| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 目录 | 第12-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-32页 |
| ·课题的提出 | 第16-17页 |
| ·青枯病研究进展 | 第17-25页 |
| ·青枯病菌的研究概况 | 第17-20页 |
| ·植物抗病机制及病原与植物的互作 | 第20-21页 |
| ·抗青枯病研究进展 | 第21-24页 |
| ·问题与探讨 | 第24-25页 |
| ·植物抗病基因的克隆方法 | 第25-28页 |
| ·图位克隆 | 第25-26页 |
| ·转座子标签法 | 第26页 |
| ·抗病基因类似物法 | 第26-27页 |
| ·转录水平上几种常用方法的比较 | 第27-28页 |
| ·抑制差减杂交 | 第28-30页 |
| ·抑制差减杂交技术的基本原理 | 第28页 |
| ·抑制差减杂交技术的发展 | 第28-29页 |
| ·SSH方法在植物基因分离上的应用 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30页 |
| ·本研究的目的和预期目标 | 第30-31页 |
| ·总体设计 | 第31-32页 |
| 第二章 几种马铃薯抗青枯病鉴定方法的比较 | 第32-41页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·供试青枯病菌株及材料 | 第32页 |
| ·青枯病菌的培养 | 第32页 |
| ·青枯病菌接种 | 第32-33页 |
| ·抗病性评价方法和标准 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·茎枝菌液共培养法与灌根法和毛细管菌液滴注法鉴定马铃薯的比较 | 第33-37页 |
| ·茎枝菌液共培养法与灌根法及毛细管菌液滴注法鉴定番茄的比较 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 青枯病菌胁迫下的马铃薯早期基因表达 | 第41-70页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·材料与方法 | 第41-46页 |
| ·试验材料与处理 | 第41-42页 |
| ·总 RNA的提取及mRNA的分离 | 第42页 |
| ·SSH文库的构建 | 第42-44页 |
| ·测序及序列分析 | 第44-45页 |
| ·差减文库筛选 | 第45页 |
| ·Northern印迹 | 第45页 |
| ·半定量 RT-PCR验证 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-65页 |
| ·试验材料的选择及取材时间的确定 | 第46页 |
| ·总 RNA的提取及mRNA的分离 | 第46-47页 |
| ·cDNA的合成及合成效率检测 | 第47-48页 |
| ·接头连接效率及差减杂交效率检测 | 第48-49页 |
| ·差减产物克隆及文库质量评价 | 第49-50页 |
| ·测序和差异表达片段的筛选 | 第50-53页 |
| ·差异表达片段的Northern和 RT-PCR验证 | 第53-54页 |
| ·基因的功能分析 | 第54-55页 |
| ·抗病相关基因 | 第55-65页 |
| ·讨论 | 第65-70页 |
| ·基于 SSH方法所得结果的可靠性 | 第65页 |
| ·SSH是获得新基因和低丰度表达基因的有效方法 | 第65-66页 |
| ·信号识别相关 EST | 第66页 |
| ·信号转导和转录因子 | 第66-67页 |
| ·过敏反应与系统获得性抗性 | 第67-68页 |
| ·马铃薯与青枯病菌互作中的抗病防御 | 第68-70页 |
| 第四章 马铃薯青枯病抗性相关基因cDNA的分离及表达分析 | 第70-85页 |
| 第一节 马铃薯青枯病抗性相关基因(全长)cDNA的获得 | 第70-78页 |
| ·引言 | 第70页 |
| ·材料与方法 | 第70-72页 |
| ·试验材料与处理 | 第70页 |
| ·总 RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第70-71页 |
| ·RACE | 第71-72页 |
| ·PCR产物的克隆与测序 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-77页 |
| ·总 RNA的提取 | 第72-73页 |
| ·RACE-PCR产物分析 | 第73页 |
| ·序列分析 | 第73-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| 第二节 马铃薯青枯病抗性相关基因的诱导表达 | 第78-85页 |
| ·引言 | 第78页 |
| ·材料与方法 | 第78-79页 |
| ·试验材料与处理 | 第78页 |
| ·总 RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第78页 |
| ·青枯病菌和 JA诱导表达 | 第78-79页 |
| ·结果与分析 | 第79-82页 |
| ·两个具有全长cDNA基因的青枯病菌及 JA诱导表达 | 第79-80页 |
| ·尚未获得全长cDNA基因的JA诱导表达 | 第80-82页 |
| ·讨论 | 第82-85页 |
| ·蛋白酶抑制子在植物的抗病反应中具有重要作用 | 第82-83页 |
| ·PMEI与 PME协同作用调节细胞壁的稳定性和参与细胞壁的重建 | 第83页 |
| ·植物类受体激酶参与抗病防御 | 第83-84页 |
| ·磷酸酯酶 2C对 JA的响应 | 第84页 |
| ·蛋白激酶 Pti1类似物可能功能 | 第84-85页 |
| 第五章 cDNA文库结合 RACE方法克隆马铃薯 DnaJ-like基因全长cDNA | 第85-95页 |
| 第一节 富集青枯病抗性相关基因 SMART-cDNA文库的构建 | 第85-90页 |
| ·引言 | 第85页 |
| ·材料与方法 | 第85-87页 |
| ·试验材料与处理 | 第85页 |
| ·双链cDNA合成 | 第85-86页 |
| ·双链cDNA的酶切与连接 | 第86页 |
| ·噬菌体的体外包装 | 第86页 |
| ·效价测定与文库扩增 | 第86-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-88页 |
| ·总RNA抽提 | 第87页 |
| ·双链cDNA合成及分级分离 | 第87-88页 |
| ·文库质量检测 | 第88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| 第二节 马铃薯DnaJ-like基因全长cDNA的克隆 | 第90-95页 |
| ·引言 | 第90页 |
| ·材料与方法 | 第90-91页 |
| ·试验材料与处理 | 第90页 |
| ·目的基因5’端序列的扩增 | 第90页 |
| ·茉莉酸诱导表达 | 第90-91页 |
| ·结果与分析 | 第91-93页 |
| ·马铃薯DnaJ-like基因的分离 | 第91页 |
| ·序列分析 | 第91-93页 |
| ·马铃薯DnaJ-like基因的诱导表达 | 第93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| 第六章 结论 | 第95-96页 |
| 后续工作展望 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-117页 |
| 附录 | 第117-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 作者简历 | 第122页 |
| 研究生期间发表和待发表的主要论文 | 第122页 |
