| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-18页 |
| ·研究背景 | 第11-12页 |
| ·我国水环境总体形势 | 第11页 |
| ·富营养化 | 第11-12页 |
| ·磷与富营养化 | 第12页 |
| ·生物除磷与聚磷菌 | 第12-14页 |
| ·生物除磷 | 第12-13页 |
| ·EBPR 除磷原理 | 第13页 |
| ·EBPR 中的聚磷菌 | 第13-14页 |
| ·EBPR 系统存在的缺点 | 第14页 |
| ·聚磷酶与解磷酶 | 第14-15页 |
| ·聚磷酶的分子生物学研究 | 第14-15页 |
| ·解磷酶的分子生物学研究 | 第15页 |
| ·国内研究现状 | 第15-17页 |
| ·聚磷菌的分离 | 第15-16页 |
| ·聚磷酶与解磷酶 | 第16页 |
| ·聚磷菌的改良 | 第16-17页 |
| ·研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-25页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-25页 |
| ·钼锑抗分光光度法 | 第19-20页 |
| ·培养液中磷酸盐含量和细胞中聚磷含量的测定 | 第20页 |
| ·细菌基因组DNA 的提取 | 第20页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·细菌RNA 的提取 | 第21页 |
| ·DNA 片段的回收 | 第21-22页 |
| ·JM110 感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·天根公司的pGEM-T Easy 连接克隆PCR 产物 | 第22页 |
| ·中华根瘤菌NP1 电转感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·中华根瘤菌NP1 电转感受态细胞的转化 | 第23页 |
| ·用Promega 的DNase 处理所提取的RNA | 第23页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第23-24页 |
| ·其它方法 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与分析 | 第25-58页 |
| ·中华根瘤菌 NP1 的除磷特性研究 | 第25-28页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·30℃培养NP1 的除磷能力测定 | 第25-26页 |
| ·10℃培养 NP1 的除磷能力测定 | 第26-27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| ·基因克隆与序列分析 | 第28-46页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·中华根瘤菌NP1 聚磷酶基因的克隆与分析 | 第28-34页 |
| ·NP1 PPK 结构分析 | 第34-38页 |
| ·中华根瘤菌NP1 解磷酶基因的克隆与分析 | 第38-43页 |
| ·NP1 PPX 结构分析 | 第43-45页 |
| ·聚磷酶启动子 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·解磷酶基因敲除 | 第46-54页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·解磷酶基因敲除载体构建图 | 第46-48页 |
| ·解磷酶基因敲除载体构建 | 第48-51页 |
| ·NP1 解磷酶基因敲除突变株的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
| ·转录水平上验证NP1::ppx 解磷酶基因的敲除 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54页 |
| ·NP1::ppx 除磷能力的测定 | 第54-58页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·NP1::ppx 高磷培养基30℃培养的除磷能力测定 | 第54-56页 |
| ·NP1::ppx 低磷培养基10℃培养的除磷能力测定 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-59页 |
| ·基因克隆 | 第58页 |
| ·解磷酶基因敲除 | 第58页 |
| ·解磷酶基因突变株 NP1::ppx 除磷能力测定 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65页 |
