摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 综述 | 第11-22页 |
一.动物的先天免疫 | 第11-12页 |
二.Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子的研究背景 | 第12-22页 |
1.丝氨酸蛋白酶抑制因子的分类及特点 | 第12-13页 |
2.Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子的特点 | 第13-16页 |
3.蛋白酶抑制因子的抑制动力学及Kazal抑制因子的抑制类型 | 第16-19页 |
4.Kazal型抑制因子在免疫反应中的作用 | 第19-21页 |
5.Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子的研究意义和展望 | 第21-22页 |
第二章 FcSPIs的cDNA克隆和性质研究 | 第22-47页 |
一.引言 | 第22页 |
二.材料和方法 | 第22-33页 |
1.实验动物和菌株 | 第22-23页 |
2.试剂和设备 | 第23-24页 |
3.实验方法 | 第24-33页 |
·cDNA克隆 | 第24-26页 |
·RT-PCR | 第26-27页 |
·FcSPIs的重组表达 | 第27-28页 |
·FcSPIs的载体构建 | 第27-28页 |
·重组蛋白诱导试表达 | 第28页 |
·重组蛋白大规模表达 | 第28页 |
·FcSPIs重组蛋白的纯化 | 第28-29页 |
·多克隆抗体的制备 | 第29页 |
·Western blot检测重组蛋白纯度 | 第29-30页 |
·rFcSPIs的丝氨酸蛋白酶抑制活性 | 第30-31页 |
·rFcSPI-1的理化性质 | 第31页 |
·对Dithiothreitol(DTT)的敏感度实验 | 第31页 |
·rFcSPI-1的热稳定性 | 第31页 |
·rFcSPI-1的抑制动力学 | 第31-32页 |
·rFcSPI-1在先天免疫中的作用 | 第32-33页 |
·rFcSPI-1的细菌结合活性 | 第32页 |
·rFcSPI-1的抑制细菌分泌蛋白酶和中国明对虾天然糜蛋白酶活性 | 第32-33页 |
三.实验结果 | 第33-43页 |
1. cDNA克隆 | 第33-35页 |
2.序列对比 | 第35页 |
3.RT-PCR | 第35-36页 |
4.重组表达及蛋白纯化 | 第36-38页 |
5.rFcSPIs的蛋白酶抑制活性 | 第38-39页 |
6.rFcSPI-1的抑制动力学 | 第39-41页 |
7.重组蛋白FcSPI-1的理化性质 | 第41-42页 |
8.rFcSPI-1在先天免疫中的功能 | 第42-43页 |
·rFcSPI-1的细菌结合活性 | 第42页 |
·rFcSPI-1的抑制细菌分泌蛋白酶和天然糜蛋白酶的活性 | 第42-43页 |
四.讨论 | 第43-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
总结与创新点 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
发表文章 | 第56-57页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第57页 |