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口蹄疫病毒vp2基因的克隆表达及抗体检测方法的建立

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表(ABBREVIATION)第10-11页
第1章 文献综述第11-20页
   ·口蹄疫的流行及其危害第11-12页
   ·口蹄疫病毒的抗原性与变异性第12-13页
   ·结构蛋白基因第13-14页
     ·非结构蛋白基因第13-14页
   ·口蹄疫的防制第14-16页
     ·干扰素(interferon)的应用第15-16页
     ·反义技术的应用第16页
     ·RNA干扰技术的应用第16页
   ·口蹄疫诊断技术研究进展第16-18页
     ·病原学诊断第16-17页
     ·抗体检测第17-18页
   ·单克隆抗体在口蹄疫病毒研究中的应用第18-20页
     ·单抗在FMDV中和抗原的分析与定位中的应用第18页
     ·单抗在口蹄疫诊断和检疫中的应用第18-20页
第2章 本研究的目的和意义第20-21页
第3章 材料与方法第21-33页
   ·材料第21-24页
     ·试验材料第21页
     ·酶类及试剂盒第21页
     ·主要溶液和试剂第21-23页
     ·培养基第23页
     ·ELISA相关溶液第23页
     ·单抗制备相关溶液第23-24页
   ·实验方法第24-33页
     ·O型和亚洲I型口蹄疫VP_2基因克隆表达第24-25页
     ·O型和AsiaI型口蹄疫病毒VP_2蛋白间接ELISA方法的建立第25-26页
     ·AsiaI型口蹄疫病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第26-30页
     ·AsiaI型口蹄疫病毒VP2蛋白单抗竞争ELISA方法的建立第30-33页
第4章 结果与分析第33-48页
   ·ASIA I和O型口蹄疫病毒VP_2基因的克隆表达第33-35页
   ·O型和ASIA I型口蹄疫病毒VP_2蛋白间接ELISA方法的建立第35-40页
     ·最佳包被浓度的确定(方正滴定)第35-36页
     ·阴阳界限的确定第36页
     ·O型和AsiaI型口蹄疫病毒VP2间接ELISA反应条件的优化第36-39页
     ·特异性和敏感性实验第39页
     ·重复性试验结果第39页
     ·抗体检测第39-40页
   ·ASIAI型口蹄疫病毒VP_2蛋白单克隆抗体的制备第40-42页
     ·单克隆抗体细胞株筛选第40页
     ·细胞融合后结果观察第40页
     ·westeron-blot鉴定第40-41页
     ·染色体计数结果第41页
     ·单克隆抗体效价测定第41-42页
     ·单抗亚类鉴定结果第42页
     ·稳定性检测第42页
     ·单抗5F5的提纯第42页
   ·ASIAI型口蹄疫病毒VP_2蛋白竞争ELISA方法的建立第42-48页
     ·酶标抗体的建立及效价的测定第42-43页
     ·VP2蛋白包被浓度与酶标单抗浓度的确定第43页
     ·阴阳界限的确定第43-44页
     ·AsiaI型口蹄疫VP_2蛋白竞争ELISA方法条件的优化第44-46页
     ·特异性和敏感性实验第46页
     ·重复性试验结果第46页
     ·抗体检测第46-48页
第5章 讨论第48-51页
 口蹄疫VP_2蛋白第48页
 单克隆抗体的制备第48-49页
 间接ELISA方法的建立第49页
 AsiaI型口蹄疫病毒VP_2蛋白竞争ELISA方法的建立第49-51页
第6章 结论第51-52页
参考文献第52-57页
致谢第57-58页
附录第58页

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