霉菌10-22中DNA扩增现象的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-13页
第一章 前言第13-23页
   ·链霉菌简介第13-16页
     ·链霉菌所产抗生素及其应用第14-15页
     ·链霉菌育种方法第15-16页
   ·链霉菌的遗传机制第16-18页
   ·吸水链霉菌10-22的研究进展第18-20页
   ·本课题研究的目的、内容和意义第20-23页
     ·研究目的第20-21页
     ·研究内容第21-22页
     ·研究意义第22-23页
第二章 实验材料和方法第23-43页
   ·菌株和质粒第23-24页
     ·菌株第23页
     ·质粒第23-24页
   ·主要仪器第24-25页
   ·培养基与溶液第25-31页
     ·培养基第25-27页
     ·溶液第27-31页
   ·抗生素及其他第31-32页
     ·抗生素第31-32页
     ·其他第32页
   ·实验方法第32-43页
     ·菌体培养和菌种保藏第32页
       ·大肠杆菌培养和菌种保藏第32页
       ·链霉菌培养与菌种保藏第32页
     ·PFGE法分离链霉菌基因组DNA片段第32-33页
     ·质粒DNA的提取第33-34页
       ·大肠杆菌质粒提取(碱裂解法)第33-34页
       ·链霉菌质粒提取(小量)第34页
     ·链霉菌总基因提取(大量)第34-35页
     ·生物信息学分析与引物设计第35-37页
       ·生物信息学分析第35-36页
       ·引物设计第36-37页
     ·PCR反应第37页
     ·DNA片段的回收第37页
     ·大肠杆菌感受态制备及DNA转化第37-38页
     ·链霉菌DNA转化第38-40页
       ·PEG介导的原生质体转化第38-39页
       ·电击转化(electroporation)第39-40页
     ·Southern杂交第40-43页
第三章 实验结果分析与讨论第43-61页
   ·T110的DNA扩增第43-47页
     ·T110的DNA扩增第44页
     ·T110的DNA扩增与pIJ702的关系第44-46页
     ·T110扩增DNA的结构第46-47页
   ·基因组插入片段INT的亚克隆及测序第47-49页
   ·基因组插入片段INT的连续性第49-50页
   ·pIJ702序列分析第50-51页
   ·已扩增序列(ADS)的测序分析第51-53页
   ·染色体上INT邻近DNA序列的分析第53-56页
     ·INT在10-22染色体上的左侧序列(cosmid 4D10)第54-55页
     ·INT在10-22染色体上的右侧序列(cosmid 17H10)第55-56页
   ·10-22中DNA扩增的重建第56-57页
   ·T110的扩增机制研究第57-61页
     ·ADS序列中INT不同区域的PCR扩增第57-59页
     ·转化S.lividans 1326菌株第59-60页
     ·转化S.hygroscopicus Q105菌株第60-61页
第四章 总结与展望第61-63页
   ·工作总结第61-62页
     ·ADS序列和含有扩增序列的文库克隆序列分析第61页
     ·DNA扩增对扩增DNA所含基因表达的影响第61页
     ·DNA扩增的重建和染色体DNA扩增系统的建立第61-62页
   ·工作展望第62-63页
附录第63-84页
参考文献第84-87页
致谢第87-89页
学位论文评阅及答辩情况表第89页

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