| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号说明及缩略语 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| ·生物冶金 | 第12-16页 |
| ·生物冶金技术概述 | 第12-14页 |
| ·生物冶金中的浸矿微生物 | 第14-15页 |
| ·浸矿机理 | 第15-16页 |
| ·细菌抗砷机制研究 | 第16-20页 |
| ·原核生物抗砷基因及抗砷机制 | 第16-18页 |
| ·抗砷基因 | 第16-17页 |
| ·抗砷机制 | 第17-18页 |
| ·真核生物抗砷基因及抗砷机制 | 第18-20页 |
| ·脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE) | 第20-24页 |
| ·PFGE原理 | 第20页 |
| ·PFGE的种类 | 第20-22页 |
| ·PFGE的影响因素 | 第22页 |
| ·PFGE的应用 | 第22-24页 |
| ·PFGE在分子分型方面的作用 | 第22-23页 |
| ·PFGE在DNA辐射损伤和修复研究中的应用 | 第23页 |
| ·PFGE在细胞凋亡研究中的应用 | 第23页 |
| ·PFGE在转基因方面的应用 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 嗜铁钩端螺旋菌基因组DNA脉冲场凝胶电泳分析 | 第25-32页 |
| ·材料与方法 | 第25-27页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·主要缓冲液 | 第25-26页 |
| ·培养基和培养条件 | 第26页 |
| ·L. ferriphilum基因组DNA脉冲场凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-32页 |
| ·L. ferriphilum基因组DNA PFGE条件优化与分析 | 第27-29页 |
| ·L. ferriphilum基因组DNA PFGE条件优化 | 第27页 |
| ·L. ferriphilum基因组DNA PFGE分析 | 第27-29页 |
| ·L.ferriphilum基因组提取方法优化 | 第29-32页 |
| 第三章 嗜铁钩端螺旋菌ML-04抗砷基因序列分析 | 第32-45页 |
| ·材料与方法 | 第32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-45页 |
| ·嗜铁钩端螺旋菌抗砷基因簇图解 | 第32-34页 |
| ·L. ferriphilum ML-04大的抗砷基因簇图解 | 第33-34页 |
| ·L. ferriphilum ML-04小的抗砷基因簇图解 | 第34页 |
| ·L. ferriphilum ML-04抗砷基因序列同源性分析 | 第34-41页 |
| ·抗砷基因arsA(LF-2406)序列同源性分析 | 第35-37页 |
| ·抗砷基因arsB(LF-2404)序列同源性分析 | 第37-38页 |
| ·抗砷基因arsC(LF-2408)序列同源性分析 | 第38-39页 |
| ·抗砷基因arsD(LF-2407)序列同源性分析 | 第39-40页 |
| ·抗砷基因arsR(LF-2409)序列同源性分析 | 第40-41页 |
| ·嗜铁钩端螺旋菌抗砷基因序列差异性分析 | 第41-45页 |
| ·抗砷基因arsA(LF-2406)序列差异性分析 | 第41-42页 |
| ·抗砷基因arsB(LF-2404)序列差异性分析 | 第42-43页 |
| ·抗砷基因arsC(LF-2408)序列差异性分析 | 第43-45页 |
| 第四章 嗜铁钩端螺旋菌抗砷基因簇的改造 | 第45-73页 |
| ·材料和方法 | 第45-57页 |
| ·菌株和质粒 | 第45页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第45-46页 |
| ·培养基和培养条件 | 第46页 |
| ·大肠杆菌培养基 | 第46页 |
| ·嗜铁钩端螺旋菌培养基 | 第46页 |
| ·抗生素使用浓度 | 第46-47页 |
| ·基因组DNA的提取与定量 | 第47-48页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第48-49页 |
| ·质粒DNA的快速提取 | 第48-49页 |
| ·质粒DNA的试剂盒提取 | 第49页 |
| ·DNA片段纯化 | 第49-50页 |
| ·抗砷质粒的构建 | 第50-57页 |
| ·L. ferriphilum调节型抗砷基因簇的扩增及抗砷质的粒pSDU1-Ars Ⅰ-S (L. ferriphilum)构建 | 第50-52页 |
| ·L. ferriphilum调节型抗砷基因簇的改造及抗砷质粒pSDU1-tac-Ars2 (L. ferriphilum)的构建 | 第52-55页 |
| ·E. coli Plasmid R773中抗砷基因簇的扩增及抗砷质粒pSDU1-tac-Ars1 (Plasmid R773)的构建 | 第55-56页 |
| ·新型高拷贝抗砷质粒pSDU1-remob-tac-Ars1 (Plasmid R773)的构建 | 第56-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-73页 |
| ·抗砷质粒pSDU1-Ars Ⅰ-S (L. ferriphilum)的构建 | 第57-60页 |
| ·pSDU1载体片段的克隆 | 第57-58页 |
| ·不含磷酸转移系统的抗砷基因簇Ars Ⅰ-S的克隆 | 第58-59页 |
| ·抗砷质粒pSDU1-Ars Ⅰ-S构建 | 第59-60页 |
| ·抗砷质粒pSDU1-tac-Ars2 (L. ferriphilum)的构建 | 第60-66页 |
| ·载体pSDU1-tac的克隆 | 第60-61页 |
| ·抗砷基因arsA的克隆 | 第61页 |
| ·质粒载体pSDU1-tac-arsA酶切验证 | 第61-62页 |
| ·抗砷基因arsB的克隆 | 第62-63页 |
| ·质粒载体pSDU1-tac-arsA酶切验证 | 第63页 |
| ·抗砷基因arsC的克隆 | 第63-64页 |
| ·抗砷质粒pSDU1-tac-Ars2 (L. ferriphilum)的构建 | 第64-66页 |
| ·抗砷质粒pSDU1-tac-Ars1 (Plasmid R773)的构建 | 第66-69页 |
| ·pSDU1载体片段的克隆 | 第66页 |
| ·含有tac启动子的砷抗性基因Ars1的克隆 | 第66-68页 |
| ·抗砷质粒pSDU1-tac-Ars1的构建 | 第68-69页 |
| ·新型高拷贝抗砷质粒pSDU1-remob-tac-Ars1 (Plasmid R773)的构建 | 第69-73页 |
| ·pSDU1-remob载体片段的克隆 | 第69-70页 |
| ·含有tac启动子的砷抗性基因Ars1的克隆 | 第70-71页 |
| ·抗砷质粒pSDU1-remob-tac-Ars1的构建 | 第71-73页 |
| 第五章 抗砷质粒在大肠杆菌中的抗性研究 | 第73-81页 |
| ·材料与方法 | 第73-74页 |
| ·菌株和质粒 | 第73页 |
| ·主要仪器 | 第73-74页 |
| ·培养基和培养条件 | 第74页 |
| ·抗生素使用浓度 | 第74页 |
| ·结果与讨论 | 第74-81页 |
| ·抗砷质粒在大肠杆菌中的砷抗性能力检测 | 第74-81页 |
| ·L. ferriphilum调节型抗砷基因簇与经过基因工程改造后的抗砷基因簇抗砷性能的比较 | 第74-76页 |
| ·L. ferriphilum经过基因工程改造后的抗砷基因簇与E. coli Plasmid R773抗砷性能的比较 | 第76-77页 |
| ·质粒拷贝数对抗砷性能影响的研究 | 第77-79页 |
| ·不同质粒的抗砷性能比较 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |
