| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| 1 纳豆激酶的研究进展 | 第11-20页 |
| ·溶栓剂的发展 | 第11-12页 |
| ·纳豆、纳豆菌与纳豆激酶 | 第12页 |
| ·纳豆激酶的生化特性 | 第12-13页 |
| ·纳豆激酶的基因结构 | 第13-14页 |
| ·纳豆激酶的蛋白质结构 | 第14页 |
| ·纳豆激酶的生物学功能 | 第14-16页 |
| ·纳豆激酶的活性测定方法 | 第16-17页 |
| ·纤维蛋白平板法 | 第16页 |
| ·纤维蛋白块溶解时间法 | 第16页 |
| ·四肽底物法 | 第16页 |
| ·血清板法 | 第16-17页 |
| ·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第17页 |
| ·纳豆激酶的发酵工艺 | 第17页 |
| ·纳豆激酶的分离纯化 | 第17-19页 |
| ·盐析分离法 | 第17-18页 |
| ·有机溶剂沉淀法 | 第18页 |
| ·柱层析分离纯化方法 | 第18页 |
| ·发酵与泡载分离耦合方法 | 第18页 |
| ·膨胀床吸附分离方法 | 第18页 |
| ·反胶团萃取 | 第18-19页 |
| ·纳豆激酶的开发及前景 | 第19-20页 |
| 2. 细胞固定化技术 | 第20-25页 |
| ·固定化技术的发展史 | 第20页 |
| ·固定化细胞技术的优缺点 | 第20-21页 |
| ·固定化细胞的特性 | 第21页 |
| ·形态学特征 | 第21页 |
| ·生理学特征 | 第21页 |
| ·理化环境 | 第21页 |
| ·生物膜的动力学 | 第21页 |
| ·固定化方法的种类 | 第21-22页 |
| ·吸附法 | 第21-22页 |
| ·包埋法 | 第22页 |
| ·结合法 | 第22页 |
| ·交联法 | 第22页 |
| ·热处理法 | 第22页 |
| ·细胞包埋法的特点 | 第22-23页 |
| ·固定化反应器 | 第23-25页 |
| ·固定化细胞多酶反应器 | 第23-24页 |
| ·固定化酶-微生物细胞多酶反应器 | 第24-25页 |
| 3. 本课题研究的意义及主要内容 | 第25-26页 |
| 第二章 纳豆菌细胞的固定化发酵及纳豆激酶的活性测定 | 第26-37页 |
| 1. 前言 | 第26-27页 |
| ·纳豆激酶的发酵生产 | 第26-27页 |
| ·纳豆激酶的活性测定 | 第27页 |
| 2. 材料与方法 | 第27-31页 |
| ·菌种 | 第27页 |
| ·试剂和材料 | 第27-29页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·包埋试剂的制备 | 第29页 |
| ·菌悬液的制备 | 第29页 |
| ·细胞固定化方法 | 第29-30页 |
| ·固定化细胞的发酵方法 | 第30页 |
| ·固定化细胞的连续发酵方法 | 第30页 |
| ·游离细胞发酵方法 | 第30页 |
| ·碳源的优化 | 第30页 |
| ·纳豆激酶活性的测定 | 第30-31页 |
| ·纳豆激酶活性的测定研究—改进纤维蛋白平板法的研究 | 第31页 |
| ·尿激酶标准曲线的确定 | 第31页 |
| ·发酵液单位酶活的计算 | 第31页 |
| 3. 结果与讨论 | 第31-36页 |
| ·纳豆菌游离细胞与固定化细胞发酵产酶的比较 | 第31-32页 |
| ·固定化细胞最多使用批次的研究 | 第32-33页 |
| ·碳源的优化 | 第33页 |
| ·纳豆激酶活性的测定研究 | 第33-34页 |
| ·尿激酶标准曲线的确定 | 第34-36页 |
| ·发酵液酶活的计算 | 第36页 |
| 4. 结论 | 第36-37页 |
| 第三章 纳豆激酶的分离纯化 | 第37-64页 |
| 1. 前言 | 第37页 |
| 2. 材料与方法 | 第37-44页 |
| ·试剂和材料 | 第37-40页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·仪器 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·等电点分离提取 | 第40页 |
| ·硫酸铵分级沉淀法 | 第40页 |
| ·丙酮体积倍数的确定 | 第40页 |
| ·不同提取方法的比较 | 第40页 |
| ·Sephadex G-75柱层析分离纯化 | 第40-41页 |
| ·纳豆激酶酶粉的获得 | 第41页 |
| ·纳豆激酶收率的计算 | 第41-42页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第42-44页 |
| 3. 结果 | 第44-62页 |
| ·纳豆激酶的分离提取 | 第44-49页 |
| ·等电点分离提取 | 第44-45页 |
| ·盐析分离提取 | 第45-46页 |
| ·丙酮沉淀分离提取 | 第46-48页 |
| ·多种提取方法的比较 | 第48-49页 |
| ·纳豆激酶的柱层析纯化 | 第49-55页 |
| ·柱层析洗脱缓冲液的选择 | 第49页 |
| ·用蒸馏水为洗脱液进行过柱层析 | 第49-51页 |
| ·用tris-盐酸缓冲液为洗脱液进行过柱层析 | 第51-52页 |
| ·用生理盐水洗为脱液进行过柱层析 | 第52-53页 |
| ·二次柱层析 | 第53-55页 |
| ·酶活收率计算 | 第55-61页 |
| ·除杂酶活损失 | 第55-56页 |
| ·各种提取方法的酶活收率比较 | 第56页 |
| ·各种干燥方法酶活损失比较 | 第56-59页 |
| ·柱层析法酶活收率 | 第59-61页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第61-62页 |
| 4. 结论 | 第62-64页 |
| 第四章 细胞固定化成粒器及生物反应器的设计 | 第64-76页 |
| 1. 固定化细胞成粒器的设计 | 第64-69页 |
| ·前言 | 第64页 |
| ·材料与方法 | 第64-65页 |
| ·菌种 | 第64页 |
| ·试剂和材料 | 第64页 |
| ·仪器 | 第64-65页 |
| ·细胞固定化成粒器的结构 | 第65页 |
| ·细胞固定化成粒器的操作 | 第65-69页 |
| ·成粒器的灭菌 | 第66页 |
| ·包埋颗粒的制作过程 | 第66-68页 |
| ·成粒器在固定化反应器上的使用设计 | 第68-69页 |
| 2. 固定化细胞生物反应器的设计 | 第69-75页 |
| ·前言 | 第69-70页 |
| ·ICBR-2L型生物反应器的设计 | 第70-75页 |
| ·类型选择 | 第70-72页 |
| ·ICBR-2L型生物反应器系统的主要结构及操作参数(图4-9) | 第72-74页 |
| ·生物反应器的具体操作 | 第74-75页 |
| ·生物反应器性能的检测 | 第75页 |
| ·密闭性检测 | 第75页 |
| ·温度控制检测 | 第75页 |
| ·通气量控制检测 | 第75页 |
| ·无菌检测 | 第75页 |
| 3.小结与讨论 | 第75-76页 |
| 第五章 总结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-80页 |
| 缩略语表 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
